Acide pyruvique dans le sang
Signification clinique et diagnostique de l'étude
Norme : 0,05-0,10 mmol/l dans le sérum sanguin des adultes.
Teneur en PVC augmente dans des conditions hypoxiques causées par une insuffisance cardiovasculaire, pulmonaire, cardiorespiratoire sévère, une anémie, des néoplasmes malins, une hépatite aiguë et d'autres maladies du foie (plus prononcées aux stades terminaux de la cirrhose du foie), une toxicose, un diabète sucré insulino-dépendant, une acidocétose diabétique, une alcalose respiratoire, urémie , dystrophie hépato-cérébrale, hyperfonctionnement des systèmes hypophyso-surrénalien et sympathique-surrénalien, ainsi que l'introduction de camphre, de strychnine, d'adrénaline et lors d'efforts physiques intenses, de tétanie, de convulsions (avec épilepsie).
Valeur clinique et diagnostique de la détermination de la teneur en acide lactique dans le sang
Acide lactique(MK) est le produit final de la glycolyse et de la glycogénolyse. Une quantité importante se forme dans muscles.À partir du tissu musculaire, MK avec le flux sanguin pénètre dans le foie, où il est utilisé pour la synthèse du glycogène. De plus, une partie de l'acide lactique du sang est absorbée par le muscle cardiaque, qui l'utilise comme matière énergétique.
Niveau d'UA dans le sang augmente dans des conditions hypoxiques, lésions tissulaires inflammatoires purulentes aiguës, hépatite aiguë, cirrhose du foie, insuffisance rénale, néoplasmes malins, diabète sucré (chez environ 50 % des patients), urémie légère, infections (en particulier pyélonéphrite), endocardite septique aiguë, poliomyélite, maladies graves vaisseaux sanguins, leucémie, effort musculaire intense et prolongé, épilepsie, tétanie, tétanos, états convulsifs, hyperventilation, grossesse (au troisième trimestre).
Les lipides sont des substances chimiquement diverses qui ont un certain nombre de propriétés physiques, physicochimiques et biologiques communes. Ils se caractérisent par leur capacité à se dissoudre dans l'éther, le chloroforme, d'autres solvants gras et seulement légèrement (et pas toujours) dans l'eau, et forment également le principal composant structurel des cellules vivantes avec les protéines et les glucides. Les propriétés inhérentes des lipides sont déterminées par les caractéristiques de la structure de leurs molécules.
Le rôle des lipides dans l'organisme est très diversifié. Certains d'entre eux servent de forme de dépôt (triacylglycérols, TG) et de transport (acides gras libres - FFA) de substances dont la décomposition libère une grande quantité d'énergie, d'autres sont les composants structurels les plus importants des membranes cellulaires (cholestérol libre et phospholipides). Les lipides sont impliqués dans les processus de thermorégulation, la protection des organes vitaux (par exemple, les reins) contre les influences mécaniques (blessures), la perte de protéines, la création d'élasticité de la peau, la protégeant de l'élimination excessive de l'humidité.
Certains des lipides sont des substances biologiquement actives qui ont les propriétés de modulateurs de l'influence hormonale (prostaglandines) et de vitamines (acides gras polyinsaturés). De plus, les lipides favorisent l'absorption des vitamines liposolubles A, D, E, K ; agir comme antioxydants (vitamines A, E), régulant largement le processus d'oxydation radicalaire de composés physiologiquement importants ; déterminer la perméabilité des membranes cellulaires vis-à-vis des ions et des composés organiques.
Les lipides servent de précurseurs à un certain nombre de stéroïdes ayant un effet biologique prononcé - acides biliaires, vitamines du groupe D, hormones sexuelles, hormones du cortex surrénalien.
Le concept de «lipides totaux» du plasma comprend les graisses neutres (triacylglycérols), leurs dérivés phosphorylés (phospholipides), le cholestérol libre et lié à l'ester, les glycolipides, les acides gras non estérifiés (libres).
Signification clinique et diagnostique de la détermination du niveau de lipides totaux dans le plasma sanguin (sérum)
La norme est de 4,0 à 8,0 g / l.
Hyperlipidémie (hyperlipémie) - une augmentation de la concentration de lipides plasmatiques totaux en tant que phénomène physiologique peut être observée 1,5 heure après un repas. L'hyperlipémie alimentaire est d'autant plus prononcée que le taux de lipides dans le sang du patient à jeun est faible.
La concentration de lipides dans le sang change dans un certain nombre de conditions pathologiques. Ainsi, chez les patients diabétiques, en plus de l'hyperglycémie, il existe une hyperlipémie prononcée (souvent jusqu'à 10,0-20,0 g / l). Avec le syndrome néphrotique, en particulier la néphrose lipoïde, la teneur en lipides dans le sang peut atteindre des chiffres encore plus élevés - 10,0 à 50,0 g / l.
L'hyperlipémie est un phénomène constant chez les patients atteints de cirrhose biliaire du foie et chez les patients atteints d'hépatite aiguë (en particulier dans la période ictérique). Des lipides sanguins élevés se retrouvent généralement chez les personnes souffrant de néphrite aiguë ou chronique, en particulier si la maladie s'accompagne d'un œdème (dû à l'accumulation de LDL et de VLDL plasmatiques).
Les mécanismes physiopathologiques qui provoquent des changements dans le contenu de toutes les fractions de lipides totaux déterminent, dans une mesure plus ou moins grande, un changement prononcé de la concentration de ses sous-fractions constitutives : cholestérol, phospholipides totaux et triacylglycérols.
Signification clinique et diagnostique de l'étude du cholestérol (CS) dans le sérum (plasma) du sang
L'étude du taux de cholestérol dans le sérum (plasma) du sang ne fournit pas d'informations diagnostiques précises sur une maladie spécifique, mais ne reflète que la pathologie du métabolisme des lipides dans le corps.
Selon des études épidémiologiques, le taux supérieur de cholestérol dans le plasma sanguin de personnes pratiquement en bonne santé âgées de 20 à 29 ans est de 5,17 mmol/l.
Dans le plasma sanguin, le cholestérol se trouve principalement dans la composition des LDL et des VLDL, et 60 à 70 % de celui-ci est sous forme d'esters (cholestérol lié) et 30 à 40 % sous forme de cholestérol libre non estérifié. . Le cholestérol lié et libre constitue la quantité de cholestérol total.
Un risque élevé de développer une athérosclérose coronarienne chez les personnes âgées de 30 à 39 ans et de plus de 40 ans survient à des taux de cholestérol supérieurs à 5,20 et 5,70 mmol/l, respectivement.
L'hypercholestérolémie est le facteur de risque le plus prouvé d'athérosclérose coronarienne. Ceci a été confirmé par de nombreuses études épidémiologiques et cliniques qui ont établi un lien entre l'hypercholestérolémie et l'athérosclérose coronarienne, l'incidence de la maladie coronarienne et l'infarctus du myocarde.
Le taux de cholestérol le plus élevé est observé dans les troubles génétiques du métabolisme de la LP : hypercholestérolémie familiale homo-hétérozygote, hyperlipidémie familiale combinée, hypercholestérolémie polygénique.
Dans un certain nombre de conditions pathologiques, une hypercholestérolémie secondaire se développe. . On l'observe dans les maladies du foie, les lésions rénales, les tumeurs malignes du pancréas et de la prostate, la goutte, les maladies coronariennes, l'infarctus aigu du myocarde, l'hypertension, les troubles endocriniens, l'alcoolisme chronique, la glycogénose de type I, l'obésité (dans 50 à 80 % des cas) .
Une diminution des taux de cholestérol plasmatique est observée chez les patients souffrant de malnutrition, avec des lésions du système nerveux central, un retard mental, une insuffisance chronique du système cardiovasculaire, une cachexie, une hyperthyroïdie, des maladies infectieuses aiguës, une pancréatite aiguë, des processus inflammatoires purulents aigus dans les tissus mous , états fébriles, tuberculose pulmonaire, pneumonie, sarcoïdose respiratoire, bronchite, anémie, ictère hémolytique, hépatite aiguë, tumeurs malignes du foie, rhumatismes.
La détermination de la composition fractionnaire du cholestérol plasmatique sanguin et de ses lipoprotéines individuelles (principalement HDL) est devenue d'une grande importance diagnostique pour juger de l'état fonctionnel du foie. Selon la vision moderne, l'estérification du cholestérol libre dans le HDL est réalisée dans le plasma sanguin en raison de l'enzyme lécithine-cholestérol-acyltransférase, qui se forme dans le foie (il s'agit d'une enzyme hépatique spécifique à un organe). L'enzyme est l'un des principaux composants du HDL - apo - Al, qui est constamment synthétisé dans le foie.
L'albumine, également produite par les hépatocytes, sert d'activateur non spécifique du système d'estérification du cholestérol plasmatique. Ce processus reflète principalement l'état fonctionnel du foie. Si normalement le coefficient d'estérification du cholestérol (c'est-à-dire le rapport de la teneur en cholestérol lié à l'éther au total) est de 0,6-0,8 (ou 60-80%), alors dans l'hépatite aiguë, l'exacerbation de l'hépatite chronique, la cirrhose du foie, l'obstruction la jaunisse, et aussi l'alcoolisme chronique, elle diminue. Une forte diminution de la sévérité du processus d'estérification du cholestérol indique un manque de fonction hépatique.
Signification clinique et diagnostique de l'étude de la concentration des phospholipides totaux dans le sérum sanguin.
Les phospholipides (PL) sont un groupe de lipides contenant, en plus de l'acide phosphorique (en tant que composant essentiel), un alcool (généralement du glycérol), des résidus d'acides gras et des bases azotées. Selon la nature de l'alcool, les PL sont subdivisés en phosphoglycérides, phosphosphingosines et phosphoinositides.
Le niveau de PL total (phosphore lipidique) dans le sérum sanguin (plasma) est augmenté chez les patients atteints d'hyperlipoprotéinémie primaire et secondaire de types IIa et IIb. Cette augmentation est plus prononcée dans la glycogénose de type I, la cholestase, l'ictère obstructif, la cirrhose alcoolique et biliaire, l'hépatite virale (évolution bénigne), le coma rénal, l'anémie posthémorragique, la pancréatite chronique, le diabète sucré sévère, le syndrome néphrotique.
Pour le diagnostic d'un certain nombre de maladies, il est plus instructif d'étudier la composition fractionnaire des phospholipides du sérum sanguin. A cet effet, les méthodes de chromatographie lipidique en couche mince ont été largement utilisées ces dernières années.
Composition et propriétés des lipoprotéines du plasma sanguin
Presque tous les lipides plasmatiques sont associés à des protéines, ce qui leur confère une bonne solubilité dans l'eau. Ces complexes lipides-protéines sont communément appelés lipoprotéines.
Selon le concept moderne, les lipoprotéines sont des particules solubles dans l'eau de haut poids moléculaire, qui sont des complexes de protéines (apoprotéines) et de lipides formés par des liaisons faibles et non covalentes, dans lesquelles des lipides polaires (PL, CXC) et des protéines ("apo" ) constituent la couche monomoléculaire hydrophile de surface entourant et protégeant la phase interne (constituée principalement d'ECS, TG) de l'eau.
En d'autres termes, les LP sont des globules particuliers, à l'intérieur desquels se trouve une goutte de graisse, un noyau (formé principalement de composés non polaires, principalement des triacylglycérols et des esters de cholestérol), délimité de l'eau par une couche superficielle de protéines, de phospholipides et de cholestérol libre. .
Les caractéristiques physiques des lipoprotéines (leur taille, leur poids moléculaire, leur densité), ainsi que les manifestations des propriétés physico-chimiques, chimiques et biologiques, dépendent largement, d'une part, du rapport entre les composants protéique et lipidique de ces particules, de d'autre part, sur la composition des composants protéiques et lipidiques, c'est-à-dire leur nature.
Les plus grosses particules, composées à 98 % de lipides et une très faible proportion (environ 2 %) de protéines, sont les chylomicrons (XM). Ils se forment dans les cellules de la membrane muqueuse de l'intestin grêle et constituent une forme de transport pour les graisses alimentaires neutres, c'est-à-dire TG exogène.
Tableau 7.3 Composition et certaines propriétés des lipoprotéines du sérum sanguin (Komarov F.I., Korovkin B.F., 2000)
| Critères d'évaluation des classes individuelles de lipoprotéines | HDL (alpha-LP) | LDL (bêta-LP) | VLDL (pré-bêta-LP) | SM |
| Densité, kg/l | 1,063-1,21 | 1,01-1,063 | 1,01-0,93 | 0,93 |
| Poids moléculaire de LP, kD | 180-380 | 3000- 128 000 | - | |
| Taille des particules, nm | 7,0-13,0 | 15,0-28,0 | 30,0-70,0 | 500,0 - 800,0 |
| Protéines totales, % | 50-57 | 21-22 | 5-12 | |
| Lipides totaux, % | 43-50 | 78-79 | 88-95 | |
| Cholestérol libre, % | 2-3 | 8-10 | 3-5 | |
| Cholestérol estérifié, % | 19-20 | 36-37 | 10-13 | 4-5 |
| Phospholipides, % | 22-24 | 20-22 | 13-20 | 4-7 |
| Triacylglycérols, % | ||||
| 4-8 | 11-12 | 50-60 | 84-87 |
Si des TG exogènes sont transférés dans le sang par des chylomicrons, alors la forme de transport les TG endogènes sont les VLDL. Leur formation est une réaction protectrice de l'organisme, visant à prévenir l'infiltration graisseuse, et par la suite la dystrophie hépatique.
Les dimensions des VLDL sont en moyenne 10 fois plus petites que la taille du CM (les particules individuelles de VLDL sont 30 à 40 fois plus petites que les particules de CM). Ils contiennent 90% de lipides, dont plus de la moitié du contenu est en TG. 10% du cholestérol plasmatique total est transporté par les VLDL. En raison du contenu d'une grande quantité de TG VLDL, une densité insignifiante est détectée (inférieure à 1,0). Déterminé que LDL et VLDL contiennent 2/3 (60%) du total cholestérol plasma, tandis que 1/3 est représenté par HDL.
HDL- les complexes lipides-protéines les plus denses, car leur teneur en protéines représente environ 50% de la masse des particules. Leur composant lipidique est constitué pour moitié de phospholipides, pour moitié de cholestérol, principalement lié à des esters. Les HDL se forment également en permanence dans le foie et en partie dans l'intestin, ainsi que dans le plasma sanguin suite à la « dégradation » des VLDL.
Si un LDL et VLDL livrer cholestérol du foie vers d'autres tissus(périphérique), y compris paroi vasculaire, alors Les HDL transportent le cholestérol des membranes cellulaires (principalement la paroi vasculaire) vers le foie. Dans le foie, il va à la formation d'acides biliaires. Conformément à cette participation au métabolisme du cholestérol, VLDL et eux-mêmes LDL sont appelés athérogène, un HDL– médicaments antiathérogéniques. L'athérogénicité fait référence à la capacité des complexes lipides-protéines à introduire (transférer) le cholestérol libre contenu dans le LP dans les tissus.
Les HDL entrent en compétition pour les récepteurs de la membrane cellulaire avec les LDL, contrecarrant ainsi l'utilisation des lipoprotéines athérogènes. Étant donné que la monocouche de surface de HDL contient une grande quantité de phospholipides, des conditions favorables sont créées au point de contact de la particule avec la membrane externe de l'endothélium, du muscle lisse et de toute autre cellule pour le transfert de l'excès de cholestérol libre vers le HDL.
Cependant, ce dernier n'est retenu dans la monocouche superficielle de HDL que très peu de temps, car il subit une estérification avec la participation de l'enzyme LCAT. L'ECS formé, étant une substance non polaire, se déplace dans la phase lipidique interne, libérant des postes vacants pour répéter l'acte de capture d'une nouvelle molécule CXC à partir de la membrane cellulaire. D'ici: plus l'activité du LCAT est élevée, plus l'effet anti-athérogène du HDL est efficace, qui sont considérés comme des activateurs de LCAT.
Si l'équilibre entre l'afflux de lipides (cholestérol) dans la paroi vasculaire et leur écoulement est perturbé, des conditions peuvent être créées pour la formation d'une lipoïdose, dont la manifestation la plus célèbre est athérosclérose.
Conformément à la nomenclature ABC des lipoprotéines, on distingue les lipoprotéines primaires et secondaires. Les LP primaires sont formés par n'importe quelle apoprotéine par nature chimique. Ils peuvent conditionnellement être classés comme LDL, qui contiennent environ 95% d'apoprotéine-B. Tout le reste sont des lipoprotéines secondaires, qui sont des complexes associés d'apoprotéines.
Normalement, environ 70 % du cholestérol plasmatique entre dans la composition des LDL et VLDL « athérogènes », alors qu'environ 30 % circule dans la composition des HDL « anti-athérogènes ». Avec ce rapport dans la paroi vasculaire (et d'autres tissus), l'équilibre des taux d'entrée et de sortie de cholestérol est maintenu. Ceci détermine la valeur numérique coefficient de cholestérol l'athérogénicité, qui, avec la distribution indiquée des lipoprotéines du cholestérol total 2,33 (70/30).
Selon les résultats des observations épidémiologiques de masse, à une concentration de cholestérol total dans le plasma de 5,2 mmol / l, un équilibre nul du cholestérol dans la paroi vasculaire est maintenu. Une augmentation du taux de cholestérol total dans le plasma sanguin de plus de 5,2 mmol / l entraîne son dépôt progressif dans les vaisseaux et, à une concentration de 4,16 à 4,68 mmol / l, un bilan négatif du cholestérol dans la paroi vasculaire est observé. Le taux de cholestérol plasmatique total (sérum) supérieur à 5,2 mmol / l est considéré comme pathologique.
Tableau 7.4 Échelle d'évaluation de la probabilité de développer une maladie coronarienne et d'autres manifestations de l'athérosclérose
(Komarov FI, Korovkin BF, 2000)
lipides appelées graisses qui pénètrent dans le corps avec les aliments et se forment dans le foie. Le sang (plasma ou sérum) contient 3 grandes classes de lipides : les triglycérides (TG), le cholestérol (CS) et ses esters, les phospholipides (PL).
Les lipides sont capables d'attirer l'eau, mais la plupart d'entre eux ne se dissolvent pas dans le sang. Ils sont transportés à l'état lié aux protéines (sous forme de lipoprotéines ou, en d'autres termes, de lipoprotéines). Les lipoprotéines diffèrent non seulement par leur composition, mais aussi par leur taille et leur densité, mais leur structure est presque la même. La partie centrale (noyau) est représentée par le cholestérol et ses esters, acides gras, triglycérides. L'enveloppe de la molécule est constituée de protéines (apoprotéines) et de lipides hydrosolubles (phospholipides et cholestérol non estérifié). La partie externe des apoprotéines est capable de former des liaisons hydrogène avec les molécules d'eau. Ainsi, les lipoprotéines peuvent se dissoudre partiellement dans les graisses, partiellement dans l'eau.
Les chylomicrons après avoir pénétré dans le sang se décomposent en glycérol et en acides gras, entraînant la formation de lipoprotéines. Les résidus de chylomicrons contenant du cholestérol sont traités dans le foie.
À partir du cholestérol et des triglycérides du foie, des lipoprotéines de très basse densité (VLDL) se forment, qui cèdent une partie des triglycérides aux tissus périphériques, tandis que leurs restes retournent au foie et sont convertis en lipoprotéines de basse densité (LDL).
Les LPN II sont des transporteurs de cholestérol pour les tissus périphériques, qui sont utilisés pour construire des membranes cellulaires et des réactions métaboliques. Dans ce cas, le cholestérol non estérifié pénètre dans le plasma sanguin et se lie aux lipoprotéines de haute densité (HDL). Le cholestérol estérifié (associé aux esters) est converti en VLDL. Puis le cycle se répète.
Le sang contient également des lipoprotéines de densité intermédiaire (LDL), qui sont les restes des chylomicrons et des VLDL et contiennent de grandes quantités de cholestérol. Les LDL dans les cellules hépatiques avec la participation de la lipase sont converties en LDL.
Le plasma sanguin contient 3,5 à 8 g/l de lipides. Une augmentation du taux de lipides dans le sang est appelée hyperlipidémie et une diminution est appelée hypolipidémie. L'indicateur des lipides sanguins totaux ne donne pas une idée détaillée de l'état du métabolisme des graisses dans le corps.
La valeur diagnostique est la détermination quantitative de lipides spécifiques. La composition lipidique du plasma sanguin est présentée dans le tableau.
Composition lipidique du plasma sanguin
| Fraction de lipides | Indicateur de norme | |
| Lipides généraux | 4,6-10,4 mmoles/l | |
| Phospholipides | 1,95-4,9 mmoles/l | |
| Phosphore lipidique | 1,97-4,68 mmoles/l | |
| Graisses neutres | 0-200 mg% | |
| Triglycérides | 0,565-1,695 mmol/l (sérum) | |
| Acides gras non estérifiés | 400-800 mmoles/l | |
| Acides gras libres | 0,3-0,8 µmol/l | |
| Cholestérol total (il existe des normes d'âge) | 3,9-6,5 mmol/l (méthode unifiée) | |
| cholestérol libre | 1,04-2,33 mmoles/l | |
| Esters de cholestérol | 2,33-3,49 mmoles/l | |
| HDL | M | 1,25-4,25g/l |
| ET | 2,5-6,5 g/l | |
| LDL | 3-4,5g/l | |
Les dyslipidémies sont divisées en primaires, associées à des troubles métaboliques congénitaux, et secondaires. Les causes de la dyslipidémie secondaire sont l'inactivité physique et la suralimentation, l'alcoolisme, le diabète sucré, l'hyperthyroïdie, la cirrhose du foie et l'insuffisance rénale chronique. De plus, ils peuvent se développer pendant le traitement par les glucocorticostéroïdes, les B-bloquants, les progestatifs et les œstrogènes. La classification de la dyslipidémie est présentée dans le tableau.
Classification des dyslipidémies
| Type de | Une augmentation des taux sanguins | |
| Lipoprotéine | lipides | |
| je | Chylomicrons | Cholestérol, triglycérides |
| Sur le | LDL | Cholestérol (pas toujours) |
| Type de | Une augmentation des taux sanguins | |
| Lipoprotéine | lipides | |
| Nb | LDL, VLDL | Cholestérol, triglycérides |
| III | VLDL, LPPP | Cholestérol, triglycérides |
| IV | VLDL | Cholestérol (pas toujours), triglycérides |
| V | Chylomicrons, VLDL | Cholestérol, triglycérides |
Le risque de développer des lésions vasculaires athéroscléreuses est évalué par les tests biochimiques suivants :
Détermination des ratios cholestérol total / cholestérol-HDL, cholestérol-LDL / cholestérol-HDL.
Triglycérides
TG - lipides neutres insolubles qui pénètrent dans le plasma à partir de l'intestin ou du foie.
Dans l'intestin grêle, les triglycérides sont synthétisés à partir d'acides gras alimentaires exogènes, de glycérol et de monoacylglycérols.
Les triglycérides formés pénètrent initialement dans les vaisseaux lymphatiques, puis sous forme de chylomicrons (CM) à travers le canal lymphatique thoracique pénètrent dans la circulation sanguine. La durée de vie des HM dans le plasma est courte, ils pénètrent dans les dépôts graisseux de l'organisme.
La présence de HM explique la couleur blanchâtre du plasma après ingestion d'aliments gras. Les HM sont rapidement libérés des TG avec la participation de la lipoprotéine lipase (LPL), les laissant dans les tissus adipeux. Normalement, après un jeûne de 12 heures, HM n'est pas détecté dans le plasma. En raison de la faible teneur en protéines et de la quantité élevée de TG, CM reste sur la ligne de départ dans tous les types d'électrophorèse.
Parallèlement aux TG alimentaires, des TG endogènes se forment dans le foie à partir d'acides gras synthétisés de manière endogène et de triphosphoglycérol, dont la source est le métabolisme des glucides. Ces triglycérides sont transportés par le sang vers les dépôts de graisse du corps dans le cadre des lipoprotéines de très basse densité (VLDL). Les VLDL sont la principale forme de transport des TG endogènes. La teneur en VLDL dans le sang est corrélée à l'augmentation des taux de TG. Avec une teneur élevée en VLDL, le plasma sanguin semble trouble.
Pour étudier les TG, le sérum sanguin ou le plasma sanguin est utilisé après un jeûne de 12 heures. Le stockage des échantillons est possible pendant 5 à 7 jours à une température de 4 °C, la congélation et la décongélation répétées des échantillons ne sont pas autorisées.
Cholestérol
Le cholestérol fait partie intégrante de toutes les cellules du corps. Il fait partie des membranes cellulaires, LP, est un précurseur des hormones stéroïdiennes (minérales et glucocorticoïdes, androgènes et oestrogènes).
Le cholestérol est synthétisé dans toutes les cellules du corps, mais la majeure partie se forme dans le foie et accompagne les aliments. Le corps synthétise jusqu'à 1 g de cholestérol par jour.
Le CS est un composé hydrophobe dont la principale forme de transport dans le sang est constituée par les complexes micellaires protéine-lipide de LP. Leur couche superficielle est formée par des têtes hydrophiles de phospholipides, des apolipoprotéines, le cholestérol estérifié est plus hydrophile que le cholestérol, par conséquent, les esters de cholestérol se déplacent de la surface vers le centre de la micelle lipoprotéique.
La majeure partie du cholestérol est transportée dans le sang sous forme de LDL du foie vers les tissus périphériques. L'apolipoprotéine LDL est l'apo-B. Les LDL interagissent avec les récepteurs apo-B des membranes plasmiques des cellules, sont capturés par eux par endocytose. Le cholestérol libéré dans les cellules est utilisé pour construire des membranes et est estérifié. Le cholestérol de la surface des membranes cellulaires pénètre dans un complexe micellaire constitué de phospholipides, apo-A, et forme HDL. Le cholestérol HDL subit une estérification sous l'action de la lécithinecholestérolacyl transférase (LCAT) et pénètre dans le foie. Dans le foie, le cholestérol dérivé du HDL subit une hydroxylation microsomale et se transforme en acides biliaires. Son excrétion se produit à la fois dans la composition de la bile et sous forme de cholestérol libre ou de ses esters.
L'étude du taux de cholestérol ne fournit pas d'informations diagnostiques sur une maladie spécifique, mais caractérise la pathologie du métabolisme des lipides et des lipides. Les taux les plus élevés de cholestérol surviennent dans les troubles génétiques du métabolisme de la LP : hypercholestérolémie familiale homo- et hétérozygote, hyperlipidémie familiale combinée, hypercholestérolémie polygénique. Dans un certain nombre de maladies, une hypercholestérolémie secondaire se développe: syndrome néphrotique, diabète sucré, hypothyroïdie, alcoolisme.
Pour évaluer l'état du métabolisme des lipides et des LP, les valeurs de cholestérol total, TG, cholestérol HDL, cholestérol VLDL, cholestérol LDL sont déterminées.
La détermination de ces valeurs vous permet de calculer le coefficient d'athérogénicité (Ka):
Ka = cholestérol total - cholestérol HDL / cholestérol VLDL,
Et d'autres indicateurs. Pour les calculs, il faut aussi connaître les proportions suivantes :
Cholestérol VLDL \u003d TG (mmol / l) / 2,18; Cholestérol LDL = cholestérol total - (cholestérol HDL + cholestérol VLDL).
Hyperlipidémie (hyperlipémie) - une augmentation de la concentration des lipides plasmatiques totaux en tant que phénomène physiologique peut être observée 1 à 4 heures après un repas. L'hyperlipémie alimentaire est d'autant plus prononcée que le taux de lipides dans le sang du patient à jeun est faible.
La concentration de lipides dans le sang change dans un certain nombre de conditions pathologiques:
Syndrome néphrotique, néphrose lipoïde, néphrite aiguë et chronique ;
Cirrhose biliaire du foie, hépatite aiguë;
Obésité - athérosclérose;
hypothyroïdie ;
Pancréatite, etc.
L'étude du taux de cholestérol (CS) ne reflète que la pathologie du métabolisme des lipides dans l'organisme. L'hypercholestérolémie est un facteur de risque documenté d'athérosclérose coronarienne. Le CS est un composant essentiel de la membrane de toutes les cellules, les propriétés physicochimiques particulières des cristaux de CS et la conformation de ses molécules contribuent à l'ordre et à la mobilité des phospholipides dans les membranes avec des changements de température, ce qui permet à la membrane d'être dans un état de phase intermédiaire (« gel-cristal liquide ») et maintenir les fonctions physiologiques . Le CS est utilisé comme précurseur dans la biosynthèse des hormones stéroïdes (gluco- et minéralocorticoïdes, hormones sexuelles), de la vitamine D3 et des acides biliaires. Il est conditionnellement possible de distinguer 3 pools de CS :
A - échange rapide (30 g);
B - échangeant lentement (50 g);
B - échange très lent (60 g).
Le cholestérol endogène est synthétisé en quantité importante dans le foie (80%). Le cholestérol exogène pénètre dans l'organisme dans la composition des produits d'origine animale. Le transport du cholestérol du foie vers les tissus extrahépatiques est effectué
LDL. L'excrétion du cholestérol du foie des tissus extrahépatiques vers le foie est produite par des formes matures de HDL (50 % LDL, 25 % HDL, 17 % VLDL, 5 % HM).
Hyperlipoprotéinémie et hypercholestérolémie (classification de Fredrickson) :
type 1 - hyperchylomicronémie;
type 2 - a - hyper-β-lipoprotéinémie, b - hyper-β et hyperpré-β-lipoprotéinémie;
type 3 - dis-β-lipoprotéinémie;
type 4 - hyper-pré-β-lipoprotéinémie;
Type 5 - hyper-pré-β-lipoprotéinémie et hyperchylomicronémie.
Les plus athérogènes sont les types 2 et 3.
Phospholipides - un groupe de lipides contenant, en plus de l'acide phosphorique (un composant obligatoire), de l'alcool (généralement du glycérol), des résidus d'acides gras et des bases azotées. Dans la pratique clinique et de laboratoire, il existe une méthode pour déterminer le niveau de phospholipides totaux, dont le niveau augmente chez les patients atteints d'hyperlipoprotéinémie primaire et secondaire IIa et IIb. La diminution se produit dans un certain nombre de maladies:
Dystrophie alimentaire ;
dégénérescence graisseuse du foie,
cirrhose portale;
Progression de l'athérosclérose ;
Hyperthyroïdie, etc.
La peroxydation lipidique (LPO) est un processus radicalaire dont l'initiation se produit lors de la formation d'espèces réactives de l'oxygène - le superoxyde O 2 . ; radical hydroxyle HO . ; radical hydroperoxyde HO 2 . ; oxygène singulet O 2 ; l'ion hypochlorite ClO - . Les principaux substrats de la peroxydation lipidique sont les acides gras polyinsaturés qui sont dans la structure des phospholipides membranaires. Les ions métalliques de fer sont le catalyseur le plus puissant. La LPO est un processus physiologique important pour l'organisme, car elle régule la perméabilité membranaire, affecte la division et la croissance cellulaires, déclenche la phagosynthèse et est une voie de biosynthèse de certaines substances biologiques (prostaglandines, thromboxanes). Le taux de LPO est contrôlé par le système antioxydant (acide ascorbique, acide urique, β-carotène, etc.). La perte d'équilibre entre les deux systèmes entraîne la mort des cellules et des structures cellulaires.
Pour le diagnostic, il est d'usage de déterminer la teneur en produits de peroxydation lipidique dans le plasma et les érythrocytes (conjugués diéniques, malondialdéhyde, bases de Schiff), la concentration du principal antioxydant naturel - l'alpha-tocophérol avec le calcul du coefficient MDA/TF. Un test intégral pour évaluer la peroxydation lipidique est la détermination de la perméabilité des membranes érythrocytaires.
2. échange de pigments un ensemble de transformations complexes de diverses substances colorées dans le corps humain et animal.
Le pigment sanguin le plus connu est l'hémoglobine (chromoprotéine, qui se compose de la partie protéique de la globine et du groupe prosthétique, représenté par 4 hèmes, chaque hème est constitué de 4 noyaux pyrrole, qui sont interconnectés par des ponts méthine, au centre se trouve un ion fer avec un degré d'oxydation de 2 +) . La durée de vie moyenne d'un érythrocyte est de 100 à 110 jours. À la fin de cette période, la destruction et la destruction de l'hémoglobine se produisent. Le processus de décomposition commence déjà dans le lit vasculaire et se termine dans les éléments cellulaires du système des cellules mononucléaires phagocytaires (cellules de Kupffer du foie, histiocytes du tissu conjonctif, plasmocytes de la moelle osseuse). L'hémoglobine du lit vasculaire se lie à l'haptoglobine plasmatique et est retenue dans le lit vasculaire sans passer par le filtre rénal. En raison de l'action de type trypsine de la chaîne bêta de l'haptoglobine et des changements conformationnels causés par son influence dans l'anneau de porphyrine hémique, les conditions sont créées pour une destruction plus facile de l'hémoglobine dans les éléments cellulaires du système mononucléaire phagocytaire. ainsi formé verdoglobine(synonymes : verdohémoglobine, choléglobine, pseudohémoglobine) est un complexe constitué de globine, d'un système cyclique de porphyrine brisé et de fer ferrique. D'autres transformations conduisent à la perte de fer et de globine par la verdoglobine, à la suite de quoi le cycle de porphyrine se déplie en une chaîne et un pigment biliaire vert de faible poids moléculaire se forme - biliverdine. Presque tout est réduit par voie enzymatique au pigment biliaire rouge-jaune le plus important - bilirubine, qui est un composant commun du plasma sanguin.Sur la surface de la membrane plasmique de l'hépatocyte subit une dissociation. Dans ce cas, la bilirubine libérée forme un associé temporaire avec les lipides de la membrane plasmique et la traverse en raison de l'activité de certains systèmes enzymatiques. Un passage supplémentaire de la bilirubine libre dans la cellule se produit avec la participation de deux protéines porteuses dans ce processus : la ligandine (elle transporte la majeure partie de la bilirubine) et la protéine Z.
La ligandine et la protéine Z se trouvent également dans les reins et les intestins, par conséquent, en cas d'insuffisance hépatique, elles sont libres de compenser l'affaiblissement des processus de détoxification dans cet organe. Les deux sont assez bien solubles dans l'eau, mais n'ont pas la capacité de se déplacer à travers la couche lipidique de la membrane. En raison de la liaison de la bilirubine à l'acide glucuronique, la toxicité inhérente de la bilirubine libre est largement perdue. La bilirubine libre hydrophobe et lipophile, se dissolvant facilement dans les lipides membranaires et pénétrant ainsi dans les mitochondries, y découple la respiration et la phosphorylation oxydative, perturbe la synthèse des protéines, le flux d'ions potassium à travers la membrane des cellules et des organites. Cela affecte négativement l'état du système nerveux central, provoquant un certain nombre de symptômes neurologiques caractéristiques chez les patients.
Les bilirubine-lucuronides (ou bilirubine conjuguée liée), contrairement à la bilirubine libre, réagissent immédiatement avec un diazoréactif (bilirubine « directe »). Il faut garder à l'esprit que dans le plasma sanguin lui-même, la bilirubine non conjuguée à l'acide glucuronique peut être associée ou non à l'albumine. La dernière fraction (non associée à l'albumine, aux lipides ou à d'autres composants sanguins de la bilirubine) est la plus toxique.
Les bilirubinglucuronides, grâce aux systèmes enzymatiques des membranes, se déplacent activement à travers elles (contre le gradient de concentration) dans les voies biliaires, étant libérées avec la bile dans la lumière intestinale. Dans celui-ci, sous l'influence des enzymes produites par la microflore intestinale, la liaison glucuronide est rompue. La bilirubine libre libérée est restaurée avec la formation dans l'intestin grêle, d'abord de mésobilirubine, puis de mésobilinogène (urobilinogène). Normalement, une certaine partie du mésobilinogène, absorbée dans l'intestin grêle et dans la partie supérieure du gros intestin, pénètre dans le foie par le système de la veine porte, où elle est presque complètement détruite (par oxydation), se transformant en composés dipyrrole - propent -diopent et mésobilileucan.
Le mésobilinogène (urobilinogène) ne pénètre pas dans la circulation générale. Une partie de celui-ci, avec les produits de destruction, est à nouveau envoyée dans la lumière intestinale dans le cadre de la bile (circulation entéro-hépotique). Cependant, même avec les modifications les plus mineures du foie, sa fonction de barrière est en grande partie « supprimée » et le mésobilinogène pénètre d'abord dans la circulation générale, puis dans l'urine. La majeure partie de celle-ci est envoyée de l'intestin grêle au gros intestin, où, sous l'influence de la microflore anaérobie (E. coli et autres bactéries), elle subit une restauration supplémentaire avec la formation de stercobilinogène. Le stercobilinogène résultant (quantité quotidienne de 100 à 200 mg) est presque complètement excrété dans les fèces. Dans l'air, il s'oxyde et se transforme en stercobiline, qui est l'un des pigments fécaux. Une petite partie du stercobilinogène est absorbée par la membrane muqueuse du gros intestin dans le système de la veine cave inférieure, délivrée avec le sang aux reins et excrétée dans l'urine.
Ainsi, dans l'urine d'une personne en bonne santé, le mésobilinogène (urobilinogène) est absent, mais il contient de la stercobiline (qui est souvent appelée à tort "urobiline")
Pour déterminer la teneur en bilirubine dans le sérum (plasma) du sang, on utilise principalement des méthodes de recherche chimiques et physico-chimiques, parmi lesquelles on trouve la colorimétrie, la spectrophotométrie (manuelle et automatisée), la chromatographie, la fluorimétrie et quelques autres.
L'apparition d'un ictère, qui se manifeste généralement lorsque le taux de bilirubine dans le sang est de 27 à 34 μmol / l ou plus, est l'un des signes subjectifs importants d'une violation du métabolisme des pigments. Les causes de l'hyperbilirubinémie peuvent être : 1) une hémolyse accrue des érythrocytes (plus de 80 % de la bilirubine totale est représentée par un pigment non conjugué) ; 2) violation de la fonction des cellules hépatiques et 3) retard dans l'écoulement de la bile (l'hyperbilirubinémie est d'origine hépatique, si plus de 80% de la bilirubine totale est de la bilirubine conjuguée). Dans le premier cas, ils parlent de la soi-disant jaunisse hémolytique, dans le second - du parenchyme (peut être causé par des défauts héréditaires dans les processus de transport de la bilirubine et de sa glucuronidation), dans le troisième - de la mécanique (ou obstructive, congestive ) jaunisse.
Avec ictère parenchymateux il y a des changements destructeurs-dystrophiques dans les cellules parenchymateuses du foie et des changements infiltrants dans le stroma, entraînant une augmentation de la pression dans les voies biliaires. La stagnation de la bilirubine dans le foie est également facilitée par un fort affaiblissement des processus métaboliques dans les hépatocytes affectés, qui perdent la capacité d'effectuer normalement divers processus biochimiques et physiologiques, en particulier le transfert de la bilirubine liée des cellules vers la bile contre un gradient de concentration. Une augmentation de la concentration de bilirubine conjuguée dans le sang entraîne son apparition dans les urines.
Le signe le plus "subtil" de lésions hépatiques dans l'hépatite est l'apparition mésobilinogène(urobilinogène) dans l'urine.
Dans l'ictère parenchymateux, la concentration de bilirubine conjuguée (conjuguée) dans le sang augmente principalement. La teneur en bilirubine libre augmente, mais dans une moindre mesure.
Au cœur de la pathogenèse de l'ictère obstructif se trouve l'arrêt de l'écoulement de la bile dans l'intestin, ce qui entraîne la disparition du stercobilinogène de l'urine. Avec l'ictère congestif, la teneur en bilirubine conjuguée dans le sang augmente principalement. L'ictère cholestatique extrahépatique s'accompagne d'une triade de signes cliniques : selles décolorées, urine foncée et démangeaisons cutanées. La cholestase intrahépatique se manifeste cliniquement par des démangeaisons cutanées et un ictère. Dans une étude de laboratoire, une hyperbilirubinémie (due à une association), une bilirubinurie, une augmentation de la phosphatase alcaline avec des valeurs normales de transaminases dans le sérum sanguin sont notées.
Ictère hémolytique en raison de l'hémolyse des érythrocytes et, par conséquent, de la formation accrue de bilirubine. Une augmentation de la teneur en bilirubine libre est l'un des principaux signes d'ictère hémolytique.
Dans la pratique clinique, on distingue les hyperbilirubinémies fonctionnelles congénitales et acquises, causées par une violation de l'élimination de la bilirubine du corps (présence de défauts dans les systèmes enzymatiques et autres pour le transfert de la bilirubine à travers les membranes cellulaires et sa glucuronidation dans celles-ci). Le syndrome de Gilbert est une maladie chronique bénigne héréditaire qui survient avec une hyperbilirubinémie non hémolytique non conjuguée modérément sévère. Hyperbilirubinémie post-hépatitique Kalka - défaut enzymatique acquis entraînant une augmentation du taux de bilirubine libre dans le sang, ictère congénital familial non hémolytique de Crigler-Najjar (absence de glucuronyl transférase dans les hépatocytes), ictère dans l'hypothyroïdie congénitale (la thyroxine stimule l'enzyme glucuronyl système transférase), ictère néonatal physiologique, ictère médicamenteux, etc.
Les troubles du métabolisme des pigments peuvent être causés par des modifications non seulement des processus de dégradation de l'hème, mais également de la formation de ses précurseurs - les porphyrines (composés organiques cycliques basés sur le cycle porphine, constitués de 4 pyrroles reliés par des ponts méthine). Les porphyries sont un groupe de maladies héréditaires accompagnées d'un déficit génétique de l'activité des enzymes impliquées dans la biosynthèse de l'hème, dans lesquelles une augmentation de la teneur en porphyrines ou leurs précurseurs se retrouve dans l'organisme, ce qui provoque un certain nombre de signes cliniques ( formation excessive de produits métaboliques, provoque le développement de symptômes neurologiques et (ou) une augmentation de la photosensibilité cutanée).
Les méthodes les plus utilisées pour le dosage de la bilirubine sont basées sur son interaction avec un réactif diazoïque (réactif d'Ehrlich). La méthode Jendrassik-Grof s'est généralisée. Dans cette méthode, un mélange de caféine et de benzoate de sodium dans un tampon acétate est utilisé comme "libérateur" de bilirubine. Le dosage enzymatique de la bilirubine est basé sur son oxydation par la bilirubine oxydase. Il est possible de déterminer la bilirubine non conjuguée par d'autres méthodes d'oxydation enzymatique.
Actuellement, le dosage de la bilirubine par les méthodes de "chimie sèche" se généralise, notamment dans les diagnostics express.
Vitamines.
Les vitamines sont appelées substances irremplaçables de faible poids moléculaire qui pénètrent dans le corps avec de la nourriture de l'extérieur et sont impliquées dans la régulation des processus biochimiques au niveau des enzymes.
Similitudes et différences entre les vitamines et les hormones.
similarité- réguler le métabolisme dans le corps humain grâce à des enzymes :
· vitamines font partie des enzymes et sont des coenzymes ou des cofacteurs ;
· Les hormones ou régulent l'activité d'enzymes déjà existantes dans la cellule, ou sont des inducteurs ou des répresseurs dans la biosynthèse des enzymes nécessaires.
Différence:
· vitamines- composés organiques de faible poids moléculaire, facteurs exogènes de régulation du métabolisme et venant de l'extérieur avec les aliments.
· Les hormones- composés organiques de haut poids moléculaire, facteurs endogènes synthétisés dans les glandes endocrines du corps en réponse aux modifications de l'environnement externe ou interne du corps humain, et régulent également le métabolisme.
Les vitamines sont classées en :
1. Liposoluble : A, D, E, K, A.
2. Hydrosolubles : groupe B, PP, H, C, THFA (acide tétrahydrofolique), acide pantothénique (B 3), P (rutine).
Vitamine A (rétinol, antixérophtalmique) - la structure chimique est représentée par un cycle β-ionone et 2 résidus isoprène ; le besoin dans le corps est de 2,5 à 30 mg par jour.
Le signe le plus précoce et spécifique de l'hypovitaminose A est l'héméralopie (cécité nocturne) - une violation de la vision crépusculaire. Cela se produit en raison d'un manque de pigment visuel - la rhodopsine. La rhodopsine contient du rétinal (vitamine A aldéhyde) en tant que groupe actif - on le trouve dans les bâtonnets rétiniens. Ces cellules (bâtonnets) perçoivent des signaux lumineux de faible intensité.
Rhodopsine = opsine (protéine) + cis-rétinienne.
Lorsque la rhodopsine est excitée par la lumière, le cis-rétinal, à la suite de réarrangements enzymatiques à l'intérieur de la molécule, passe en tout-trans-rétinal (dans la lumière). Cela conduit à un réarrangement conformationnel de toute la molécule de rhodopsine. La rhodopsine se dissocie en opsine et trans-rétinienne, qui est un déclencheur qui excite une impulsion dans les terminaisons du nerf optique, qui est ensuite transmise au cerveau.
Dans l'obscurité, à la suite de réactions enzymatiques, le trans-rétinal est à nouveau converti en cis-rétinal et, combiné à l'opsine, forme la rhodopsine.
La vitamine A affecte également la croissance et le développement de l'épithélium tégumentaire. Par conséquent, avec le béribéri, on observe des lésions de la peau, des muqueuses et des yeux, qui se manifestent par une kératinisation pathologique de la peau et des muqueuses. Les patients développent une xérophtalmie - sécheresse de la cornée de l'œil, car il y a un blocage du canal lacrymal à la suite de la kératinisation de l'épithélium. Depuis que l'œil cesse d'être lavé avec une larme, qui a un effet bactéricide, une conjonctivite se développe, une ulcération et un ramollissement de la cornée - kératomalacie. Avec le béribéri A, il peut également y avoir des dommages à la membrane muqueuse du tractus gastro-intestinal, des voies respiratoires et génito-urinaires. Résistance violée de tous les tissus aux infections. Avec le développement du béribéri dans l'enfance - retard de croissance.
À l'heure actuelle, la participation de la vitamine A à la protection des membranes cellulaires contre les agents oxydants a été démontrée, c'est-à-dire que la vitamine A a une fonction antioxydante.
Densité différente et sont des indicateurs du métabolisme des lipides. Il existe différentes méthodes de dosage quantitatif des lipides totaux : colorimétrique, néphélométrique.
Le principe de la méthode. Les produits d'hydrolyse des lipides insaturés forment avec le réactif phosphovaniline un composé rouge dont l'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la teneur en lipides totaux.
La plupart des lipides se trouvent dans le sang non pas à l'état libre, mais dans le cadre de complexes protéines-lipides : chylomicrons, α-lipoprotéines, β-lipoprotéines. Les lipoprotéines peuvent être séparées par différentes méthodes : centrifugation dans des solutions salines de différentes densités, électrophorèse, chromatographie sur couche mince. Lors de l'ultracentrifugation, des chylomicrons et des lipoprotéines de densité différente sont isolés : élevée (HDL - α-lipoprotéines), faible (LDL - β-lipoprotéines), très faible (VLDL - pré-β-lipoprotéines), etc.
Les fractions de lipoprotéines diffèrent par la quantité de protéines, le poids moléculaire relatif des lipoprotéines et le pourcentage de composants lipidiques individuels. Ainsi, les α-lipoprotéines contenant une grande quantité de protéines (50-60%) ont une densité relative plus élevée (1,063-1,21), tandis que les β-lipoprotéines et les pré-β-lipoprotéines contiennent moins de protéines et une quantité importante de lipides - jusqu'à 95 % du poids moléculaire relatif total et faible densité relative (1,01-1,063).
Principe de la méthode. Lorsque les LDL du sérum sanguin interagissent avec un réactif héparinique, il apparaît une turbidité dont l'intensité est déterminée par photométrie. Le réactif héparine est un mélange d'héparine et de chlorure de calcium.
Matériel à l'étude: sérum sanguin.
Réactifs: solution de CaCl 2 à 0,27 %, solution d'héparine à 1 %.
Équipement: micropipette, FEK, cuvette avec un trajet optique de 5 mm, tubes à essai.
LE PROGRÈS. 2 ml d'une solution à 0,27% de CaCl 2 et 0,2 ml de sérum sanguin sont ajoutés au tube à essai, mélangés. Déterminer la densité optique de la solution (E 1) contre une solution de CaCl 2 à 0,27 % dans des cuvettes avec un filtre anti-lumière rouge (630 nm). La solution de la cuvette est versée dans un tube à essai, 0,04 ml d'une solution d'héparine à 1% est ajoutée avec une micropipette, mélangée et exactement après 4 minutes, la densité optique de la solution (E 2) est à nouveau déterminée dans les mêmes conditions .
La différence de densité optique est calculée et multipliée par 1000 - le coefficient empirique proposé par Ledvina, car la construction d'une courbe d'étalonnage est associée à un certain nombre de difficultés. La réponse est exprimée en g/l.
x (g / l) \u003d (E 2 - E 1) 1000.
. La teneur en LDL (b-lipoprotéines) dans le sang varie en fonction de l'âge, du sexe et est normalement de 3,0 à 4,5 g / l. Une augmentation de la concentration de LDL est observée dans l'athérosclérose, la jaunisse obstructive, l'hépatite aiguë, les maladies chroniques du foie, le diabète, la glycogénose, la xanthomatose et l'obésité, une diminution du b-plasmocytome. La teneur moyenne en cholestérol des LDL est d'environ 47 %.
Détermination du cholestérol total dans le sérum sanguin selon la réaction de Liebermann-Burchard (méthode Ilk)
Le cholestérol exogène en quantité de 0,3 à 0,5 g vient avec la nourriture et le cholestérol endogène est synthétisé dans le corps en quantité de 0,8 à 2 g par jour. Surtout beaucoup de cholestérol est synthétisé dans le foie, les reins, les glandes surrénales, la paroi artérielle. Le cholestérol est synthétisé à partir de 18 molécules d'acétyl-CoA, 14 molécules de NADPH, 18 molécules d'ATP.
Lorsque l'anhydride acétique et l'acide sulfurique concentré sont ajoutés au sérum sanguin, le liquide devient rouge, bleu et enfin vert. La réaction est due à la formation d'acide sulfonique vert cholestérylène.
Réactifs: réactif de Liebermann-Burchard (mélange d'acide acétique glacial, d'anhydride acétique et d'acide sulfurique concentré dans un rapport de 1:5:1), solution standard de cholestérol (1,8 g/l).
Équipement: éprouvettes sèches, pipettes sèches, FEK, cuvettes avec un trajet optique de 5 mm, un thermostat.
LE PROGRÈS. Tous les tubes à essai, pipettes, cuvettes doivent être secs. Il est nécessaire de travailler avec le réactif de Liebermann-Burchard très soigneusement. 2,1 ml du réactif de Liebermann-Burchard sont placés dans un tube sec, 0,1 ml de sérum sanguin non hémolysé est ajouté très lentement le long de la paroi du tube, le tube est vigoureusement secoué, puis thermostaté pendant 20 minutes à 37ºС. Une couleur vert émeraude se développe, qui est colorimétrique sur FEC avec un filtre lumière rouge (630-690 nm) contre le réactif de Liebermann-Burchard. La densité optique obtenue sur le FEC est utilisée pour déterminer la concentration en cholestérol selon la courbe d'étalonnage. La concentration de cholestérol trouvée est multipliée par 1000, puisque 0,1 ml de sérum est prélevé dans l'expérience. Le facteur de conversion en unités SI (mmol/l) est de 0,0258. La teneur normale en cholestérol total (libre et estérifié) dans le sérum sanguin est de 2,97 à 8,79 mmol / l (115 à 340 mg%).
Construction d'un graphe d'étalonnage. À partir d'une solution standard de cholestérol, où 1 ml contient 1,8 mg de cholestérol, prenez 0,05; 0,1 ; 0,15 ; 0,2 ; 0,25 ml et ajusté à un volume de 2,2 ml avec le réactif de Liebermann-Burchard (respectivement 2,15 ; 2,1 ; 2,05 ; 2,0 ; 1,95 ml). La quantité de cholestérol dans l'échantillon est de 0,09 ; 0,18 ; 0,27 ; 0,36 ; 0,45 mg. Les solutions standard de cholestérol obtenues, ainsi que les tubes à essai expérimentaux, sont vigoureusement secoués et placés dans un thermostat pendant 20 minutes, après quoi ils sont photométrés. Le graphique d'étalonnage est construit en fonction des valeurs d'extinction obtenues à la suite de la photométrie des solutions étalons.
Valeur clinique et diagnostique. En violation du métabolisme des graisses, le cholestérol peut s'accumuler dans le sang. Une augmentation du cholestérol sanguin (hypercholestérolémie) est observée dans l'athérosclérose, le diabète sucré, la jaunisse obstructive, la néphrite, la néphrose (en particulier la néphrose lipoïde) et l'hypothyroïdie. Une diminution du cholestérol sanguin (hypocholestérolémie) est observée avec l'anémie, la famine, la tuberculose, l'hyperthyroïdie, la cachexie cancéreuse, la jaunisse parenchymateuse, les lésions du SNC, les états fébriles, avec l'introduction