Laboratorijas dzīvnieki ir jebkuri mugurkaulnieki, ko izmanto zinātniskiem pētījumiem, izglītībai vai testiem. Tradicionāli tos iedala tradicionālajos, t.i., eksperimentos visbiežāk izmantotajos, un netradicionālajos, kas tiek reti izmantoti biomedicīnas pētījumos. Pie tradicionālajām ir laboratorijas peles, žurkas, truši, jūrascūciņas, kāmji, kaķi, suņi, pērtiķi u.c. Pie netradicionālajām ir smilšu peles, zemes vāveres, zivis, oposumi, bruņneši u.c.
Zoohigiēnas prasības vivārija iekārtošanai. Telpu, kurā laboratorijas lopkopības speciālistu vadībā notiek izmēģinājumu (zinātniskos) vai izglītības, kā arī veselības aprūpes praksē izmantojamo dzīvnieku uzturēšana, pavairošana, sauc par vivāriju (no lat. \ivus - dzīvs).
Laboratorijas dzīvnieku turēšanas un audzēšanas tehnoloģijas izvēli, kā arī telpu plānošanu un projektēšanu dzīvniekiem nosaka dzīvnieku mikrobioloģiskā kategorija (statuss).
Telpām, kas paredzētas dzīvnieku turēšanai, jānodrošina to normāla dzīve. Jebkuras novirzes no normas dzīvnieku apkārtējā vidē nekavējoties ietekmē tā iekšējo stāvokli. Wow neizbēgami noved pie zinātnisko pētījumu rezultātu sagrozīšanas.
Tādējādi prasības telpām dzīvniekiem ir cieši saistītas ar objektīvu (uzticamu) eksperimentu rezultātu iegūšanu un to reproducējamību nākotnē.
Pareizi projektēts, labi uzbūvēts, uzbūvēts un labi uzturēts vivārijs ir būtisks elements pareizai dzīvnieku apsaimniekošanai un izmantošanai, un tas veicina efektīvu, ekonomisku un drošu darbību. Vivārija dizainu un lielumu nosaka ar dzīvniekiem veiktā pētniecības darba apjoms konkrētajā zinātniskajā institūcijā, tajā esošo dzīvnieku veids, vivārija atrašanās vieta attiecībā pret citām ēkām un ģeogrāfiskais apgabals, kurā tas atrodas. .
Nepieciešama prasība pareizas dzīvnieku turēšanas nodrošināšanai un apkalpojošā personāla veselības aizsardzībai ir dzīvnieku turēšanas telpu nodalīšana no dienesta telpām.
Pārdomāta plānošana ļauj novietot vivāriju blakus pētniecības laboratorijai vai tās tuvumā.

1 - telpa dzīvnieku uzņemšanai; 2 - g-nobīde dzīvnieku kontroles saņemšanai; 3 - ēšana dzīvnieku novērošanai; 4 - administratīvās un palīgtelpas: 5 - ģērbtuve; 6 - vannas istaba; 7 - tīrs koridors; 8 - noliktava 9 - "pirmsprocedūras" telpa; 10 - telpa dzīvnieku turēšanai: 11 - rezerves sagatavošanas telpa; 12 - guļamistaba; 13 - mašīntelpa; 14 - telpa atkritumu sadedzināšanai; 15 - netīrs koridors; 1B - telpa sterilizācijai.

viņu, atdalot tās ar barjerām, piemēram, vestibilu, koridoru vai grīdu. Vivārijam jāsastāv no: 1) telpām dzīvnieku uzņemšanai; 2) karantīnas nodaļa;

1. telpas dzīvnieku turēšanai;
2. manipulācijas; 5) operāciju zāle; 6) veterinārās diagnostikas kabinets un citi atbalsta pakalpojumi.

Aptuvenā tipiskas bioloģiskās ēkas (vivārija) diagramma ir parādīta attēlā. 54.
Vivārijs nodrošina atbraukušo un karantīnā un izolatorā esošo dzīvnieku izolāciju, tīro un netīro plūsmu izolāciju, dabisko un mākslīgo apgaismojumu, apkuri, nepārtrauktu ventilāciju, aukstā un karstā ūdens padevi un kanalizāciju.
Izvēloties būvmateriālus, priekšroka jādod maksimāli efektīvai un atvieglotai telpu uzkopšanai. Iekšējo virsmu apdarei nepieciešams izmantot izturīgus, ūdeni atgrūdošus, ugunsdrošus un bezšuvju materiālus. Virsmām jābūt ļoti izturīgām pret mehāniskiem un ķīmiskiem tīrīšanas līdzekļiem, augstspiediena ūdens strūklām un triecieniem. Pārklājot virsmas, ar kurām dzīvnieki var saskarties ar krāsu un flīzēm, jāparedz netoksisku materiālu izmantošana. Būvējot konstrukcijas ārpus telpām, jāizmanto materiāli, kas ir izturīgi pret laikapstākļiem un viegli tīrāmi.
Koridoriem jābūt pietiekami platiem, lai netraucēti varētu pārvietoties personāls un piegādāt aprīkojumu. Lielākajai daļai konstrukciju ieteicami koridori ar platumu 1,8-2,4 m.
Drošības apsvērumu dēļ durvīm jāatveras uz to telpu iekšpusi, kur tiek turēti dzīvnieki; savukārt, ja rodas nepieciešamība atvērt durvis uz gaiteni, jāparedz priekšnama izbūve. Drošības un citu iemeslu dēļ priekšroka jādod durvīm ar skatu logiem. Durvīm jābūt pietiekami lielām (apmēram 105 x 210 cm), lai varētu viegli piekļūt padevējiem un aprīkojumam.
Ja nepieciešams vai vēlams ierobežot piekļuvi noteiktām telpām (piemēram, lietojot bīstamas vielas), durvis jāaprīko ar slēdzenēm. Tajā pašā laikā durvju konstrukcijai jāparedz iespēja tās atvērt no iekšpuses bez atslēgas.
Grīdām jābūt ūdeni atgrūdošām, neuzsūcošām, triecienizturīgām un samērā gludām.
Sienām jābūt gludām, ūdeni atgrūdošām, neabsorbējošām un triecienizturīgām. Tajos nedrīkst būt plaisas, neaizzīmogotas atveres, caur kurām iziet komunikācijas, vai slikti noslēgti savienojumi ar durvīm, griestiem, grīdām un stūriem. Materiāliem, kas pārklāj sienu virsmas, jābūt pietiekami izturīgiem un jāiztur apstrādi ar mazgāšanas un dezinfekcijas līdzekļiem, kā arī ūdeni zem spēcīga spiediena.
Griestiem jābūt gludiem, ūdensizturīgiem un bez bojātiem savienojumiem. Materiāliem, kas pārklāj griestus, ir jāiztur apstrāde ar mazgāšanas un dezinfekcijas līdzekļiem. Griesti, kas pārklāti ar apmetumu vai ugunsdrošu sauso apmetumu, jāapstrādā ar blīvējuma materiālu un jānokrāso ar mazgājamu krāsu. Griesti, ko veido augšējā stāva betona grīda, tiek uzskatīti par pieņemamiem, ja tie ir gludi, blīvi un krāsoti.
Telpām barības vai barības sastāvdaļu apstrādei vai uzglabāšanai jābūt tīrām un aizsargātām no kaitēkļiem. Barību nevajadzētu uzglabāt uz grīdas, bet gan uz paletēm, plauktiem vai ratiņiem.
Barotāju konstrukcijai un izvietojumam jānodrošina viegla piekļuve barībai un jāsamazina piesārņojuma iespēja ar urīnu un fekālijām. Normālos apstākļos dzīvniekiem ir jābūt brīvai piekļuvei tīram dzeramajam ūdenim atbilstoši viņu individuālajām vajadzībām.
Dzīvnieku pakaiši ir kontrolējams vides faktors, kas var ietekmēt gan eksperimentālos datus, gan dzīvnieka stāvokli. Lai saglabātu kvalitāti un samazinātu pakaišu materiālu piesārņojuma iespējamību, tos nevajadzētu transportēt un uzglabāt uz grīdas, bet gan uz paletēm, plauktiem vai ratiņiem. Tīrīšanas un dezinfekcijas biežums un intensitāte ir atkarīga no prasībām attiecībā uz dzīvniekam veselīgu vidi, ņemot vērā tā parasto uzvedību un fizioloģiskās īpašības.
Sprostu, plauktu un palīgiekārtu dezinfekcijas biežumu nosaka izmantoto būru veids un dzīvnieku kopšanas prakse, tostarp regulāra manuāla vai automatizēta pakaiši un regulāra paplāšu skalošana ar ūdeni. Būri un saistītais aprīkojums ir jādezinficē vismaz reizi divās nedēļās. Cietie grīdas būri, ūdens pudeles un dzeršanas caurules parasti ir jātīra vismaz reizi nedēļā.
Dezinfekcija ir diezgan efektīva, mazgājot un skalojot ar ūdeni, kas uzkarsēts līdz 60-80°C vai augstāk.
Tīrīšanai izmantotais inventārs ir jāpiešķir noteiktiem

telpas, un tās nedrīkst pārvietot no vienas telpas uz otru. Pats inventārs regulāri jātīra; turklāt tai jābūt izgatavotai no korozijizturīgiem materiāliem.
Slimību profilakse ir būtisks dzīvnieku veterinārās aprūpes elements. Efektīvas profilaktiskās programmas palielina dzīvnieku zinātnisko vērtību, saglabājot to veselību un samazinot ar slimībām saistītu izmaiņu iespējamību to stāvoklī. Profilakses programmas ietver dažādas noteikumu, procedūru un metožu kombinācijas, kas saistītas ar dzīvnieku karantīnu un veselības stabilizāciju, kā arī dzīvnieku nošķiršanu atkarībā no sugas, ievešanas avota un veselības stāvokļa.
Karantīna paredz tikko ievesto dzīvnieku turēšanu atsevišķi no dzīvniekiem, kas jau atrodas vivārijā, līdz pilnībā tiek noteikts tikko ievesto dzīvnieku veselības stāvoklis un, iespējams, arī mikroflora.
Atsevišķu vienas sugas dzīvnieku turēšanu var izmantot gadījumos, kad dzīvnieki, kas saņemti no dažādiem centriem vai avotiem, ir dažādu patogēnu mikroorganismu nesēji (Sidorčuks A.A., Gluškovs A.A., 2002).
Pēc karantīnas (peles, žurkas - 10 dienas, suņi - 30 dienas, pārējie dzīvnieki - 21 diena) dzīvniekus apzīmē (peles un žurkas - krāsojot, truši - uzliekot ausī birku ar numuru, putnus - aplīmējot ), pārbaudi, nosver, mēra temperatūru, elpošanas ātrumu, pulsu. Ja nav noviržu no normas, dzīvnieks tiek ņemts eksperimentā un pārvietots uz īpašu telpu. Eksperimentu pametušie dzīvnieki tiek pakļauti nesāpīgai nogalināšanai (eitanāzijai). Mazie dzīvnieki tiek nogalināti, nogriežot vai ieelpojot hloroformu (ēteri), trušus - ar gaisa emboliju, lielos dzīvniekus - ar elektrisko strāvu.
Vivārija aprīkojums un mikroklimats. Gaisa kondicionēšana ir efektīvs līdzeklis gaisa temperatūras un mitruma regulēšanai. Apkures, ventilācijas un gaisa kondicionēšanas sistēmu projektēšanai jānodrošina to uzticamība, lietošanas ērtums un enerģijas taupīšana.
Relatīvais mitrums parasti tiek uzturēts starp 30-70% visu gadu. Daļējas HVAC sistēmas atteices gadījumā ir jānodrošina avārijas sistēma, lai nodrošinātu temperatūras un mitruma līmeņa uzturēšanu pieņemamā diapazonā.
Dažos gadījumos ir ieteicams izmantot filtrus, lai attīrītu gaisu, kas nonāk telpās dzīvnieku turēšanai, eksperimentālu procedūru un ķirurģisku procedūru veikšanai.
Elektrības sistēmai jābūt drošai un jānodrošina pietiekams apgaismojums, pietiekams skaits izvadu, kā arī jānodrošina pietiekama strāva speciālajām iekārtām. Strāvas padeves pārtraukuma gadījumā ir jānodrošina alternatīvs vai avārijas enerģijas avots, lai nodrošinātu kritisko sistēmu vai palīgsistēmu (piemēram, saldētavu, ventilējamu plauktu un izolācijas telpu) darbību dzīvnieku novietnēs, operāciju telpās un citās kritiskās zonās.
Atkritumu uzglabāšanas vietas ir jānodala no citām uzglabāšanas vietām. Lai uzglabātu dzīvnieku līķus un to audus, ir nepieciešama aukstuma telpa
Ar ledusskapja kameru, atdalīta no citām aukstumtelpām; Šādā telpā temperatūra nedrīkst pārsniegt 7 ° C, lai izslēgtu atkritumu un dzīvnieku līķu sadalīšanās iespēju.
Darbinot vivāriju, liela nozīme ir trokšņu kontrolei. No trokšņa aizsardzības viedokļa ķieģeļu sienas šķiet efektīvākas nekā metāla vai ģipša sienas, jo to blīvuma dēļ tām ir mazāka skaņas caurlaidība. Dažās situācijās trokšņa līmeņa samazināšanai var izmantot izmantojamus skaņas izolācijas materiālus, kas piestiprināti pie sienām vai griestiem. Zināma uzmanība jāpievērš darbības iekārtu radītā trokšņa līmeņa samazināšanai, īpaši ultraskaņas diapazonā.
Vivārijā nepieciešams nodrošināt īpašu vienotu zonu būru un palīgiekārtu dezinfekcijai. Parasti būru mazgāšanai ieteicams izmantot mehāniskās paplāksnes, kuras jāizvēlas atbilstoši būru tipam un citam aprīkojumam.
Primārais iežogojums (parasti būris, aizgalds vai novietne) norobežo dzīvnieka tiešo dzīvotni. Pieņemamie primārie žogi:

• atbilst dzīvnieka parastajām fizioloģiskajām un uzvedības vajadzībām, tostarp urinēšana un defekācija, ķermeņa temperatūras uzturēšana, normālas kustības un poza, un, ja norādīts, vairošanās;
• nodrošināt sociālās attiecības un hierarhisku attiecību nodibināšanu žogu iekšpusē vai starp tiem;
• nodrošināt dzīvniekiem iespēju palikt tīriem un sausiem (atbilstoši sugas vajadzībām);
• ooespechivay odsloshpuyu ventilācija; nodrošināt dzīvniekiem piekļuvi pārtikai un ūdenim, kā arī atvieglot trauku, kas satur pārtiku un ūdeni, iepildīšanu, nomaiņu, apkopi un tīrīšanu;
• nodrošina dzīvnieka drošību, t.i., izslēdz tā aizlidošanas iespēju, nejaušu (veselu vai ekstremitāšu) iekļūšanu plaisās vai iesprūšanu starp pretējām virsmām;
• nedrīkst būt asām malām vai izvirzījumiem, kas var savainot dzīvnieku;
• ļauj novērot dzīvniekus, tos gandrīz netraucējot.

Primārajiem iežogojumiem jābūt izgatavotiem no materiāliem, kas vienlīdz atbilst gan dzīvnieku vajadzībām, gan higiēnas un sanitārijas prasībām. Tiem jābūt ar gludām, necaurlaidīgām virsmām ar minimālu izvirzījumu, izliekumu, stūru un saskares virsmu skaitu, lai samazinātu netīrumu, gružu un mitruma uzkrāšanos un ļautu tās tīrīt un dezinficēt. Tiem jābūt izgatavotiem no izturīgiem materiāliem, kas nerūsīs un iztur rupju apstrādi, neplaisājot, nelūstot vai nerūsējot. Mazāk izturīgs materiāls, piemēram, koks, dažās situācijās var būt piemērotāks, un to var izmantot laktu, kāpšanas konstrukciju, atpūtas un žogu celtniecībā. Primārie žogi ir periodiski jānomaina iznīcināšanas dēļ vai tad, ja to dezinfekcija ir sarežģīta.
Visiem primārajiem žogiem jābūt labā stāvoklī, lai novērstu dzīvnieku izkļūšanu vai savainojumus, veicinātu viņu fizisko komfortu un atvieglotu to stāvokli
sanitārija un apkope. Sarūsējušas vai oksidētas iekārtas, kas apdraud dzīvnieku veselību vai drošību, ir jāremontē vai jānomaina pret jaunu.
Dažām dzīvnieku novietņu sistēmām ir īpaši būri un ventilācijas iekārtas, tostarp būri ar iebūvētiem filtriem, ventilējami būri, izolatori un mazas kastes. Kopumā šādu sistēmu mērķis ir līdz minimumam samazināt infekcijas izraisītāju izplatīšanos pa gaisu starp šūnām vai šūnu grupām.
Grauzēji bieži tiek novietoti uz stiepļu režģa grīdas, kas atvieglo sanitāriju, ļaujot urīnu un fekālijas savākt apakšā esošās paplātēs. Tomēr saskaņā ar dažiem ziņojumiem grauzējiem priekšroka dodama būriem ar cietu dibenu un pakaišiem. Citas dzīvnieku sugas, piemēram, suņi un primāti, bieži izmanto vinila grīdas segumu.

Vides temperatūra un relatīvais mitrums var būt atkarīgs no telpu dizaina un dzīvnieku izmitināšanas apstākļiem. Faktori, kas var veicināt temperatūras un mitruma svārstības, ir žogu konstrukcija un materiāli, filtra ar pagarinājumu izmantošana, dzīvnieku skaits būrī, žoga ventilācija, pakaišu maiņas biežums un tā sastāvs.
Dažās situācijās, piemēram, pēcoperācijas atveseļošanās, cāļu turēšana pirmajās dienās pēc izšķilšanās, dažu bezspalvu grauzēju un jaundzimušo atdalīšana no mātes, var būt nepieciešama augstāka temperatūra. Temperatūras paaugstināšanās diapazons ir atkarīgs no aizturēšanas apstākļiem (Berghof P.K., 1998).
Turot dzīvniekus slēgtā telpā, diennakts temperatūras svārstību diapazons jāsamazina līdz minimumam, lai izvairītos no atkārtotas ietekmes uz dzīvnieku metabolismu un uzvedību, kas mainās, lai kompensētu apkārtējās temperatūras izmaiņas. Ir jākontrolē arī relatīvais mitruma līmenis, bet plašākā diapazonā nekā temperatūra (pieņemams diapazons

Troksnis, kura avots ir dzīvnieki un to pavadoņi, ir neaizstājama funkcionējoša vivārija īpašība. Tāpēc, projektējot un ekspluatējot vivāriju, ir jāņem vērā iespēja kontrolēt trokšņa līmeni.
Trokšņaini dzīvnieki, piemēram, suņi, cūkas, kazas un primāti, jātur tālāk no klusiem dzīvniekiem, piemēram, grauzējiem, trušiem un kaķiem. Pakļaušana trokšņa līmenim, kas pārsniedz 85 dB, var ietekmēt gan dzirdes aparātu, gan citus orgānus. Daudzām dzīvnieku sugām ir iespēja dzirdēt skaņas frekvencēs, kas cilvēkiem nav pieejamas, tāpēc īpaša uzmanība jāpievērš iespējamai aprīkojuma iedarbībai, piemēram, video aparatūrai un materiāliem, kas rada troksni tuvumā esošo dzīvnieku ausu diapazonā. Vivārijā nedrīkst izmantot radioaparātus, modinātājpulksteņus un citas ierīces, kas rada troksni, ja vien tās nav daļa no apstiprināta eksperimentāla aparāta vai aprīkojuma, kas paredzēts dzīvnieku dzīvotnes bagātināšanai.
Atkarībā no dzīvnieka veida un to izmantošanas virziena biotopa struktūrā jāiekļauj atpūtas stieņi, plaukti vai laktas, rotaļlietas, barotavas un dzirdinātavas, materiāls ligzdu un urbumu veidošanai, tuneļi, šūpoles un citi priekšmeti, kas nodrošina dzīvniekiem lieliskas iespējas sugai raksturīgās uzvedības izpausmēm, ieņemt parastās pozas un veicināt viņu labklājību.
Dzīvnieku izmitināšana un pārvadāšana. Izmitinot dzīvniekus, jārada vislabvēlīgākie apstākļi sugai raksturīgai uzvedībai un jāsamazina stress. Sabiedriskām dzīvnieku sugām šāda prasība parasti ietver to ievietošanu saderīgos pāros vai grupās. Dzīvnieku aprūpes personālam būtu jāizstrādā stratēģija dzīvnieku vispiemērotākajai izvietošanai, nodrošinot to veselību un labklājību, un kas atbilst eksperimenta mērķiem.
Peles, jūrascūciņas, trušus, žurkas, kāmjus, vistas ievieto būros, kas izvietoti uz plauktiem, stingri ievērojot stādīšanas blīvumu, suņus un pērtiķus - atsevišķās kajītēs, kaķus - iežogojumos. Šūnu dibenu pārklāj ar plānu zāģu skaidu vai skaidu kārtu, kas iepriekš sterilizēta 150-180°C 15-20 minūtes. Šūnu dzeramajos traukos jābūt dzeramajam ūdenim, kas atbilst SanPiN prasībām. Ir nepieciešams ievērot barošanas normas un režīmu. Trauki ūdenim un barībai regulāri jādezinficē, jāmazgā un jāizskalo.
Dzīvnieku telpas vajadzības nosaka dažādi faktori; šajā gadījumā nepietiek, ņemot vērā tikai dzīvnieka ķermeņa masu vai virsmas laukumu.
Dažām dzīvnieku sugām labvēlīgāka ir šķērssienu klātbūtne (piemēram, grauzējiem, kuriem raksturīgs thigmotaksis), patversmes vai sarežģīta šūnu struktūra (piemēram, kaķi un šimpanzes), nevis vienkārša platības palielināšana (Rakhmanovs). A.I., 2002).
Dzīvnieku statusa rādītāji, piemēram, veselība, reprodukcija, augšana, uzvedība, aktivitāte un telpas izmantošana, var kalpot par to izvietojuma piemērotības novērtējumu. Dzīvniekam jābūt vismaz pietiekami daudz vietas, lai viņš varētu pagriezties un ieņemt parastās pozas, viegli piekļūt padevējiem un dzirdinātājiem, kā arī plašai un brīvai vietai (aizklāta ar tīru pakaišu).

tā var ērti sēdēt un atpūsties. Kaķu būrī atpūtai ir nepieciešams uzstādīt virs grīdas paceltu platformu. Šādas platformas vai dzegas bieži ir vēlamas suņiem un primātiem. Telpu, ko aizņem barotavas, dzirdinātavas, tualetes vai citas ierīces, kas nav paredzētas kustībai vai atpūtai, nevajadzētu iekļaut grīdas laukumā.
Žogu augstumam var būt liela nozīme dažu dzīvnieku sugu normālai uzvedībai un adaptācijai. Aprēķinot būru augstumu, ņem vērā dzīvnieka tipiskās pozas un pietiekami daudz vietas būtiskiem būra elementiem, piemēram, barotavām, dzirdinātājiem, ūdens vannām. Dažu sugu primāti izmanto būra vertikālās telpas vairāk nekā tā dzimums. Viņu labsajūtai ir svarīgi, lai viņi varētu uzkāpt augstu uz zara un izmantot pietiekami daudz vertikālas vietas, lai visu ķermeni novietotu virs būra grīdas.
Aprēķinot ražošanas platības, ir jāvadās pēc šādiem standartiem dzīvnieku ievietošanai būros (55. tabula).
Tabulā. 56 parādīti ieteicamie būru izmēri citiem dzīvniekiem, ko parasti izmanto laboratorijas eksperimentos. Šie dati ir balstīti uz atsevišķu dzīvnieku vajadzībām. Ja nepieciešams bagātināt biotopu vai turēt dzīvniekus, kuru masa pārsniedz tabulā norādīto, būru izmērus var pārskatīt. Turot dzīvniekus grupās, kopējās telpas platība ne vienmēr ir dzīvnieku individuālai turēšanai ieteicamo vērtību summa. Dzīvnieku grupu turēšanā aprēķini jābalsta uz šīs sugas dzīvnieku vajadzībām un uzvedības īpatnībām, īpatņu saderību, dzīvnieku skaitu, kā arī uzdevumiem, kas tiek izvirzīti to izvietošanas laikā.
Lielākos pērtiķus, kas sver vairāk par 50 kg, vislabāk turēt telpās no ķieģeļu, betona un stiepļu žogiem, nevis parastos būros.
Visi dzīvnieki ir jāiegādājas legāli. Ja suņi un kaķi nāk no tirgotājiem vai slazdošanas stacijām, šie dzīvnieki ir jāpārbauda, ​​lai tos varētu identificēt. Šāda pārbaude var atklāt faktu, ka attiecīgais dzīvnieks ir bijis mājdzīvnieks; šajā gadījumā būtu jānosaka tā īpašnieks.
Speciāli audzētu izmēģinājumu dzīvnieku izmantošana ir iespējama, ja to nosaka pētniecības, izglītības vai testēšanas mērķi.
Jebkura dzīvnieku pārvietošana, tostarp vivārijā, ir pareizi jākoordinē, lai samazinātu ceļošanas laiku.

Dzīvnieku sugas	№1asse, Kilograms	Grīdas platība uz vienu dzīvnieku, m1	Būra augstums no grīdas līdz griestiem, cm
truši	DoZ	0,1	35,6
	LĪDZ 4	0,3	35,6
	līdz 5	0,4	35,6
	virs 5	0,5	35,6
kaķi	līdz 4	0,3	61,0
	virs 5	0,4	61,0
Suņi	līdz 15	0,7	-
	līdz 30	1,1	-
	virs 30	2,2	-
Pērtiķi (tostarp paviāni)
1 indivīds	līdz 1	0,1	50,8
2 personas	devu	0,3	76,2
3 personas	d O par	0,4	76,2
4 personas	līdz 15	0,5	81,3
5 personas	līdz 25	0,7	91,4
6 personas	līdz 30	0,9	116,8
7 personas	virs 30	1,4	116,8
lielie pērtiķi
1 indivīds	līdz 20	0,9	139,7
2 personas	līdz 35	1,4	152,4
3 personas	virs 35	2,3	213,4
baloži	-	0,1	-
paipalas	-	0,02	-
vistas	d aptuveni 0,25	0,02	-
	līdz 0,5	0,05	-
	līdz 1,5	0,1	-
	līdz 3.0	0,2	-
	vairāk 3,0	0,3	-

un zoonožu pārnešanas risku, aizsargāt dzīvniekus no ekstrēmu vides apstākļu iedarbības, izvairīties no dzīvnieku pārapdzīvotības, nodrošināt piekļuvi pārtikai un ūdenim, ja nepieciešams, un pasargāt tos no fiziskiem ievainojumiem. Ar transportu saistīts stress ir neizbēgams, taču to var samazināt, pienācīgi ņemot vērā iepriekš uzskaitītos faktorus. Katrai dzīvnieku partijai ir jāpārbauda atbilstība saņēmēja prasībām un slimības klīnisko pazīmju klātbūtne, kā arī dzīvnieki jāievieto karantīnā un jāstabilizē, izmantojot sugai un apstākļiem atbilstošas ​​procedūras.
KONTROLES JAUTĀJUMI UN UZDEVUMI

1. Kādus suņu turēšanas un kopšanas veidus jūs zināt?
2. Kādas ir kaķu turēšanas un kopšanas iezīmes?
3. Kādas ir higiēnas prasības suņu un kaķu pārvadāšanai?
4. Kāda ir jaunu suņu un kaķu audzēšanas higiēna?
5. Kādas ir higiēnas prasības suņu un kaķu barošanai un dzirdināšanai?
6. Kādas ir prasības, izvēloties vietu vivārijam un tās iekārtojumu?
7. Kādas ir zoohigiēnas prasības vivārijiem?
8. Kā tiek nodrošināts optimālais mikroklimats vivārijā?
9. Kādas ir sanitārās un higiēnas prasības laboratorijas dzīvnieku turēšanai?

Kā tiek izmitināti un transportēti laboratorijas dzīvnieki?

4. tēma. Laboratorijas dzīvnieku izmantošana diagnostikas pētījumos. Laboratorijas dzīvnieku izmantošanas mērķi virusoloģijā

Uzdevums nākamajai nodarbībai

Apkopojot stundu

Uzdevumi

1. Gaismas mikroskopā atrodiet preparātos un uzzīmējiet:

a) citoplazmas ieslēguma ķermeņi;

b) intrakodolu iekļaušanas ķermeņi;

c) baku vīrusa virioni, kas iekrāsoti pēc Morozova.

2. Iepazīstieties ar elektronu mikroskopa ierīci un darbības principu.

3. Atšifrēt dažādu vīrusu virionu elektronmikrogrāfus (norādīt to shematisku zīmējumu).

Studentu patstāvīgais darbs

Studenti iepazīstas ar gaismas, luminiscences un elektronu mikroskopa ierīci (laboratorijā), uzzīmē elektronu mikroskopa uzbūves shēmu. Iepazīties ar preparātu sagatavošanu elektronu mikroskopijai. Apskatiet gatavo produktu fluorescējošā mikroskopā. Uzzīmējiet tiešās un netiešās RIF metodes diagrammu.

Testa jautājumi:

1. Elektronu mikroskopa ierīce.

2. Metodes preparātu sagatavošanai skatīšanai elektronu mikroskopā.

3. Fluorescentās mikroskopijas (RIF) tiešās un netiešās metodes.

4. Elektronu un luminiscences mikroskopijas nozīme virusoloģiskajos pētījumos.

Nodarbības mērķis: iepazīstināt studentus ar prasībām laboratorijas dzīvnieku veidiem, to karantīnu, uzturēšanu, barošanu, marķēšanu.

Aprīkojums un materiāli: instrumentu komplekts sterilizatorā (šķēres, adatas, šļirces, pincetes, knaibles), laboratorijas dzīvnieki, vates tamponi krāsvielu marķēšanai, ēteris, ksilols, multimediju aprīkojums, plakāti un prezentācijas MS Office PowerPoint par nodarbības tēmu.

Skolotāja skaidrojums: Lielāko daļu dažādu taksonomisko grupu vīrusu var atšķirt vienu no otra, pamatojoties uz patogenitāti dažādu sugu vai vecuma laboratorijas dzīvniekiem.

4.1. Laboratorijas dzīvnieku veidi. Virusoloģiskajās laboratorijās visplašāk tiek izmantotas peles, baltās žurkas, truši, jūrascūciņas, kāmji un vistas. Jaunām pelēm eksperimentāli pavairo gripas, alfa un flavivīrusu infekcijas, mutes un nagu sērgas (jaundzimušajām pelēm) u.c.. Tās ir uzņēmīgas pret daudziem vīrusiem, tās ir viegli pavairojamas un ar tām ērti strādāt. Labāk ir izmantot inbred līniju peles, jo tās gandrīz vienādi reaģē uz konkrētu vīrusu. Žurkas veido arī inbred līnijas, taču šie dzīvnieki ir izturīgāki pret noteiktām vīrusu infekcijām nekā peles. Dažu vīrusu onkogenitāte ir plaši pētīta zelta kāmjiem. Viroloģiskiem eksperimentiem parasti izmanto gludspalvas jūrascūciņas, kas sver 250-300 g.

Dažreiz infekciju pēta vairāku sugu dzīvniekiem ar atšķirīgu jutību pret konkrēto vīrusu, kas ļauj atšķirt vīrusus, kas izraisa klīniski līdzīgus slimības simptomus (piemēram, mutes un nagu sērgu, vezikulāro stomatītu, vezikulāro eksantēmu un vezikulāro slimību). cūkām).

Pēc ģenētiskajām īpašībām laboratorijas dzīvniekus iedala četrās grupās:

1) jauktas izcelsmes dzīvnieki, kas iegūti no dažādiem audzētājiem, tādi dzīvnieki ir neviendabīgi;

2) dzīvnieki, kas iegūti tieši no viena avota, bet tie ir ģenētiski mainīgi;

3) dzīvnieku inbred līnijas. Tos iegūst, pārojot brāli ar māsu vai vecākiem ar bērniem vismaz 20 paaudzēs. Ar šo audzēšanas metodi tiek panākta arvien lielāka homozigotiskuma pakāpe.

4) viendabīgi hibrīdi F 1 . Katram hibrīdam raksturīgā augstā heterozigotiskuma pakāpe šeit ir saistīta ar ģenētisko viendabīgumu, kas atbilst vecāku līniju homozigotitātes pakāpei. Parasti vienveidīgi F 1 hibrīdi ir mazāk mainīgi nekā abas vecāku līnijas. Dzīvniekiem-mutantiem ir atsevišķi izteikts iedzimtības faktors, kas izraisa redzamu novirzi no normālās formas.

Vīrusa izolācijas negatīvā puse laboratorijas dzīvniekiem ir diagnostikas kļūdu iespējamība latentā vīrusa nesēja aktivizēšanās dēļ. Šajā gadījumā slimības simptomu attīstība pēc materiāla ievadīšanas nav ievestā vīrusa darbības sekas, bet gan pašas procedūras rezultāts, kas pārkāpj iepriekšējo līdzsvaru organismā. Šajā laikā parādās vīruss vai cits infekcijas izraisītājs, kas organismā saglabājas ilgu laiku. To izsaka asi neiroloģiski simptomi (pagriezieni gar ķermeņa garo asi).

Latentas vīrusu infekcijas klātbūtni var izteikt arī ar dzīvnieku jutības samazināšanos vai izzušanu pret pētāmo vīrusu interferences fenomena dēļ. Iespējams arī pretējs efekts, proti, sinerģisma parādība vīrusu darbībā, kas dažkārt dod grūti pareizi interpretējamus rezultātus.

Dažiem virusoloģiskiem darbiem, piemēram, izolējot vīrusu ar nezināmām patogēnām īpašībām, nepieciešams izmantot gnotobiotus. Termins "gnotobioti" apvieno divas dzīvnieku kategorijas: mikrobu (sterilu), kas nesatur dzīvotspējīgus mikrobus, un gnotoforus - viena (monognotofori), divu (dignotoforu) vai vairāku (polignotoforu) mikroorganismu nesējus. Šobrīd no mikrobiem brīvie dzīvnieki pēc augšanas dinamikas tiek iedalīti trīs grupās: I - pērtiķi, sivēni, cāļi aug labāk nekā parastie dzīvnieki vai līdzvērtīgi tiem; II - žurkas, peles, suņi, kaķi aug līdzvērtīgi parastajiem dzīvniekiem; III - jūrascūciņas, truši, kazlēni, jēri aug sliktāk nekā parastie dzīvnieki.

Sterilos putnus iegūst, inkubējot olas ar sterilu čaumalu sterilā inkubatorā, laboratorijas dzīvniekus - ar ķeizargriezienu vai histerektomiju. Uzglabāt dzīvniekus sterilās izolācijas telpās. Gaisam, ūdenim un barībai jābūt sterilam.

Īpaši svarīgi gnotobiotu vidū ir SPF dzīvnieki (specifiski patogēni brīvi), kas ir brīvi tikai no patogēniem mikroorganismiem. Viņu organismā atrodas visas normālai dzīvei nepieciešamās baktērijas un vīrusi, kas kopā veido tā sauktās rezidentu (lietderīgās) mikrofloras grupu. Šobrīd ir iegūti laboratorijas SPF dzīvnieki - žurkas, jūrascūciņas, truši, sivēni, putni u.c.

4.2. Laboratorijas dzīvnieku izmantošanas mērķi. Pašlaik laboratorijas dzīvniekus virusoloģijā izmanto:

- vīrusa noteikšana patoloģiskajā materiālā;

- vīrusa primārā izolācija no patoloģiskā materiāla;

- vīrusu masas uzkrāšanās;

– vīrusa uzturēšana laboratorijā aktīvā stāvoklī;

– vīrusu titrēšana;

- hiperimūno serumu iegūšana;

– kā testa objekts neitralizācijas reakcijā.

Virusoloģijā izmanto trušus, jūrascūciņas, baltās žurkas, baltās peles, zelta kāmjus. Tomēr šo sugu dzīvniekiem var kultivēt tikai dažus vīrusus. Daudzos gadījumos tādiem pašiem mērķiem tiek izmantoti citi pret šo vīrusu jutīgi dzīvnieki: vistas, baloži, kaķēni, kucēni utt. Tādējādi putnu baku diagnostikā tiek veikta biotests vistām, aitu bakas aitām, cūku mēris jauncūkas.

4.3. Prasības laboratorijas dzīvniekiem. Komplektējot dzīvnieku grupas virusoloģiskajiem pētījumiem, jāievēro šādas prasības:

- dzīvniekam jābūt uzņēmīgam pret šo vīrusu;

– tā vecumam ir liela nozīme daudzu vīrusu audzēšanā. Lielākā daļa vīrusu labāk vairojas jaunu un pat jaundzimušo dzīvnieku organismā. Piemēram, zīdītājas peles izmanto trakumsērgas un mutes un nagu sērgas biopārbaudēm, bet vistas izmanto putnu laringotraheīta gadījumā. Bet tajā pašā laikā pieaugušu trušu inficēšanās ar Aujeski slimības vīrusu izraisa pārsteidzošu un specifisku slimības klīnisko pazīmju parādīšanos;

- standarta jutība tiek panākta, atlasot noteikta vecuma un pēc svara identiskus dzīvniekus;

– laboratorijas dzīvniekiem jābūt veseliem. Dzīvniekiem, kas nonāk virusoloģiskās laboratorijas vivārijā, jābūt no infekcijas slimībām brīvas fermas. Tie tiek turēti izolācijā, t.i., karantīnā (baltās peles un žurkas 14 dienas, bet citi dzīvnieki 21 dienu). Šajā periodā dzīvnieki tiek uzraudzīti katru dienu. Ja ir aizdomas par infekcijas slimību, dzīvniekiem veic laboratorisko izmeklēšanu. Ja dzīvnieku vidū tiek konstatēta infekcijas slimība, visa ienākošā partija tiek iznīcināta.

4.4. Laboratorijas dzīvnieku uzturēšana. Vivārijā laboratorijas dzīvniekiem jābūt galvenajai dzīvnieku telpai, mazgāšanas telpai (ar kasti, žāvēšanas un sterilizācijas iekārtām), ēdiena gatavošanas virtuvei ar vismaz vienu galdu, kas aprīkots ēdiena pagatavošanai un ledusskapi ātrbojīgajiem produktiem, pieliekamajam, operāciju zāle, garderobe un sanitārās telpas personālam. Telpām jābūt tīrām. Sienas un grīdas ir viegli dezinficējamas. Pārtikas krājumi jāuzglabā īpašās telpās. Vietās, kur tiek turēti izmēģinājumu dzīvnieki, vēlams, lai tiem būtu higrometrs un termometrs.

Peles, žurkas, kāmjus un jūrascūciņas eksperimenta laikā ieteicams turēt stikla burkās ar vāku no stiepļu sieta vai perforētas lokšņu dzelzs. Tādējādi ir vieglāk tos uzraudzīt, un burkas ir viegli tīrāmas un dezinficējamas. Jūs varat turēt dzīvniekus metāla būros, kurus ir arī viegli dezinficēt.

Kā pakaiši tiek izmantoti materiāli, kas adsorbē mitrumu un kurus dzīvnieki var izmantot ligzdas veidošanai: skaidas pelēm, žurkām, kāmjiem, jūrascūciņām, seskiem, vistām; zāģu skaidas lielajām pelēm, žurkām, kāmjiem, seskiem, vistām; salmi kāmjiem, jūrascūciņām, trušiem, suņiem, vistām; pelavas pelēm, žurkām; siens pelēm, žurkām, kāmjiem, seskiem, vistām; vistas smiltis. Jāizmanto tādi gultas piederumi, kas rada pēc iespējas mazāk putekļu, jo tie var izraisīt elpceļu slimības. Jebkurš gultas veļa ir iepriekš jāsterilizē 100°C 30 minūtes.

Telpas laboratorijas dzīvniekiem tiek periodiski dezinficētas, īpaši pirms jaunas dzīvnieku partijas ievietošanas. Tas attiecas arī uz dzīvnieku kopšanas priekšmetiem (lāpstām, skrāpjiem, kastēm utt.), kas nonāk saskarē ar kūtsmēsliem un dažādiem atkritumiem no telpām. Pēc katra eksperimenta beigām šūnas jāapstrādā ar dezinfekcijas šķīdumiem, pirms tam jāveic gan šūnu, gan telpu tīrīšana.

Ēdienu un ūdens traukus katru dienu samitrina ar dezinfekcijas šķīdumu, pēc tam tos mazgā un noskalo ar tīru ūdeni. Telpas tiek apstrādātas ar 1% nātrija hidroksīda šķīdumu, ko izmanto dienas laikā. Dezkovriki piesūcināti ar svaigu šķīdumu ik pēc 2 dienām. Kopšanas līdzekļu dezinfekcijai, grīdu un trauku mazgāšanai ieteicams izmantot 3% hloramīna šķīdumu, kas jāuzklāj 2 stundu laikā.Vivārijā nepieciešams iznīcināt kaitēkļus: mušas, odus, blusas, skaustu, ērces, utis, skudras, peles, žurkas.

Laboratorijas dzīvnieki novietoti tā, lai, no vienas puses, tiktu nodrošināta visu organisma sistēmu darbība fizioloģiskās normas robežās, no otras puses, izslēgta savstarpēja atkārtota inficēšanās un infekcijas izplatīšanās ārpus vivārija. Dzīvnieki tiek turēti vivārijā, ņemot vērā to fizioloģiskās vajadzības pēc gaismas un temperatūras. Tātad pelēm, žurkām ir nepieciešama krēsla un aptuveni 20 ° C gaisa temperatūra, jūrascūciņām, trušiem un cāļiem ir nepieciešama dienas gaisma un temperatūra attiecīgi 16–23, 14–18 un ne zemāka par 0 ° C. Ganāmpulka blīvumam jābūt aptuveni 1 g no laboratorijas dzīvnieku masas uz 1 cm 2 būra dibena. Dzīvnieki tiek nodrošināti ar regulāru un pilnvērtīgu barošanu un pastāvīgu dzeramo ūdeni.

Ja ir tikai viens vivārijs, inficētie dzīvnieki tiek turēti izolēti no veselajiem, un tīrīšana un barošana sākas no pēdējiem. Inficēto dzīvnieku aprūpei tiek izmantots atsevišķs aprīkojums un barotavas. Labāk ir izveidot divus vivārijus: veselīgu un inficētu dzīvnieku turēšanai.

Strādājot vivārijā, pavadoņi izmanto kombinezonu: halātu, gumijas cimdus, priekšautu, ūdensizturīgus apavus. Vivārijā inventārs tiek dezinficēts katru dienu un tiek veikta mitrā tīrīšana, izmantojot dezinfekcijas līdzekļus. Eksperimenta beigās šūnas tiek dezinficētas, mirušos dzīvniekus neitralizē, sadedzinot krāsnīs vai apstrādājot autoklāvā.

Eksperimenta grupā tiek atlasīti dzīvnieki ar vienādu svaru, temperatūru, asins sastāvu utt.. No tā lielā mērā ir atkarīgi vīrusa izolēšanas, titrēšanas un pārejas panākumi. Tas ņem vērā dzīvnieku uzņēmību pret dažādiem vīrusiem. Atlasītie dzīvnieki tiek marķēti, izdalīti burkās vai būros, tiek atzīmēts eksperimenta datums, tā numurs, zāļu inficējošā vai profilaktiskā deva un, ja nepieciešams, dzīvnieku marķēšanas veids. Pēdējais ir svarīgs, ja vairāku grupu dzīvnieki atrodas vienā burkā vai būrī.

1. tabula

Dzīvnieku svars dažādos vecumos

RD-APK 3.10.07.02-09

LAUKSAIMNIECĪBAS MINISTRIJA
KRIEVIJAS FEDERĀCIJA

Maskava 2009

Izstrādāts: Ph.D. s.-x. Zinātnes, Art. zinātnisks līdzstrādnieks P.N. Vinogradovs, Ph.D. tech. Zinātnes S.S. Ševčenko, O.L. Sedovs, E.S. Garafutdinova, M.F. Malygins (SPC "Giproniselhoz"); Dr vet. zinātnes, prof. V.G. Tyurin (GNU VNIIVSGE)

IEPAZANS: SPC "Giproniselhoz".

APSTIPRINĀTS UN SĀKTS SPĒKĀ: Krievijas Federācijas lauksaimniecības ministra vietnieks A.I. Beļajevs 2009. gada 1. decembris

IZSTRĀDĀTA PIRMO REIZI.

Ievadīšanas datums 15.12.2009

1. Vispārīgie noteikumi

1.1. Šīs vadlīnijas attiecas uz visām Krievijas agroindustriālā kompleksa pētniecības organizācijām un izglītības iestādēm neatkarīgi no to organizatoriskās un juridiskās formas, kas savā darbā izmanto laboratorijas (eksperimentālos, eksperimentālos) dzīvniekus.

Saskaņā ar federālo likumu "Par tehniskajiem noteikumiem" (pieņemts Valsts domē 2002. gada 15. decembrī un apstiprināts Federācijas padomē 2002. gada 18. decembrī), līdz attiecīgo noteikumu pieņemšanai tehniskais regulējums pieņemšanas jomā. veterinārie un sanitārie pasākumi tiek veikti saskaņā ar Krievijas Federācijas likumu " Par veterinārmedicīnu (apstiprināts 1993. gada 14. maijā, Nr. 4979-1).

1.2. Vadlīnijas attiecas gan uz jaunprojektētajām laboratorijas dzīvnieku turēšanas un darba telpām - eksperimentālajām bioloģiskajām klīnikām, vivārijiem u.c., gan uz esošajām un rekonstruētajām.

1.3. Objekti laboratorijas dzīvnieku turēšanai un darbam ar tiem ir pētniecības organizāciju, izglītības iestāžu zinātniskā atbalsta vienības un ir izveidotas eksperimentālajos darbos un pētniecībā izmantojamo laboratorijas dzīvnieku turēšanai un, ja nepieciešams, vaislai. Šajos objektos var veikt arī atsevišķu zinātnisku jautājumu patstāvīgu izstrādi.

1.4. Šajās vadlīnijās noteiktie standarti un prasības laboratorijas dzīvnieku turēšanas telpu projektēšanai, celtniecībai un ekspluatācijai ir vērstas uz to, lai nodrošinātu ar dzīvniekiem strādājošā personāla un visas populācijas drošību no antropozanožu un citu slimību rašanās.

1.5. Laboratorijas dzīvnieku turēšanas telpu būvniecības projekta dokumentācijas izstrāde, saskaņošana, apstiprināšana un sastādīšana tiek veikta saskaņā ar SNiP 11.01-2003 prasībām.

1.6. Laboratorijas dzīvnieku turēšanas objekts (turpmāk – vivārijs) atrodas atsevišķā ēkā (ēku kompleksā) vai veterināro valsts zinātnisko institūciju laboratoriju korpusu augšējos stāvos, kā arī izglītības iestāžu teritorijā.

1.7. Vivārijos jānodrošina ar kvalitatīvu dzeramo ūdeni, tai skaitā karsto ūdeni, elektrību, aprīkotiem ar kanalizāciju (caurules ar diametru vismaz 100 mm), pieplūdes un nosūces ventilāciju, apkuri, apsardzes un ugunsdzēsības signalizāciju, kā arī ar ērtiem piebraucamiem ceļiem.

1.8. Attālumam starp atsevišķu vivārija ēku un pētniecības institūciju telpām, kas ietver šo vivāriju, jābūt vismaz tādam attālumam no ugunsgrēka pārtraukumiem, kāds noteikts spēkā esošajos Krievijas Federācijas ugunsdrošības noteikumos.

1.9. Atsevišķas vivāriju ēkas jānožogo ar tukšu žogu un jānodala no dzīvojamās zonas ar sanitāro aizsargjoslu. Teritorijai jābūt labiekārtotai.

Sanitārās aizsardzības zonas izmērus nosaka SaNPiN 2.2.1 / 2.1.1.1200-03 prasības.

1.10. Sanitārās aizsardzības zonas izmēri vivārijiem, kas atrodas atsevišķās administratīvajās, rūpnieciskajās ēkās un kuriem ir izolēta izeja, katrā gadījumā tiek saskaņoti ar valsts sanitārās un veterinārās uzraudzības iestādēm.

2. Vivārija telpu sastāvs, savstarpējais izvietojums un platības normas

2.1. Katrā vivārijā jāiekļauj telpas, kas projektētas saskaņā ar spēkā esošajiem būvnormatīviem un noteikumiem atbilstoši pašreizējām veterinārajām un sanitārajām prasībām un zoohigiēniskiem standartiem, tostarp:

personāla telpa ar individuāliem skapīšiem kombinezoniem;

telpas vivārijā tikko ienākušo dzīvnieku uzņemšanai un karantīnai;

izolators;

telpas izmēģinājumu dzīvnieku turēšanai (katrai sugai atsevišķi) vai (saskaņojot ar valsts veterinārās un sanitārās uzraudzības iestādēm) sadalītas sekcijās atbilstoši dzīvnieku sugām;

sterilizācijas telpa vai kaste pētnieku darbam ar neinficētiem dzīvniekiem, ar telpu dzīvnieku preparēšanai un ledusskapi līķu pagaidu uzglabāšanai;

izolētas telpas ar īpaši bīstamu infekciju patogēnu vai radioaktīvo vielu patogēnu kultūrām inficētu izmēģinājumu dzīvnieku turēšanai (atsevišķi) no operāciju zāles katrā izolētajā telpā, kurā ir ledusskapis un nepieciešamais aprīkojums dzīvnieku inficēšanai un preparēšanai;

barības virtuve barības pagatavošanai (jāaprīko ar plīti un ledusskapi);

dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļa mazgāšanai ar karstu ūdeni, būru un cita aprīkojuma dezinfekcijai un žāvēšanai;

tīra (dekontaminēta) rezerves inventāra noliktava: būri, dzirdinātāji utt.;

sanitārais bloks (duša un tualete);

telpa, kas aprīkota ar krāsni dzīvnieku līķu dedzināšanai;

kopēja saldētava dzīvnieku līķu uzglabāšanai;

barības noliktava;

pakaišu noliktava;

atsevišķā telpā vai atsevišķā ēkā - gaisa kondicionētāju, ventilācijas, elektrisko un citu speciālo instalāciju tehniskais mezgls.

2.2. Katrā vivārijā ir jābūt telpai, kur uzņemt ienākošos dzīvniekus. Vivārijos, kur tiek turēti mazie grauzēji, uzņemšanas nodaļas priekšā ir ierīkots izolēts vestibils, kurā iebrauc un izkraujas automašīna ar atbraukušajiem dzīvniekiem.

Vivārijam atrodoties laboratorijas korpusu augšējos stāvos, reģistratūra un izolētais vestibils atrodas laboratorijas korpusa pirmajā stāvā un ir savienoti ar vivāriju ar liftu, ko izmanto tikai laboratorijas dzīvnieku pacelšanai.

2.3. Uzņemšanas telpa ir 12,5 - 18 m 2 liela telpa ar dabisko un mākslīgo apgaismojumu atbilstoši prasībām.

Vivārija visu telpu augstums ir 3 - 3,5 m.

2.4. Karantīnas telpa sastāv no vairākām izolētām telpām 12,5 - 18 m 2 platībā un ir izolēta no telpām, kurās atrodas dzīvnieki, kuri izgājuši karantīnu un nāk uz eksperimentiem.

2.5. Karantīnas telpām blakus ir izolēta telpa slimiem dzīvniekiem un dzīvniekiem ar aizdomām par slimībām. Izolācijas telpu platības ir līdzīgas karantīnas telpu platībām.

2.6. Telpas, kas paredzētas izmēģinājumu dzīvnieku turēšanai, var nonākt vienā kopīgā koridorā vai atrasties starp diviem koridoriem, un katrā no tiem var būt izejas. Izmantojot viena koridora izkārtojumu, "netīrie" un "tīrie" dienesti atrodas dažādos koridora galos.

Ar divu koridoru sistēmu, barība, karantīnā esošie dzīvnieki ierodas pa vienu koridoru (“tīri”), darbinieki pirms darba uzsākšanas ar dzīvniekiem ienāk tīros kombinezonos un maināmos apavos. Citā (“netīrajā”) koridorā tiek izņemta neapēstā barība un kūtsmēsli, izvesti dzīvnieku līķi, darbinieki iznāk pēc darba ar dzīvniekiem.

Ja nav iespējams izolēt "netīrās" un "tīrās" plūsmas, ir atļauts izmantot vienu un to pašu telpu vienam vai otram mērķim, ar nosacījumu, ka tā tiek dezinficēta katru reizi pēc "netīrās" plūsmas caurplūdes.

2.7. Telpu platība noteikta veida izmēģinājumu dzīvnieku turēšanai ir 12,5 - 18 m 2 ; eksperimentālo dzīvnieku turēšanas telpu platība, kas sadalīta sekcijās, tiek noteikta ar aprēķinu.

2.8. Sterilizācijas telpas vai kastes platība pētnieku darbam ar neinficētiem dzīvniekiem tiek noteikta ar aprēķinu, pamatojoties uz piedāvātā darba specifiku.

2.9. Izolēto telpu platības darbam ar izmēģinājumu dzīvniekiem, kas inficēti ar īpaši bīstamu infekciju patogēniem, un darbam ar izmēģinājumu dzīvniekiem, kas piesārņoti ar radioaktīvām vielām, kā arī operāciju telpu platības katrā izolētajā telpā tiek noteiktas ar aprēķinu, pamatojoties uz nepieciešamo manipulāciju veikšanai izmantotā tehnoloģiskā un speciālā aprīkojuma nosacījumi.

2.10. Telpu kopējai platībai, ko aizņem barības virtuve, dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļa un tīra rezerves aprīkojuma noliktava, vajadzētu būt aptuveni 50% no kopējās dzīvnieku aizņemtās telpas platības (lielos vivārijos šis procents var būt nedaudz jāsamazina).

Barības virtuve sastāv no divām blakus telpām, kas paredzētas barības pārstrādei un pagatavošanai. Katrai telpai jābūt pieejai koridoram.

Dezinfekcijas-mazgāšanas nodaļa (viena vai vairākas) sastāv no divām telpām, kuras savieno caurejošs autoklāvs vai caurstaigājama sausā siltuma kamera.

Dezinfekcijas-mazgāšanas nodaļas ierīcei jānodrošina cita darba secība:

inficēta materiāla klātbūtnē - inventāra un pakaišu iepriekšēja sterilizācija ar pēdējo mehānisko tīrīšanu citā telpā;

sterilizācija pēc būru un inventāra mehāniskās tīrīšanas, kad nepastāv piesārņotā materiāla briesmas.

Neatkarīgi no vivārija atrašanās vietas (atsevišķā ēkā vai laboratorijas korpusa augšējā stāvā) dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļai jābūt nodrošinātai ar atkritumu tvertni netīrās pakaišu noņemšanai un materiālu un aprīkojuma mehanizētai pacelšanai.

Tīra inventāra un aprīkojuma noliktava atrodas blakus dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļai.

2.11. Pakaišu (skaidas, zāģu skaidas, kūdras u.c.) uzglabāšanai ir atvēlētas divas telpas: viena sterilizētai un iepakota šī vivārija izmantotajos konteineros, otra jauniegādāto pakaišu uzglabāšanai.

2.12. Projektējot vivārija telpas, ir jānodrošina maksimāla izolācija:

visas tās telpas no citām nodaļām, kas ir daļa no pētniecības iestādes;

izolatora telpas un karantīnu no citām vivārija telpām;

starp barības virtuvi, dzīvnieku telpām un dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļu.

2.13. Katrā gadījumā platība, ko aizņem barības virtuve, dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļa un noliktava tīram rezerves inventāram, tiek noteikta atkarībā no izmantotajām iekārtām, ražošanas procesu mehanizācijas pakāpes un izmēģinājumu dzīvnieku barības veidiem.

Iepriekš minēto telpu platību izmēri ir norādīti projektēšanas uzdevumā.

3. Veterināri sanitārās un tehnoloģiskās prasības vivārija telpu un inženiertehnisko iekārtu būvrisinājumiem

Slēgtā tipa gaismekļiem un apgaismes ķermeņiem jābūt pieejamiem mitrai tīrīšanai.

3.5. Vivārija telpas, kurās tiek turēti laboratorijas dzīvnieki, ir aprīkotas ar piespiedu pieplūdes un izplūdes ventilācijas sistēmu, kas nodrošina gaisa apmaiņas biežumu un temperatūras un mitruma apstākļus atbilstoši tabulā dotajiem datiem. .

Dzīvnieku sugas	Temperatūra, °С		Relatīvais mitrums, %		Maksimālā pieļaujamā koncentrācija gaisā
	svārstības	vidēji	svārstības	vidēji	amonjaks, mg/l	oglekļa dioksīds pēc tilpuma, %	kapuci	pieplūdums
Peles	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
Žurkas	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
Kāmji	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
jūrascūciņas	15 - 18		50 - 65		0,01	0,15
truši	15 - 18		50 - 65		0,01	0,15
Suņi	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
kaķi	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15

3.6. Temperatūras un mitruma režīms citās vivārija telpās jānodrošina saskaņā ar tabulā norādītajiem datiem. .

telpa	Temperatūra aukstajā un gada pārejas periodā, ° С	Gaisa maiņas kurss (apjomi stundā)
		pieplūdums	kapuci
1. Personālam
2. Dzīvnieku uzņemšanai
3. Pētījumiem
4. Mazgāšana-sterilizācija		1 - 2	2 - 3
5. Eitanāzijai (eitanāzijai)
6. Atvēršana
7. Pārstrāde		Pēc aprēķina
8. Par izmēģinājumu lauksaimniecības dzīvnieku turēšanu	3.11. Notekūdeņu izvadīšanai un savākšanai pēc procesa iekārtu un grīdu mazgāšanas un dezinfekcijas jāparedz ar noņemamām perforētām plāksnēm un kāpnēm pārklātu paplāšu uzstādīšana. Paplāšu slīpumam jābūt vismaz 0,02. 3.12. Projektējot vivāriju lokālo kanalizācijas sistēmu, jāievēro šādas prasības: notekūdeņus no līķu dedzināšanas telpām sterilizē manzhus ar dzīvu tvaiku 120 ° C temperatūrā 30 minūtes vai tvaika strūklas iekārtā 110 ° C temperatūrā 10 minūtes; īpaši bīstamu infekciju klātbūtnē notekūdeņus sterilizē 140 ° un 130 ° C temperatūrā attiecīgi 20 un 60 minūtes; rūpnieciskie un sadzīves notekūdeņi no grīdu mazgāšanas un mazgāšanas un dezinfekcijas procesa iekārtām jāsavāc speciālā uztvērējā un pirms novadīšanas kanalizācijā jādezinficē ar hloru saturošiem preparātiem; Veterinārā un sanitārā ziņā nelabvēlīgas vētras notekcaurules no brīvi stāvošu vivāriju teritorijas tiek pakļautas dezinfekcijai ar ķīmiskām vielām; radušās mehāniskās un bioloģiskās notekūdeņu dūņas tiek sadedzinātas. 3.13. Pieplūdes un izplūdes ventilācijas maģistrālajiem kanāliem, elektroapgādes, ūdens apgādes un kanalizācijas caurulēm gaiteņos jābūt izvietotām īpašās nišās un tiem jābūt brīvai piekļuvei apskatei un remontam. 3.14. Izolētas telpas izmēģinājumu dzīvnieku turēšanai, kas inficētas ar īpaši bīstamu infekciju patogēnu vai radioaktīvo vielu kultūrām, un izolēšanas telpa ir aprīkota ar lokālās ventilācijas sistēmām ar filtriem, kas nodrošina 100% izdalītā gaisa attīrīšanu un dezinfekciju. Ventilācijas sistēmai šajās telpās jānodrošina pazemināts (par 3 - 5 mm Hg) atmosfēras gaisa spiediens attiecībā pret citām vivārija telpām. Ventilācija šajās telpās, atverot logus, ir aizliegta. 4. Vivārija aprīkojums un dzīvnieku izmitināšanas apstākļi 4.1. Peles, žurkas, kāmji, jūrascūciņas un truši tiek izmitināti būros, kas uzstādīti uz metāla plauktiem. 4.2. Sienas vai cita dizaina plauktiem jābūt ar noņemamiem kronšteiniem un pārvietojamiem plauktiem, kas ļauj tos pārveidot par dažādu izmēru būriem ar dažāda veida laboratorijas dzīvniekiem. 4.3. Lai aprēķinātu ražošanas platību, ir jāvadās no šādiem standartiem dzīvnieku ievietošanai būros (tabula). Dzīvnieku sugas Minimālais būra dibena laukums vienam dzīvniekam, cm2 Dzīvnieku skaits maksimāli pieļaujamais būrī uz 1 m 2 grīdas platības Peles 65 pieaugušie vai 240 jaundzīvnieki Žurkas 20 pieaugušie vai 100 jaunlopi Kāmji 30 - 40 jūrascūciņas 15 - 18 truši 2000 3 - 4 Piezīmes. 1. Aptuvenai ražošanas platības noteikšanai jāvadās pēc aprēķina, ka 1 cm 2 no būra dibena laukuma ir 1 g dzīvnieka svara. 2. Plaukti galvenokārt atrodas gar sienām, un tiem vajadzētu aizņemt aptuveni 40% no ražošanas platības. 4.4. Suņi tiek ievietoti atsevišķās kajītēs (kastēs) stingri individuāli. Kastes izmēriem jāatbilst dzīvnieku garumam un augstumam. Boksa izmēri lieliem suņiem, kuru svars pārsniedz 22,5 kg - 1,2 × 1,8 m = 2,2 m 2, vidēji 16 - 22,5 kg - 1,2 × 1,5 m = 1,8 m 2, mazs svars 4,5 - 16 kg - 0,9 × 1,2 m = 2,1 m . Atstarpe starp stieņiem 4,5 - 5,5 cm, metāla stieņu diametrs 0,5 - 0,6 cm Sānu sienas ir cietas. Uz apakšējās sienas (grīdas) ir uzlikti koka vairogi. Barošana un dzirdināšana - boksā. Iežogojumi pastaigām tiek iekārtoti individuāli, ar ātrumu līdz 2 m 2 vienam dzīvniekam. Pastaigas laiks - vismaz 2 reizes dienā, ilgums - vismaz 20 minūtes. Jānodrošina atsevišķa tēviņu turēšana no mātītēm, kucēniem un agresīviem dzīvniekiem. 4.5. Suņu vivārija teritorijā tiek izbūvētas īpašas telpas, kas aprīkotas ar kajītēm. Kajītēm ir piestiprināti korpusi (pastaigas). Katram sunim jābūt savam iežogojumam. Kabīnes izmēri, m: garums - 2; platums - 1,5; priekšējās sienas augstums - 2,5 un aizmugures - 1,5 - 2; salona durvju augstums - 1,7, platums - 0,7. Virs kabīnes durvīm ir uzstādīts stiklots rāmis. Durvju apakšā, kas uzstādītas kabīnes aizmugurējā sienā, kas ir korpusa priekšējā siena, korpusā ir izveidots caurums ar izmēru 40 × 50 cm, kas ir piekārts ar biezu drānu ziemas aizsardzībai no auksts. Korpusa izmēri, m: garums - 3, platums - 2, augstums - 2,2. Tās priekšējā sienā ir izgatavotas durvis ar izmēriem 1,8 × 0,7 m. 4.6. Kaķi tiek izmitināti iežogojumos pa piecām galvām, kur ir nodrošināti plaukti (gultas), kas ir pietiekami platībā, lai tajās varētu izmitināt visus dzīvniekus. Brīvdabas būra platība vienam kaķim ir 0,5 m2. Pirms ieejas voljērā iekārtots sieta vestibils. 4.7. Ja lauksaimniecības dzīvniekus un putnus zinātniskos nolūkos ievieto vivārijos, telpas tiem tiek izbūvētas atbilstoši spēkā esošajiem tehnoloģiskā projektēšanas standartiem atbilstoši šajos standartos noteiktajiem zoohigiēniskiem standartiem. 5. Dzīvnieku uzņemšana vivārijā 5.1. Vivārija papildināšana ar dzīvniekiem un putniem tiek veikta specializētās audzētavās, kas ir brīvas no infekcijas slimībām. Dzīvnieku un putnu iegāde citās organizācijās un privātpersonās atļauta, ja tos nav iespējams iegādāties stādaudzētavās un ja katram pirkumam ir organizācijas (saimniecības, privātpersonas) labklājības veterinārais sertifikāts par infekcijas slimībām. 5.2. Dzīvniekus vivārijā uzņem ar veterināro sertifikātu vai pavaddokumentiem no audzētavas. 5.3. Dzīvnieki, kas saņemti no audzētavas, tiek ievietoti izolētās sekcijās uz trim dienām, lai pielāgotos jaunajiem apstākļiem. Turpmākie izolācijas vai karantīnas periodi šiem dzīvniekiem tiek noteikti atkarībā no dzīvnieku turēšanas apstākļiem, gaidāmo eksperimentu rakstura, attāluma, transportēšanas apstākļiem u.c. 5.4. Dzīvniekiem, kas nav iegūti no audzētavām, tiek noteikti šādi karantīnas noteikumi: pelēm un žurkām - 14 dienas, jūrascūciņām un trušiem - 21, suņiem un kaķiem - 30, citiem dzīvniekiem un putniem - 21 diena. Atsevišķos gadījumos, kad izmēģinājumos, kā arī īslaicīgos izmēģinājumos izmanto grūsnas mātītes, jaundzimušos un jaunus dzīvniekus, karantīnas ilgumu var samazināt, ja šos dzīvniekus ievieto izolētās telpās un atbilstošā uzraudzībā. 5.5. Karantīnas periodā dzīvnieki tiek pakļauti ikdienas klīniskajai novērošanai: termometrijai un dzīvnieku vispārējā stāvokļa reģistrēšanai speciālā žurnālā. 5.6. Karantīnas un eksperimentālajās daļās dzīvniekus ievieto tīros, iepriekš dezinficētos (autoklāvos) būros. 5.7. Par dzīvniekiem karantīnas ēkā rūpējas šajās telpās norīkotais personāls. 5.8. No karantīnas telpām uz citām izmēģinājumu dzīvnieku telpām un sekcijām aizliegts izvest pārtiku, kombinezonus un aprīkojumu. 5.9. Karantīnas periodā tiek veikta periodiska būru maiņa. Karantīnas beigās atbrīvotie būri un inventārs tiek nodoti dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļā. Šūnu un cita aprīkojuma tīrīšanu un mazgāšanu no karantīnas sekcijām vivārija vispārējās dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļā var veikt tikai pēc iepriekšējas dezinfekcijas. Arī atkritumi ir jādekontaminē vai jāsadedzina. Dezinfekcijas metodes, dezinsekcija un autoklāvēšanas režīms tiek noteiktas katrā gadījumā atkarībā no iestādes specifikas. 5.10. Adaptācijas vai karantīnas periodā dzīvnieki ar aizdomām par infekcijas slimībām tiek pakļauti bakterioloģiskai izmeklēšanai. Kad tiek apstiprināta infekcijas slimība, visas ienākošās partijas peles, žurkas, kāmji, jūrascūciņas un truši tiek iznīcināti, bet suņiem, kaķiem un citiem dzīvniekiem karantīnas periods tiek pagarināts atkarībā no konstatētās slimības. 5.11. Karantīnas telpas pēc katras eksperimentam nodotās dzīvnieku partijas un pēc katra infekcijas slimību atklāšanas tiek rūpīgi dezinficētas. 5.12. Karantīnā novēroto dzīvnieku masveida saslimstības gadījumā vai ja eksperimentu laikā tiek konstatēti atsevišķi laboratorijas dzīvniekiem un cilvēkiem īpaši bīstamu infekcijas slimību gadījumi, vivārijā tiek veikts nepieciešamais profilakses pasākumu komplekss. Šajā gadījumā eksperimenti ar dzīvniekiem uz laiku tiek apturēti. 5.13. Karantīnas perioda beigās dzīvnieki tiek pārvietoti uz eksperimentālajām sekcijām. 6. Darbības režīms un dzīvnieku turēšanas pamatnoteikumi 6.1. Katrā atsevišķā telpā ieteicams turēt tikai vienas sugas dzīvniekus. Ja saskaņā ar eksperimenta nosacījumiem vienā sekcijā ir nepieciešams turēt dažādu sugu laboratorijas dzīvniekus, tad tie jānovieto uz dažādiem plauktiem. 6.2. Katram būrim (kastē, voljēram utt.) jābūt etiķetei, kurā norādīti dati par dzīvnieku un eksperimenta laiks. 6.3. Laboratorijas dzīvniekus un putnus tur būros ar cietu dibenu uz metiena vai būros ar sieta dibenu – grīdu. Kā pakaiši tiek izmantotas skaidas, skaidas vai pakaišu kūdra. Pakaišus iepriekš autoklāvē vai glabā sausā karstuma skapī (150 - 180 ° C temperatūrā 15 - 20 minūtes). Pakaišu slāņa biezums būrī ir 5 - 10 mm. Turot dzīvniekus būros ar sieta dibenu, pakaišus lej paplātē (paplātē), kas atrodas zem sieta grīdas. 6.4. Visi darbi pie laboratorijas dzīvnieku kopšanas un uzturēšanas tiek veidoti saskaņā ar šīs iestādes vadītāja apstiprinātu dienas režīmu un darba grafiku. Ikdienas režīms paredz laiku telpu un iekārtu sanācijai, barības sadalei un eksperimentālo darbu un manipulāciju veikšanai. 6.5. Laboratorijas dzīvnieku barošana tiek veikta saskaņā ar esošajiem standartiem. 6.6. Barība un pusfabrikāti tiek uzglabāti speciāli šim nolūkam paredzētā telpā. Barības sadale tiek veikta noteiktajā kārtībā. Vivārija barības virtuvē ir atļauts uzglabāt ne vairāk kā divas līdz trīs dienas pārtikas krājumus. Barojot dzīvniekus ar granulētu barību un ja būros ir barības piltuves, pieļaujama iepriekšēja barības saņemšana no noliktavas uz septiņām līdz desmit dienām. 6.7. Barības virtuvē un vivārija pieliekamajā ir aprīkotas īpašas lādes (metāla vai iekšpuses polsterētas ar skārdu), lai uzglabātu barības krājumus. Ātri bojājošos pārtikas produktus uzglabā ledusskapī. Barības piegādi no noliktavas veic speciāli norīkots personāls (strādnieki, kuri nav tieši saistīti ar dzīvnieku aprūpi). 6.8. Barības sadali telpās-sekcijās veic strādnieki vai speciāli šim nolūkam iedalīti virtuves darbinieki katrai sekcijai piešķirtajos dezinficētajos traukos (konteineros). Barības norakstīšana tiek veikta noteiktajā kārtībā atbilstoši dzīvnieku faktiskajai pieejamībai katrai dienai. 6.9. Personālam, kas aprūpē laboratorijas dzīvniekus, un nepiederošām personām ieeja barības virtuvē ir aizliegta. 6.10. Laboratorijas dzīvnieku padeve ar dzeramo ūdeni tiek veikta no ūdens padeves, ūdens kvalitātei jāatbilst SanPiN 2.1.4.1074-01. 6.11. Laboratorijas dzīvnieku barošanai paredzēto graudu dīgšana uz zaļās masas tiek veikta speciāli šim nolūkam paredzētās telpās. Dzīvniekus ir atļauts barot ar augu sakņu masu, ja tajā nav pelējuma. 6.12. Dzīvnieku barības sadale un dzirdināšana jāveic tikai pēc telpu uzkopšanas, būru tīrīšanas vai maiņas un netīro iekārtu, paplāšu ar pakaišiem un citu dezinficējamo vai likvidējamo materiālu izņemšanas no sekcijām. 6.13. Sprostu tīrīšana un telpu uzkopšana tiek veikta ar katrai telpai stingri piešķirto inventāru. 6.14. Periodiski mainot būrus, dzīvniekus 1-2 reizes nedēļā pārstāda iepriekš dezinficētos būros ar sagatavotiem pakaišiem, barotavām un dzirdinātājiem. Netīrie būri kopā ar pakaišiem, barotavām un dzirdinātājiem tiek pārvietoti uz dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļu to turpmākai apstrādei. 6.15. Šūnas tiek tīrītas katru dienu. Tajā pašā laikā piesārņotie pakaiši un citi atkritumi no būriem tiek savākti speciālās metāla tvertnēs ar vākiem. Tvertnes ir cieši noslēgtas un nogādātas dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļā. 6.16. Izmantojot būrus ar sieta dibenu un no būriem izolētas paplātes, pēdējos periodiski (vismaz reizi nedēļā) nomaina pret jauniem. Netīrās paletes ar pakaišiem tiek nodotas dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļā to tālākai apstrādei. 6.17. Kad viens strādnieks apkalpo vairāku veidu laboratorijas dzīvniekus, vispirms tiek apstrādāti būri ar jūrascūciņām, tad būri ar pelēm, žurkām un trušiem un visbeidzot telpas, kur tiek turēti suņi un kaķi. 6.18. Būru, barotavu un dzirdinātāju mazgāšana un dezinficēšana tieši sekcijās ir aizliegta. 6.19. Pirms darba dienas beigām sekcijās tiek veikta grīdas mitrā tīrīšana, izmantojot 1% hloramīna šķīdumu vai citu dezinfekcijas līdzekli. Vismaz reizi mēnesī tiek rīkota sanitārā diena, kuras laikā tiek uzkoptas visas telpas. Sanitārās dienas kārtību nosaka vivārija vadītājs. 6.20. Būru, barotavu, dzirdinātāju un cita aprīkojuma dezinfekciju, tīrīšanu un mazgāšanu veic dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļā speciāli norīkoti darbinieki. Inventāra tīrīšanas un dezinfekcijas efektivitātes kontrole tiek uzticēta vivārija veterinārārstam. 6.21. Atkritumu (pakaišu, kūtsmēslu, barības pārpalikumu utt.) savākšanas, uzglabāšanas, izvešanas (vai apglabāšanas) nosacījumi ir jānosaka katrā konkrētā gadījumā, vienojoties ar Rospotrebnadzor vietējām iestādēm un iestādēm. Strādājot ar inficētu materiālu, ir nepieciešams dezinficēt atkritumus ar autoklāvu vai apstrādi ar dezinfekcijas šķīdumiem. 6.22. Sekcijās ar izmēģinājumu dzīvniekiem pastāvīgi jāuzrauga temperatūras un mitruma režīms. Lai kontrolētu gaisa vides kvalitāti telpās, kurās tiek turēti dzīvnieki, ieteicams periodiski (2-3 reizes mēnesī) noteikt kaitīgo gāzu (dioksīda un amonjaka) koncentrāciju. 6.23. Dzīvnieku nodošana izmēģinājumiem tiek veikta pēc vienreizējām prasībām pēc ikgadējā laboratoriju iesnieguma, ko apstiprinājis iestādes vadītājs. Darbs ar dzīvniekiem atļauts tikai vivārija ikdienas rutīnā paredzētajās stundās. 6.24. Ja sekcijās tiek atrasti slimi dzīvnieki, pēdējie, zinot eksperimenta veicējam, tiek iznīcināti vai pārvietoti uz izolāciju. Jautājums par slimo dzīvnieku turpmāku izmantošanu tiek atrisināts ne ilgāk kā divu dienu laikā. 6.25. Dzīvnieku līķus pirms patoanatomiskās autopsijas uzglabā speciālā ledusskapī ne ilgāk kā vienu dienu, pēc tam tos likvidē. Dzīvnieku līķu glabāšana būros un uz grīdas eksperimentālajās daļās ir stingri aizliegta. 6.26. Dzīvnieku patoloģisku anatomisko autopsiju veic eksperimentētājs. Dzīvnieka nāves gadījumā neatkarīgi no eksperimenta autopsijā piedalās vivārija veterinārārsts. 6.27. Katrs dzīvnieku nāves vai piespiedu kaušanas gadījums jāreģistrē īpašā žurnālā. 6.28. Vivāriju aizliegts apmeklēt nepiederošām personām bez īpašas atļaujas. Iestādes darbiniekiem, kas veic darbu vivārijā, ir pienākums: ievērot noteiktos dienas režīma noteikumus un vivārija darba grafiku; veikt sistemātiskus eksperimentālo dzīvnieku novērojumus; uzturēt primāro dokumentāciju, savlaicīgi aizpildot etiķetes uz būriem ar izmēģinājumu dzīvniekiem; apmeklēt tikai tās vivārija telpas, kurās atrodas šim darbiniekam iedalītie dzīvnieki; pēc eksperimenta vai jebkura cita notiekoša darba ar izmēģinājumu dzīvniekiem pamest darba vietu atbilstošā kārtībā; uzraudzīt to izmēģinājuma dzīvnieku savlaicīgu norakstīšanu, kuri ir pametuši eksperimentu, nokrituši vai bijuši spiesti tos nogalināt; informē vivārija speciālistus par visiem novērotajiem izmēģinājumu dzīvnieku saslimšanas gadījumiem, kā arī savlaicīgi informē vivārija speciālistus par iespējamiem dzīvnieku patoloģiskajiem stāvokļiem atbilstoši izmēģinājuma nosacījumiem. 6.29. Iestādes darbiniekiem, kas veic darbu vivārijā ar izmēģinājumu dzīvniekiem, bez vivārija speciālistu piekrišanas aizliegts dot darbiniekiem jebkādus norādījumus par dzīvnieku turēšanas un barošanas režīma maiņu. 6.30. Šīs iestādes darbiniekiem veicot kopīgus pētījumus par dzīvniekiem citās iestādēs, šiem darbiniekiem uz šo laiku ir aizliegts strādāt sava institūta (iestādes) (klīnikas) vivārijā. 6.31. Visas darbības, kas var izraisīt sāpes laboratorijas dzīvniekiem (operācijas, totāla asiņošana, sensoru implantācija u.c., kā arī dzīvnieku piespiedu kaušana), jāveic, izmantojot anestēzijas līdzekļus. Ja saskaņā ar eksperimenta nosacījumiem anestēzijas lietošana ir kontrindicēta, tad visas iepriekš minētās darbības jāveic pēc iespējas ātrāk. 6.32. Eksperimenta laikā darbiniekam, kas veic šo eksperimentu, obligāti jāievēro šādi noteikumi par humānu izturēšanos pret laboratorijas (eksperimentālajiem) dzīvniekiem. Gadījumos, kad gaidāma ķirurģiska iejaukšanās vai eksperiments ar sāpju stimulāciju, pirms dzīvnieka piesiešanas pie iekārtas jāievada anestēzija. Anestēzijas līdzekļa daudzums jāaprēķina uz 1 kg vai 1 g dzīvnieka svara. Vielas nosaukums un daudzums jāieraksta ne tikai eksperimenta protokolā, bet arī speciālā kartē. Eksperimenta laikā, kad tas izrādās ilgāks nekā sākotnēji aprēķināts, papildu anestēzijas līdzekļu ievadīšana ir obligāta. Ja akūts eksperiments beidzas ar dzīvnieka nāvi, tad eksperimenta veicējam dzīvnieks jānogalina pirms anestēzijas līdzekļa iedarbības beigām. Pēc ķirurģiskas iejaukšanās beigām dzīvnieks uz speciālām nestuvēm jāpārved uz pēcoperācijas telpu, kas izslēdz audu pārvietošanās iespēju, šuvju diverģenci utt. Eksperimenta veicējam ir jāparedz sāpju parādīšanās iespēja dzīvniekam pēcoperācijas periodā un jāparedz pretsāpju līdzekļi. 7. Vivārija apkalpotāju skaits 7.1. Vivārija pavadoņu skaits tiek noteikts atkarībā no eksperimentālo pētījumu apjoma un rakstura, kā arī no laboratorijas dzīvnieku skaita. Šajā gadījumā ir jāvadās no sekojošām vienas sugas dzīvnieku slodzes normām uz vienu aprūpētāju (ņemot vērā dzīvnieku ievietošanas būros normas). Dzīvnieku sugas Numurs dzīvnieki šūnas Peles 800 - 1000 80 - 100 Žurkas 600 - 700 80 - 100 Kāmji 60 - 70 jūrascūciņas 50 - 70 truši Suņi 18 - 20 18 - 20 kaķi 35 - 40 Ja viena persona apkalpo vairāku sugu dzīvniekus, aprēķins tiek veikts, pamatojoties uz iepriekšminētajiem standartiem. Katrā konkrētajā gadījumā, nosakot normas dzīvnieku kopšanas slodzei uz vienu strādnieku, ir jāņem vērā būru veids, ražošanas procesu mehanizācijas pakāpe, barošanas veids (dabiskā barība vai granulētā barība), pētījuma biežums, raksturs un raksturojums utt. 7.2. Strādājot ar radioaktīvām vielām vai īpaši bīstamām infekcijām, kā arī turot dzīvnieku sugas, kas nav uzskaitītas tabulā. , apkalpošanas standartus nosaka zinātniskās institūcijas vadītājs, pamatojoties uz atsevišķu darbību grafiku un ņemot vērā spēkā esošos lauksaimniecības dzīvnieku apkalpošanas standartus. 8. Vivārija darbinieku personīgās higiēnas noteikumi 8.1. Vivarium darbinieki ir jānodrošina ar kombinezoniem, drošības apaviem, ziepēm un dvieļiem saskaņā ar spēkā esošajiem noteikumiem. 8.2. Telpās ar dzīvniekiem, barības virtuvē, dezinfekcijas un mazgāšanas nodaļā ir nepieciešami dezinfekcijas šķīdumi roku dezinfekcijai. 8.3. Vivarium personālam: pirms darba uzsākšanas novilkt virsdrēbes, apavus, uzvilkt kombinezonu, drošības apavus; darba beigās (vēlams pirms darba sākuma) veikt ārstēšanu sanitārajā blokā (ieiet dušā vai vannā); pakārt mājas drēbes un kombinezonus tikai atsevišķās atsevišķā skapja sekcijās; periodiski (bet vismaz reizi mēnesī) dezinficē savus individuālos kabinetus; katra atsevišķā darba posma beigās saskaņā ar dienas režīmu, kā arī pirms ēšanas noteikti nomazgājiet un dezinficējiet rokas. 8.4. Vivārija ražošanas telpās ir stingri aizliegts ēst un smēķēt. 8.5. Personām, kas no jauna pieņemtas darbā ar laboratorijas dzīvniekiem, jāveic medicīniskā pārbaude, kas ietver tuberkulozes patogēnu un visas zarnu infekciju grupas pārbaudes. Pēcpārbaudes tiek veiktas vismaz reizi gadā. Pacientiem ar tuberkulozi, veneriskām, ādas un citām lipīgām slimībām nav atļauts strādāt vivārijā. 8.6. Veicot eksperimentus ar dzīvniekiem ar cilvēkiem bīstamiem infekcijas patogēniem, vivārija pavadoņi tiek pakļauti profilaktiskai imunizācijai.			Fiksācijas metode
Liellopi	Dzīvnieks tiek pieradināts, saspiežot deguna starpsienu ar pirkstiem, Garmsa, Nikolajeva knaibles, deguna riņķiem vai ierobežojot kustības, turot to aiz ragiem ar virvi, aiz kakla, galvas un otrās cilpas ap degunu. Pakaļējās ekstremitātes tiek fiksētas ar virves cilpu, kas tiek uzklāta uz abām ekstremitātēm nedaudz virs cīpslas. Notīrot un apgriežot panadus uz dzīvnieku iegurņa ekstremitātēm, apakšstilbu var uzgriezt. Buļļi ir fiksēti ar deguna gredzeniem un spēcīgu apkakli ar ķēdi.
	Vaislas buļļi, neatkarīgi no to izvietojuma, apskatei tiek vesti tikai uz pavadām un tie vienmēr izmanto apmēram 2 m garu nesējnūju (karabīni), kas piestiprināta pie deguna gredzena, kas neļauj dzīvniekam pēkšņi uzbrukt cilvēkam. Teļus tur ar rokām aiz kakla, ausīm vai ar kakla aklo cilpas palīdzību ar speciālu mezglu un piesien ar virvi pie bagāžnieka.
Cūkas	Dzīvniekus fiksē stāvus, satverot augšējo žokli ar metāla trosi un roktura turētāju vai vienkāršas konstrukcijas mašīnā. Nobarojamos dzīvniekus un jauncūkas ērti turēt ar K.P. piedāvātajām knaiblēm. Solovjovs. Piesardzība ir nepieciešama, rīkojoties ar kuiļiem, veciem cūkām un laktējošām sivēnmātēm, īpaši tām, kuras ir nostiprinātas aizgaldos.
Kazas un aitas	Dzīvniekus tur aiz ragiem vai kakla. Ja nepieciešams, nostipriniet guļus stāvoklī uz galda.
Zirgi	Zirgi ir fiksēti tā, lai tie nevarētu sist ar priekšējām un pakaļējām ekstremitātēm vai iekost. Zirgiem jāpieiet nedaudz no sāniem, pleca un lāpstiņas virzienā, vēlams no kreisās puses, jo zirgs pie tā pierod ekspluatācijas laikā. Viņi tuvojas galvai, ar kreiso roku paņem pavadas, iemaņas vai krēpes, ar labo roku glāsta un uzsit pa kaklu, skaustu, pēc tam pa lāpstiņu un plecu. Ja dzīvnieks tiek turēts bez pavadas stendā, tad tas ir jāsauc, lai pievērstu sev uzmanību, piezvanītu, izrunājot mīļus vārdus. Ir nepieciešams, lai zirgs stāvētu ar galvu pret cilvēku. Dzīvniekam, kas atrodas mašīnā vai uz sakabes staba, nevajadzētu tuvoties no aizmugures, bet nedaudz no sāniem no tās puses, uz kuru tas skatās. Termometrijas, taisnās zarnas izmeklēšanas, dažādu medicīnisku manipulāciju laikā, lai nodrošinātu veterinārārsta darba drošību, ir nepieciešams pacelt krūšu kurvja ekstremitāti no tās puses, no kuras speciālists manipulē, vai uzlikt vienu vai abas pakaļējās ekstremitātes. .
	Krūškurvja ekstremitāte tiek fiksēta, paceļot to aiz otas vai domājamās daļas un saliekot plaukstas locītavā. Tajā pašā laikā viņi stāv uz dzīvnieka sāniem ar muguru pret galvu. Paceltā ekstremitāte tiek turēta ar divām rokām, bet ilgstošu manipulāciju laikā - ar špakteles vai virves palīdzību, kas izmesta pār muguru. Jūs nevarat likt dzīvnieka pacelto ekstremitāti uz ceļgala, jo dzīvniekam ir ceturtais atbalsta punkts, kas nav drošs cilvēkiem. Virvi nedrīkst piesiet pie kāda priekšmeta vai aptīt ap dzīvnieka ķermeni, jo negaidīta kritiena gadījumā zirgs nevarēs ātri atbrīvot ekstremitāti. Pārbaudot ķermeņa aizmugurējās daļas, tiek fiksēta iegurņa ekstremitāte. Stāvot pie zirga krusta ar seju pret asti, viņi noliecas maklokā, bet ar otru viegli piesit kāju no augšas uz leju, paceļ to, piesprādzējas ar špakteles siksnu vai uzliek virves cilpu, kas ir pēc tam izlikts starp priekškājām, apvilkts ap kaklu un sasiets ar neizstieptu cilpu. Spītīgu un nemierīgu zirgu pieradināšanai izmanto vītņus un lūpu knaibles. Lai pielietotu pagriezienu, jums jāievieto roka vērpšanas cilpā. Satveriet augšlūpu, velciet to uz priekšu, ar kreiso roku pārvietojiet pagriešanas cilpu uz lūpas un cieši sagrieziet to. Dzīvniekus var droši nostiprināt īpašās iekārtās. Mašīnā zirgu ieteicams piesiet pie stieptēm, bet spītīgajam dzīvniekam, lai tas nesabruktu, ienest jostas zem vēdera.
kamieļi	Kamieļi tiek atvesti uz pētniecību uz pavadām. Kamieļiem jātuvojas uzmanīgi, vēlams no sāniem (no krūšu kurvja ekstremitāšu sāniem). Šo dzīvnieku pieradināšanas metodes ir tādas pašas kā liellopiem un zirgiem. Jāņem vērā šo dzīvnieku īpašās uzvedības iezīmes. Ir vēlams, lai kamieļu fiksēšanā iesaistītos personāls, kas par tiem pastāvīgi rūpējas.
Putns	Putns ir fiksēts, turot dabiskā stāvoklī aiz ekstremitātēm un spārniem, nesaspiežot krūtis, lai izvairītos no nosmakšanas. Strādājot ar ūdensputniem (zosīm, pīlēm), jātur galva, lai izvairītos no trieciena acī, un manipulācijas jāveic rokas stiepiena attālumā.
kažokzvēri	Dzīvniekus tur ar īpašām knaiblēm vai rokām audekla (ar kokvilnas oderi) dūraiņos. Viņi to noliek uz galda un tur ar vienu roku aiz kakla, ar otru aiz rumpja. Mutes dobumu var atvērt ar V.L. izstrādāto žāvu palīdzību. Berestovs, ieteicams izmantot īpašus uzpurņus. Jūs varat nostiprināt dzīvniekus sieta slazdos, izmantot pretsāpju vai trankvilizējošus līdzekļus ar vietējiem anestēzijas līdzekļiem, kā arī anestēzijas līdzekli.
Suņi	Ar saimnieka palīdzību dzīvniekiem uzliek uzpurni vai ar stipru bizi sasien muti. Šim nolūkam no augšas uz žokļiem uzliek bizi, ar vienkāršu mezglu sasien zem apakšējās žokļa, pēc tam beidzot ar jūras mezglu nostiprina pakausī. Ja ir aizdomas par trakumsērgu, kā arī dusmīgiem un nemierīgiem suņiem, labāk tos ievietot speciālā metāla būrī, kura viena puse to kustina un knieba. Suņu nostiprināšanai guļus stāvoklī tiek izmantots operāciju galds maziem dzīvniekiem, kas ļauj tiem iedot jebkuru darbam ērtu pozu.
kaķi	Sāpīgu manipulāciju laikā dzīvnieki tiek fiksēti speciālā auduma piedurknē vai ietīti dvielī, atstājot brīvu ķermeņa daļu apskatei. Purns ir sasiets kā sunim, un kājas var nostiprināt ar rokām, valkājot ādas vai gumijas cimdus.

SNiP 11.01-2003. Norādījumi par uzņēmumu, ēku un būvju būvniecības projekta dokumentācijas izstrādes, apstiprināšanas, apstiprināšanas un sastādīšanas kārtību.

. SanPiN 2.2.1/2.1.1.1200-03. Uzņēmumu, būvju un citu objektu sanitārās aizsardzības zonas un sanitārā klasifikācija (Jauns izdevums. Apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā sanitārā ārsta 2007. gada 25. septembra dekrētu Nr. 74, reģistrēts Krievijas Federācijas Tieslietu ministrijā Nr. 10995, 2008. gada 25. janvāris).

Dzeramais ūdens. Higiēnas prasības centralizēto dzeramā ūdens apgādes sistēmu ūdens kvalitātei. Kvalitātes kontrole.

LABORATORIJAS DZĪVNIEKU IZMANTOŠANA

TOKSIKOLOĢISKĀ EKSPERIMENTĀ

Vadlīnijās analizētas dažāda veida laboratorijas dzīvnieku izmantošanas iespējas toksikoloģiskos eksperimentos, izklāstīti galvenie toksikoloģisko pētījumu veidi un ķīmisko vielu ieviešanas metodes to īstenošanā; dotas alkohola reibuma modelēšanas iespējas; ir pamatoti hroniskas alkohola intoksikācijas un alimentāras nepietiekamības kombinēto seku modelēšanas principi.

Ir sastādīts metodiskais ceļvedis,

K.V. Šeļgins, d.b.s.

I.A. Ķieģelis, asoc.

V.Ya. Ļeontjevs, prof.

A.G. Solovjovs.

redaktora prof., Krievijas Medicīnas zinātņu akadēmijas akadēmiķa P.I. Sidorovs.

Recenzents: galva. Cilvēku un dzīvnieku bioloģijas un ekologu katedra, Pomoras štata universitāte. Lomonosovs, d.b.s., prof. V.A. Baraškovs

1. Akūtas un hroniskas toksiskas ietekmes modelēšana ir svarīga klīniskās toksikoloģijas joma

2. Galvenie toksikoloģiskajos pētījumos izmantotie laboratorijas dzīvnieki

2.1 Grauzēji

2.3. lielie zīdītāji

3. Akūti, subakūti un hroniski eksperimenti toksikoloģijā

4. Toksisko vielu ievadīšanas metodes

5. Akūtas un hroniskas alkohola intoksikācijas modelēšana

6. Hroniskas alkohola intoksikācijas un alimentāras nepietiekamības kombinēto seku modelēšana

Literatūra

1. AKŪTA UN HRONISKĀ TOKSISKA MODELĒŠANA

EFEKTI IR SVARĪGS KLĪNISKĀS TOKSIKOLOĢIJAS VIRZIENS

Viens no galvenajiem mūsdienu toksikoloģijas virzieniem ir tieši saistīts ar patoloģisku izmaiņu izpēti organismā akūtu un hronisku toksisku iedarbību.

Eksperimenti ar laboratorijas dzīvniekiem var būt ļoti noderīgi, pētot akūtas un hroniskas intoksikācijas morfoloģisko un funkcionālo komplikāciju attīstības mehānismus, jo tiešie pētījumi ne vienmēr ir iespējami un dažreiz ētiski nepieņemami. Protams, eksperimentālo datu ekstrapolācija uz cilvēka patoloģiju klīniskās toksikoloģijas noteikumu izstrādes ietvaros prasa zināmu piesardzību dzīvnieku vielmaiņas procesu zināmo pazīmju, to iekšējo orgānu funkcionālo īpašību un dažkārt būtisku atšķirību dēļ. ķermeņa struktūrā. Tomēr eksperimenti ar dzīvniekiem ļauj izsekot orgānu patoloģisko izmaiņu dinamikai un gūt priekšstatu par patoloģisko procesu attīstību sistēmiskā, orgānu, šūnu un subcelulārā līmenī, kas ir nepieciešams nosacījums efektīvu metožu izstrādei. dažādu etioloģiju saindēšanās profilakse un ārstēšana.

Veicot eksperimentu, jāvadās pēc humānas izturēšanās pret dzīvniekiem principiem saskaņā ar Starptautiskajām rekomendācijām (1993), kā arī ievērojot Starptautiskās zinātnes komitejas (1978) bioētikas normas un prasības.

Atbilstoši diferencētajiem ķīmisko savienojumu toksiskās ietekmes modelēšanas uzdevumiem var veikt eksperimentus ar dažādiem laboratorijas dzīvniekiem, starp kuriem toksikoloģiskos pētījumos izplatītākās sugas ir grauzēji, putni un lielie zīdītāji.

2. PAMATLABORATORIJAS DZĪVNIEKI,

IZMANTO TOKSIKOLOĢISKĀ PĒTĪJUMĀ

2.1. Grauzēji.

Modelējot ķīmisko vielu toksisko iedarbību, visbiežāk tiek izmantoti grauzēji (peles, žurkas, jūrascūciņas, truši).

Baltās laboratorijas peles, kas ir albīnas mājas pelēkās peles, tiek izmantotas ķīmisko vielu toksicitātes noteikšanai, farmakoloģisko preparātu standartizācijai.

Jūrascūciņas ir klasisks objekts ķīmisko vielu alergēniskuma, kā arī beriberi izpausmju izpētei. Šo dzīvnieku izolēti orgāni tiek izmantoti farmakoloģiskajos pētījumos.

Truši ovulācijas cikla īpatnību un augstā vairošanās ātruma dēļ ir ērti, lai noteiktu toksisko vielu ietekmi uz reproduktīvajām funkcijām.

Laboratorijas žurkas (albīnas melnās un pelēkās žurkas) ir visizplatītākais izmēģinājumu dzīvnieku veids, lai izstrādātu akūtās un hroniskās intoksikācijas ietekmes modeļus. Šobrīd ir izaudzētas vairāk nekā 100 atsevišķas laboratorijas žurku autobredas un inbred līnijas. Toksikoloģiskajiem pētījumiem visbiežāk izmantotās žurkas ir Wistar, Bio Breeding Sprague-Dawley, C57BL, CFI, C3H u.c.. Atsevišķi tiek izolēti konvencionālie (pāraudzētie) dzīvnieki, kuru mikroflora ir pilnībā vai daļēji nezināma.

Žurku izmantošanas ērtība ķīmisko un bioloģisko preparātu toksiskās iedarbības pētīšanai izskaidrojama ar to uzturēšanas vienkāršību, iespēju novietot pietiekamu skaitu dzīvnieku salīdzinoši nelielā platībā, mazu svaru, izturību pret infekcijas slimībām un lielu pēcnācēji, ko viņi dod. Žurkas ir viegli salabot ar rokām; pastāvīga kuņģa piepildīšana ar pārtiku parastā uztura laikā ļauj viņiem ievadīt intragastriski pietiekamas toksisko vielu devas, neizraisot katarālas izmaiņas gļotādā. Toksikoloģiskajos pētījumos priekšroka tiek dota vīriešiem, jo ​​viņiem nav hormonālo svārstību, kas varētu ietekmēt indes membranotropo iedarbību; lietderīgāk ir izmantot jaunus dzīvniekus, jo tiem ir mazāka tolerance pret dažādām toksiskām vielām.

Visbiežāk, veicot toksikoloģiskos eksperimentus, tiek izmantotas vistas, pīles, zosis un tītari. Atsevišķi izdalīt putnus - brīvus no specifiskiem patogēniem mikroorganismiem (specific pathogen free - SPF).

Putni ir noderīgs modelis, lai pētītu ķīmisko vielu ietekmi uz vielmaiņas procesiem, jo ​​tie ir intensīvāki un ātrāki nekā citi dzīvnieki. Tomēr, veicot pētījumus, ir jāņem vērā dažas putnu ķermeņa struktūras anatomiskās un fizioloģiskās īpatnības. Tā, piemēram, pēdējiem nav sviedru un tauku dziedzeru, kā arī urīnpūšļa, kas ir būtisks, lai noteiktu toksisko vielu un to metabolītu izvadīšanas klīrensu. Putnu asiņu un urīna sastāvs būtiski atšķiras no citu dzīvnieku atbilstošajiem fizioloģiskajiem parametriem. Atšķirībā no zīdītājiem putniem ir kuņģa-zarnu trakta struktūras īpatnības, tiem ir atšķirīgs barības sagremošanas process. Putnu pētījumos ķermeņa svara izmaiņas ir apmierinošs kritērijs.

Pētot toksisko vielu ietekmi uz uzvedības aktivitāti, jāņem vērā, ka putnu reaktivitāte ir atkarīga no tā, vai tie pieder pie olu vai gaļas orientācijas, kā arī no to produktivitātes pakāpes.

Nepietiekama apgaismojuma gadījumā putni nav piemēroti barotājiem un dzirdinātājiem, tādēļ, ja saskaņā ar eksperimenta nosacījumiem nepieciešams palielināt barības vai šķidrumu, kas satur toksisku vielu, patēriņu, tiek izmantots mākslīgais apgaismojums. Eksperimenta laikā putnus ieteicams turēt grupās, jo tādā gadījumā tie sasniedz lielāku masu un ir izturīgāki pret infekcijām.

2.3. lielie zīdītāji.

Toksikoloģisko pētījumu veikšana ar lieliem zīdītājiem (suņiem, kaķiem, pērtiķiem) ir saistīta ar vislielāko līdzību to iekšējo orgānu un sistēmu struktūrā un darbībā, kā arī vielmaiņas procesos ar cilvēkiem.

Pērtiķi, neskatoties uz to uzturēšanas sarežģītību, tiek izmantoti toksikoloģijas praksē, lai pētītu ķīmisko vielu ietekmi uz centrālās nervu sistēmas funkcijām.

Kaķi kā izpētes objektu visbiežāk izmanto akūtos toksikoloģiskos eksperimentos. Turklāt to izolētie orgāni tiek izmantoti fizioloģisko izmaiņu noteikšanai, ja tie tiek pakļauti ķīmisko vielu iedarbībai.

Viens no lielajiem zīdītājiem, ko bieži izmanto klīniskajā toksikoloģijā, ir suņi. Toksikoloģisko eksperimentu veikšanai par vispiemērotākajiem tiek uzskatīti izaudzēti īsspalvainie suņi, kuru vidējais ķermeņa svars ir 10-15 kg, jo tīršķirnes un lineārie dzīvnieki ir daudz dīvaināki turēšanā un daudz nestabili hroniskos eksperimentos. Optimālais dzīvnieku vecums ir 1,5-5 gadi. Ir zināms, ka galvenās morfofunkcionālās izmaiņas suņiem toksikoloģisko pētījumu laikā lielā mērā atbilst cilvēkiem.

Eksperimenta apstākļos jāņem vērā, ka suņi ir bara dzīvnieki ar attīstītu hierarhisko sistēmu, seksuālām un individuālām temperamenta atšķirībām, tāpēc ieteicams suņus vienus ievietot atsevišķās kastēs. Suņi ir pietiekami viegli apgūstami, ko var izmantot dažās procedūrās, ierobežojot ierobežotāju izmantošanu.

Dzīvnieki tiek baroti atbilstoši izstrādātajām diētām un ņemot vērā eksperimenta mērķus. Tomēr jāatceras, ka suņu kuņģa-zarnu trakts nav pielāgots liela augu barības daudzuma sagremošanai.

3. AKŪTI, SUBAKŪTI UN HRONISKI TOKSIKOLOĢIJAS EKSPERIMENTI

Eksperimenta ilguma izvēli pētāmo vielu toksisko īpašību izpētē nosaka pētījuma mērķi (1. tabula).

Akūtu toksikoloģisku eksperimentu izmanto, lai simulētu vielas akūto toksicitāti, kas izpaužas pēc tās vienreizējas vai atkārtotas ievadīšanas īsos (ne vairāk kā 6 stundu) intervālos dienas laikā. Akūtās toksicitātes pētījuma mērķi ir noteikt nekaitīgās, toksiskās, letālās vielas devas, tās spēju uzkrāties, kā arī dzīvnieku nāves cēloņus.

Subakūts eksperiments tiek veikts, lai noteiktu pieļaujamos ekspozīcijas apstākļus, optimālās dienas devas, lai izvēlētos devas hroniskā eksperimentā.

Vielu toksisko īpašību izpēte subhroniskos un hroniskos eksperimentos tiek veikta, lai noteiktu to kaitīgās iedarbības pakāpi ilgstošas ​​lietošanas laikā, noteiktu to izraisīto bojājumu atgriezeniskuma līmeni, kā arī identificētu orgānus. un ķermeņa sistēmas, kas ir visjutīgākās pret toksisko iedarbību.

1. tabula Toksikoloģiskā eksperimenta ilgums un mērķi
Eksperimenta būtība	Ilgums	Eksperimenta mērķi
	Viena injekcija;	Nāvējošo devu, vidējā nāves laika, akūtas iedarbības sliekšņa noteikšana ķīmiskās vielas
Subakūts	2-8 nedēļas	Ķīmisko vielu kumulācijas, alerģiskās iedarbības, ietekmes uz reproduktīvo funkciju noteikšana
Subhronisks	13-18 nedēļas	Vispārējās toksiskās iedarbības sliekšņa devas noteikšana, nosakot vielu MPC gaisā
Hronisks	6-12 mēneši	Vispārējās toksiskās iedarbības sliekšņa devas noteikšana, nosakot vielu MPC ūdenī un pārtikā
Dzīve	1 gads vai vairāk	Ķīmisko vielu vispārējās toksiskās iedarbības sliekšņa devas noteikšana

4. TOKSISKO VIELU IEVADĪŠANAS METODES

Lai veidotu raksturīgas toksiski kondicionētas patoloģiskas izmaiņas dzīvniekiem, tiek izmantotas brīvprātīgas, daļēji brīvprātīgas un piespiedu toksisku vielu ievadīšanas metodes.

Dzīvnieku patērētās šķidruma vai sausās barības brīvprātīgu izvēli ietekmē individuālā jutība, vielas vielmaiņas ātrums, šķirne, vecums, turēšanas apstākļi, papildu stresa faktoru klātbūtne, šķīduma koncentrācija, pārtikas piedevu klātbūtne, utt. Šī metode nevar nodrošināt pietiekami lielas un stabilas toksisko vielu devas organismam, tāpēc efektīvāki ir daļēji brīvprātīgas un piespiedu ievadīšanas modeļi.

Ar daļēji brīvprātīgu metodi dzīvniekiem ir iespēja patstāvīgi regulēt patērētās vielas daudzumu. Tie jo īpaši ietver paņēmienu, kā nodrošināt pārbaudāmās vielas šķīdumu kā vienīgo šķidruma avotu.

Piespiedu ievadīšanas metodes nodrošina masīvu toksisku slodzi, kas izraisa augstu aģenta koncentrāciju asinīs un izraisa strauju patoloģisku izmaiņu attīstību.

Pētot ar toksicitāti saistītās patoloģijas, īpaša nozīme tiek piešķirta metodēm, kuras raksturo to toksisko vielu koncentrācijas modelēšana, kas rodas reālos apstākļos. Šie parametri, piemēram, atbilst etanola intragastrālās ievadīšanas metodei, kurā vidējās alkohola devas, ko dzīvnieki saņem eksperimenta laikā, parasti ir 4-10 g/kg dienā.

Vielu ievadīšanas inhalācijas metode ļauj radīt gandrīz jebkuru toksisku slodzi. Tajā pašā laikā toksisko vielu piespiedu pūšana caur sēklu kameru prasa ievērojamu ķīmisko sastāvdaļu patēriņu, un praktiski nav iespējams izveidot to pastāvīgu koncentrāciju. Akūtas saindēšanās modelēšanai piemērotāka ir esošā ķīmiskās vielas izliešanas metode kamerā, kurā atrodas dzīvnieki, tomēr ar šo metodi, strādājot ar vairākām vielām vienlaikus, kvantitatīvā toksikoloģiskā kontrole nav iespējama.

Visracionālākais, izmantojot inhalācijas ievadīšanas metodi, ir tāds, kurā piespiedu attīrīšanai caur sēklu kameru tiek izmantots tikai tīrs gaiss. Šajā gadījumā pētāmās vielas atrodas kameras iekšpusē mazos traukos, kuru atvērtās zonas laukums tiek izvēlēts pēc aprēķina. Nomainot traukus ar šaurākiem vai platākiem, iespējams mainīt ķīmisko savienojumu iztvaikošanas ātrumu, kuru daudzums tiek uzņemts tā, lai sēšanas beigās daļa to satura paliktu traukos. . Šī metode ir viegli lietojama, tai ir augsta jutība, ļauj precīzi izveidot nemainīgu koncentrāciju, ievērojami ietaupa izmantotās ķīmiskās vielas.

Ķīmiskā savienojuma koncentrāciju un devu izvēli izlemj, ņemot vērā eksperimenta mērķus un izmēģinājuma dzīvnieku fizioloģiskās īpašības. Jāatceras, ka injicējamo šķīdumu daudzumu ierobežo dzīvnieku fizioloģiskās iespējas, svars un vecums. Tādējādi maksimālais ievadīšanas apjoms žurkām ir intranazāli līdz 0,4 ml, rektāli - 1 ml, intradermāli - 0,04 ml, subkutāni - 10 ml, intramuskulāri un intraperitoneāli - līdz 5 ml, intravenozi - 6 ml, intrakardiāli - 1 ml, suboccipital - 0,15 ml, intragastrāli ar ķermeņa svaru 100-190 g - 3 ml, 200-290 g - 4-5 ml, 250-300 g - 6 ml, 300 g vai vairāk - 8 ml. Maksimālie vielu daudzumi suņiem ir intranazāli - 4 ml, subkutāni - 20 ml, intramuskulāri - 12 ml, intraperitoneāli - 20 ml.

Tajā pašā laikā vielu ievadīšana dzīvniekiem tiek veikta, ņemot vērā to anatomijas īpatnības, kā arī pētāmās vielas formu. Piemēram, pulverveida – ievada žurkām iekšķīgi, no šīs vielas un miltiem, maizes pagatavojot tabletes vai pievienojot ūdenim vai barībai.

Vielu šķīdumu ievadīšana tiek veikta iekšķīgi, izmantojot gumijas vai metāla zondi, intranazāli, izmantojot urīna katetru, rektāli. Ievadīšana caur ādu ietver iepriekšēju apmatojuma noņemšanu, iedobumu izveidošanu, pēc tam tiek uzklāta testējamā viela. Intradermālas injekcijas tiek veiktas muguras aizmugurē vai uz vēdera, pēc tamlīdzīgas matu noņemšanas. Subkutānas injekcijas veic uz kakla, muguras vai vēdera. Intramuskulāri vielas tiek ievadītas augšstilba kaula aizmugurējos muskuļos. Intraperitoneālās injekcijas tiek veiktas vēdera dobuma kreisajā apakšējā kvadrantā. Intravenozās vielas injicē astes vēnā vai dzimumlocekļa muguras vēnā. Vielu ievadīšana ir iespējama arī tieši sirdī vai suboccipital pre-anestezētām žurkām.

Toksisku vielu ievadīšana putniem tiek veikta intragastrāli, izmantojot zondi, intravenozi spārna kubitālajā vai brahiālajā vēnā, intraperitoneāli vēdera dobuma labajā apakšējā kvadrantā, subkutāni caur ādu uz vēdera vai intramuskulāri caur augšstilba četrgalvu. muskuļu.

Pārbaudāmo vielu ievadīšana suņiem tiek veikta, sajaucot tās ar barību, dzeramo ūdeni vai ar spēku, kad vielu tabletes veidā novieto uz dzīvnieka mēles aizmugures. Šķidrās vielas, kā arī šķīdumus ievada ar karoti vai šļirci, bet ērtāk ir lietot kuņģa zondi. Turklāt šķidro vielu ievadīšana ir iespējama intranazāli, izmantojot katetru, rektāli, subkutāni mugurā, augšstilbā vai pakausi, intradermāli, ādā, intramuskulāri - augšstilba muskuļos, intravenozi - kājas, pēdas vēnās, apakšdelms, intraperitoneāli. Ir suboccipitālās, intracerebrālās un intrakardiālās vielu ievadīšanas metodes, tomēr to ieviešana ir saistīta ar tehniskām grūtībām un pakļauj dzīvnieka dzīvību paaugstinātam apdraudējumam.

Lai samazinātu grūtības, kas rodas vielu toksisko īpašību eksperimentālajā izpētē, kas izpaužas neobjektivitātē devu izvēlē, to mainīgumā, tiek izmantota maztoksisku savienojumu toksicitātes eksperimentālās izpētes metode, ieviešot atbilstošas ​​devas. līdz maksimāli iespējamam ķīmisko savienojumu atšķaidījumam zināmos maksimālajos ievadītajos apjomos, ļaujot ātri izvēlēties maksimālo ievadīto devu uz kg (g) dzīvnieka svara, apstiprināt vai atspēkot pētīto vielu zemo toksicitāti, salīdzināt dažādu pētnieki savā starpā.

5. AKŪTAS UN HRONISKAS ALKOHOLA INTOKSIKCIJAS MODELĒŠANA

Pēdējos gadu desmitos veiktie socioloģiskie pētījumi liecina par nemainīgi augstu gan pārmērīgas alkohola lietošanas, gan alkoholisma un tā komplikāciju izplatību dažādās iedzīvotāju grupās. Tajā pašā laikā, veicot epidemioloģiskos pētījumus, daudzu sociālo faktoru ietekme neļauj pilnībā identificēt vēlamās atkarības no dažādu alkoholisma izpausmju gaitas. Tāpēc viens no veidiem, kā pētīt ar alkoholu saistīto patoloģiju klīniskajā narkoloģijā, ir modelēt akūtās un hroniskās alkohola intoksikācijas izpausmes laboratorijas dzīvniekiem.

Modelējot akūtu alkohola intoksikāciju, tiek izmantotas maksimālās pieļaujamās etanola devas. Šajā gadījumā tiek pētītas patoloģiskās izmaiņas, kas pavada akūtas saindēšanās attīstību līdz pat komai.

Hroniskas alkohola intoksikācijas modelēšana ļauj iegūt raksturīgas patoloģiskas izmaiņas, kas ir salīdzināmas ar tām, kas ir cilvēkiem ar ilgstošu alkohola lietošanu. Pielietojot metodes ar ilgstošu alkohola lietošanu, jāņem vērā vecuma faktors, jo etanola izvadīšanas ātrums no organisma palēninās līdz ar dzīvnieku novecošanos.

Vidējās etilspirta devas, ko dzīvnieki saņem hroniska eksperimenta laikā, ir atkarīgas no tā uzdevumiem un diapazona, piemēram, žurkām - no 4-10 g uz kg ķermeņa svara dienā, bet dažkārt tiek izmantotas maksimālās pieļaujamās devas - līdz pat 15-20 g / kg . Vispiemērotākās alkoholiskās visceropatoloģijas raksturīgo izpausmju modelēšanai žurkām ir devas 7 g/kg/dienā. 40% etanola, kas īpaši atbilst ? DL50, kas izraisa diezgan strauju tipisku iekšējo orgānu alkoholisko bojājumu attīstību hroniskas intoksikācijas procesā, bet nepavada dzīvnieku masveida nāvi. Hroniskā eksperimenta ilgums ir no 5 dienām līdz 4 gadiem, arī atkarībā no pētījuma mērķiem.

6. HRONISKĀS ALKOHOLA INTOKSIKĀCIJAS UN UZTURA NEPIETIEKAMĪBAS KOMBINĒTO IETEKMES MODELĒŠANA

Vairāki alkoholisma klīniskie sindromi ir saistīti ar nepietiekamu uzturu (jo īpaši ar vitamīnu un olbaltumvielu metabolismu) un izmaiņām ķermeņa uzturvielu stāvoklī. Tas ir saistīts ar faktu, ka ilgstošu alkohola intoksikāciju dažos gadījumos pavada nepietiekams uzturs, traucēta uzsūkšanās un svarīgāko uztura faktoru metabolisms.

Sakarā ar to, ka etanolam papildus augstajam kaloriju saturam nav uzturvērtības, sistemātiski lietojot alkoholiskos dzērienus, uztura struktūra krasi nelīdzsvaro, un bieži tiek novērots barības trūkums, kas līdzīgs deficītam bada laikā. . Olbaltumvielu metabolisma pārkāpums un vispārējs olbaltumvielu deficīts hroniskas alkohola intoksikācijas gadījumā diezgan pamatoti tiek uzskatīti par vienu no aplūkojamās patoloģijas izpausmēm. Atsevišķu olbaltumvielu uztura faktoru trūkums var izraisīt ievērojamus vitamīnu metabolisma traucējumus, kas savukārt noved pie iekšējo orgānu funkcionālās aktivitātes pasliktināšanās. Tā kā daži vitamīni selektīvi ietekmē viņu individuālās funkcijas, hroniska alkoholizācija šos traucējumus vēl vairāk padziļina. Turklāt ar vienlaicīgu vitamīnu un olbaltumvielu deficītu morfofunkcionālie parametri var atšķirties no atbilstošajiem izolētu barības nepietiekamības formu raksturlielumiem.

Pamatojoties uz iepriekš minētajiem datiem, mēs esam piedāvājuši hroniskas alkohola intoksikācijas un pārtikas deficīta kompleksās iedarbības modeli - B vitamīnus, kuriem ir svarīga loma ar alkoholu saistītās patoloģijās, un olbaltumvielas.

Modeļa izveides algoritms.

Algoritms hroniskas alkohola intoksikācijas eksperimentāla modeļa izveidei uz barības nelīdzsvarotības fona ietver šādas sastāvdaļas:

1. Laboratorijas dzīvnieku izvēle un to uzturēšanas nosacījumi

2. Eksperimentālo diētu izvēle, nepieciešamās etanola devas, ievadīšanas metode un eksperimenta ilgums.

3. Toksiskās iedarbības smaguma novērtējums.

Laboratorijas dzīvnieku izvēle un nosacījumi to uzturēšanai

Žurkas ir vēlams izmantot kā izmēģinājumu dzīvniekus ilgstošas ​​alkoholizācijas modelēšanai uz barības nelīdzsvarotības fona, ja visas pārējās lietas ir vienādas. Šāda veida laboratorijas dzīvnieku izvēle ir saistīta ar alkohola izraisīto izmaiņu salīdzināmību žurkām ar izmaiņām cilvēkiem, šo dzīvnieku morfofizioloģiskajām īpašībām (nav nepatikas pret etanolu un rīstīšanās refleksu pret tā darbību, pastāvīgu sārņu piepildījumu). kuņģis ar pārtiku), apkopes vienkāršība un dažādu procedūru veikšanas vieglums ar tiem (fiksācija, vielu šķīdumu ievadīšana, izmantojot zondi utt.).

Dzīvnieki jātur standarta vivārija apstākļos, un tiem jābūt brīvai piekļuvei pārtikai un ūdenim. Ņemot vērā vitamīnu uzņemšanas iespēju koprofāgijas laikā, žurkas tiek turētas būros ar rupju acu dibenu.

Eksperimentālo diētu izvēle, nepieciešamās etanola devas, tā ievadīšanas metode un eksperimenta ilgums

Lai veiktu vispilnīgāko pētījumu par B vitamīnu un olbaltumvielu deficīta komplekso iedarbību, dzīvniekus ieteicams iedalīt četrās darba grupās, kas saņem:

I - samazināts B vitamīnu saturs

II - samazināts olbaltumvielu saturs

III - samazināts olbaltumvielu un B vitamīnu saturs

IV - kontrole - atrodas parastajā vivārija uzturā.

Piemēram, diēta, kas praktiski novērš B6 vitamīna saturu, satur 18-20% no vitamīniem attīrīta kazeīna, 73-71% saharozes, 4% sāls maisījumu, 3% saulespuķu eļļas ar 0,2% zivju eļļas.

Veicot eksperimentu, kura mērķis ir modelēt noteiktu vitamīnu deficītu, ir jānodrošina, lai dzīvnieku vajadzības pēc citiem vitamīniem tiktu apmierinātas pēc iespējas precīzāk (2. tabula).

2. tabula Dienas vitamīnu devas, kas sedz žurku pamatvajadzības (saskaņā ar Yu.M. Ostrovski, 1979).
	Dienas deva, mcg
Pantotenāts
Piridoksīns
C vitamīns
Tokoferols

Saistībā ar dzīvnieku ķermeņa masas izmaiņām barība jāpielāgo saskaņā ar RSFSR Veselības ministrijas 1983. gada 10. 10. rīkojumu Nr. 1179 "Par laboratorijas barības izmaksu standartu apstiprināšanu". dzīvnieki veselības aprūpes iestādēs."

Olbaltumvielu deficīta modelēšana uzturā tiek veikta, turot laboratorijas dzīvniekus specializētā diētā, kas sastādīta pēc A.A. metodes. Pokrovskis u.c. (1974).

Hroniska eksperimenta ar žurkām apstākļos vispieņemamākā ir eksperimentālā diēta, kurā olbaltumvielu saturs ir 4,6 reizes mazāks nekā standarta diētā (3. tabula).

3. tabula Žurku ikdienas uzturs ar zemu olbaltumvielu saturu (pēc A. A. Pokrovska, 1974)
Sastāvdaļas		% pēc kalorijām
Pārtikas kazeīns
Tauku un saulespuķu eļļas maisījums 1:1
kukurūzas ciete

Lai sasniegtu vienādu kaloriju saturu starp standarta un eksperimentālo diētu, aprēķināto cietes daudzumu pievieno pēdējai.

Katrā grupā dzīvniekus iedala vismaz divās apakšgrupās:

Ikdienas 40% etanola šķīduma saņemšana caur metāla kuņģa zondi (ar ātrumu 7,0 g / kg svara).

Saņem līdzvērtīgu daudzumu destilēta ūdens.

Etanola un destilēta ūdens šķīduma ievadīšana tiek veikta katru dienu no rīta pirms barošanas.

Lai pētītu ar alkoholu saistītu patoloģiju žurkām, eksperimenta ilgums ir no 4 līdz 6 nedēļām.

Toksiskās iedarbības smaguma novērtējums

Lai adekvāti novērtētu ķimikāliju toksisko iedarbību, nepieciešama regulāra dzīvnieku uzraudzība, kuras laikā tiek konstatēts barības un ūdens patēriņš, ārējo pazīmju izmaiņas (mata līnija, redzamas gļotādas), uzvedības īpatnības. Vismaz reizi nedēļā, lai pētītu izmaiņu dinamiku, tiek veikta svēršana, tiek izmeklēts iekšējo orgānu un sistēmu funkcionālais stāvoklis, bioķīmiskās un morfoloģiskās izmaiņas asinīs. Orgānu un sistēmu stāvokļa novērtēšanas metodes tiek izvēlētas, ņemot vērā eksperimenta mērķus, taču tām jābūt mūsdienīgām un pietiekami jutīgām. Veicot pētījumu, ir jācenšas izmantot vispilnīgāko fizioloģisko, patomorfoloģisko, hematoloģisko un bioķīmisko testu komplektu gan integrālam stāvokļa novērtējumam, gan atsevišķu orgānu un sistēmu bojājuma pakāpes noteikšanai.

Patoloģisko izmaiņu smaguma pakāpe, kas reģistrēta dzīvniekiem, kuri pakļauti ilgstošai alkohola intoksikācijai uz barības nelīdzsvarotības fona, tiek noteikta, analizējot integrālo, bioķīmisko, hematoloģisko un patomorfoloģisko ainu. Lai veiktu iekšējo orgānu stāvokļa funkcionālo diagnostiku, tiek izmantotas instrumentālās metodes - EEG, EKG.

Integrētie rādītāji:

* ārējo pazīmju maiņa - tiek veikta 1 reizi 3 dienās pirms nākamās etanola vai destilēta ūdens injekcijas, novērtējot apmatojuma krāsas un matu līnijas izmaiņas pēc šādas shēmas (4. tabula):

4. tabula Žurku ārējo pazīmju izmaiņu mērogs
	Punkti vai simboli	Izmaiņu apraksts
		Matu izkrišana
		Piesārņots
		Nav piesārņots

*aktivitātes pakāpes izmaiņas - tiek novērtētas punktos 1 reizi 3 dienās pirms etanola sēklu vai ūdens slodzes pēc šādas shēmas (5. tabula)

*dzīvnieku ķermeņa svara izmaiņas - tiek reģistrētas, nosverot ik pēc 7 eksperimenta dienām pirms barības un etanola sēklu pievienošanas

* ikdienas ēdiena un ūdens uzņemšana; vielu izvadīšana.

Žurku aktivitātes izmaiņu skala toksikoloģiskajā eksperimentā

Punkti, simboli /+/	Darbības pakāpe	Darbības apraksts
		beigts dzīvnieks
	Koma (aktivitātes trūkums)	Sānu stāvoklis; nekustīgums; aktīvo kustību trūkums; muskuļi ir atslābināti; elpošana tiek pārtraukta; reakcijas uz sāpēm un taustes stimuliem, ieskaitot vokālos, praktiski nav.
	Vājš (minimums)	Pamatā - sānu pozīcija; patvaļīgas vājas aktīvas kustības; muskuļi ir atslābināti; gausa reakcija uz sāpēm un taustes stimuliem, balss - vāja.
	Pasīvs	Dzīvnieks ir bremzēts, aktīvi nepārvietojas pa būri, bet stumjot kustas vairākus soļus. Pozīcija ir dabiska - uz četrām ķepām; sajust muskuļu tonusu. "Izvairīga" aizsardzības reakcija uz stimuliem, balss reakcija ir vāja.
	Lēns (neparasti)	Pozīcija - uz četrām kājām, lēnas aktīvas kustības - ķermeņa pagriezieni un nelielas kustības ap būru, retas rīšanas kustības. Reakcija uz sāpēm un taustes stimuliem ir vokāla un "izvairīšanās-aizsardzības" ar mēģinājumiem iekost. Fiksējot ar roku uz ādas muguras zonā, tā savērpjas ar "atstāšanos" no eksperimentētāja.
	Normāls	Neskarta žurka. Pārvietojami; aktīvas kustības - kustība un "labākās vietas atrašana grupā"; "uzmanīga-gaidoša" poza ar nelielām sāpēm un taustes stimuliem ar izvairīšanos, asām vokālām un aktīvām-aizsardzības reakcijām, skrāpējošām un kodīgām kustībām. Laba apetīte; biežas "mazgāšanas" kustības ar ķepām.

Bioķīmiskie un hematoloģiskie parametri.

Tiek pētītas asins galveno bioķīmisko parametru izmaiņas un hematoloģisko parametru kopums, ko visvairāk ietekmē hroniska alkohola intoksikācija (6. tabula).

6. tabula Žurku bioķīmiskie un hematoloģiskie parametri toksikoloģiskajā eksperimentā
Pētījuma objekts	Izpētītie rādītāji
Serums	aspartātaminotransferāze, alanīna aminotransferāze, kreatinīna fosfokināze, gamma-glutamiltransferāze kopējais proteīns, olbaltumvielu frakcijas kreatinīns urīnviela
Veidoti asins elementi	sarkano asins šūnu skaits hematokrīts krāsu indikators retikulocītu skaits eritrocītu vidējais dzīves ilgums leikocītu formula

Histoloģiskā materiāla sagatavošana.

Hroniskas alkohola intoksikācijas galvenie "mērķorgāni" - sirds, aknas, nieres, smadzenes - tiek pakļauti histoloģiskai izmeklēšanai. Jāatceras, ka analīzes kvalitāte lielā mērā ir atkarīga no materiāla sagatavošanas, jo īpaši no pētāmo objektu fiksācijas. Fiksācijai ieteicams izmantot 10% formalīna šķīdumu vai Bouin šķīdumu. Šajā gadījumā priekšroka tiek dota Bouin šķīdumam, jo ​​šajā gadījumā daudz labāk atklājas ilgstošai alkohola intoksikācijai raksturīgās izmaiņas orgānu mikrostruktūrā, proti:

1) aknās - citoplazmas strukturitāte ir skaidrāk izsekota (vakuolizācija, "bruģakmens" - šūnu citoplazmas iekrāsošanās neviendabīgums lobulās), hemokapilāru centrālo vēnu asins piepildījuma izmaiņu pazīmes;

2) nierēs - kanāliņu epitēlija apvalka morfoloģijā citoplazmas struktūru neviendabīgums ir skaidrāk atspoguļots ar īpaši biežu apikālo daļu bojājumu;

3) plaušās - saistaudu interalveolārajās starpsienās daudz skaidrāk tiek konstatētas hipertrofētas šūnas ar gaišu citoplazmu, no kurām dažas kļūst poliploīdas. Biežāk ir izmaiņas alveolu epitēlijā, kuras šūnas tiek eksfoliētas alveolu lūmenā;

4) liesā - labāk izpaužas tīklveida šūnu struktūra, sarkanās celulozes deguna blakusdobumi, kur ir lielāka eritrocītu iznīcināšana.

Tādējādi ar alkoholu saistītās patoloģijas modeļa pielietošana uz barības nelīdzsvarotības fona ietver visplašāko iekšējo orgānu un sistēmu izmaiņu izpēti eksperimentālos apstākļos, kas ir salīdzināmi ar cilvēkiem, kuri lieto alkoholu. Patomorfoloģiskā attēla galveno integrālo, bioķīmisko, hematoloģisko parametru un pazīmju novērtēšanas sistēma ļauj kontrolēt patoloģisko izmaiņu raksturu un pakāpi visā pētījuma periodā.

LITERATŪRA

1. Bērziņa N.I. Putni eksperimentā // Laboratorijas dzīvnieki. - 1995. - V. - Nr.2. - P.99-113.

2. Dzīvnieku eksperimentu regulējums - ētika, likumdošana, alternatīvas. / Red. N. A. Gorbunova. - M., 1998. gads.

5. Myalenkova I.Yu. Laboratorijas suns // Laboratorijas dzīvnieki. - 1994. - IV. - Nr.4. – P.234-246

6. Nepieciešams V.P. Alkoholu saturošu šķidrumu un alkoholisko dzērienu toksicitātes novērtēšanas metodiskie aspekti // Toksikoloģijas biļetens. - 1999. - 4.nr. - C2-10.

7. Ostrovska Yu.M. Eksperimentālā vitaminoloģija. - Minska, 1979. - 450. gadi.

8. Pokrovskis A.A. et al., Par brīvo aminoskābju satura saistību audos un asins plazmā proteīna deficīta gadījumā eksperimentā // Uztura jautājumi - 1974. - Nr.1. - P.8-15.

9. Starptautiskās zinātnes komitejas prasības par laboratorijas dzīvnieku izmantošanu eksperimentālajos pētījumos // ICLAS Biļetens. - 1978. - Nr.24. - S. 4-5.

10. Shtefel V.O. Par iedarbības laiku, modelējot intoksikācijas toksikoloģiskajos un higiēniskajos pētījumos // Higiēna un sanitārija. - 1996. - Nr.8. - P.70-72.

11. Sos J et al., Diētas eksperimentiem ar dzīvniekiem. - Budapešta, 1974.

strāva

MUK 4.2.2939-11

METODISKIE NORĀDĪJUMI

4.2. KONTROLES METODES. BIOLOĢISKIE UN MIKROBIOLOĢISKIE FAKTORI

Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība teritoriālā, reģionālā un federālā līmeņa laboratorijām

Ieviešanas datums: no apstiprināšanas brīža

1. Izstrādāja Federālā valsts veselības aprūpes iestāde "Rospotrebnadzoras Krievijas Pētnieciskais pretmēra institūts "Mikrobs" (V.V. Kutyrevs, I.N. Šarova, N.A. Osina, E.S. Kazakova, E.A. Plotņikova, S. A. Piontkovska, T. D. V. Krasovska Utkins, S. A. Ščerbakova); M. V. Česnokova, A. V. Mazepa, S. A. Tatarņikovs); Rospotrebnadzoras federālā valsts veselības iestāde "Stavropoles pētniecības pret mēra institūts" (A. N. Kuļičenko, O. V. Maļecka, T. V. Tarans, A. P. Veselības štats, A.P. Rospotrebnadzoras institūcija "Volgogradas pētniecības pret mēra institūts" (V. V. Aleksejevs, A. V. Lipņickis, V. A. Antonovs, D. V. Viktorovs); Rospotrebnadzoras federālā valsts veselības aprūpes iestāde "Rostovas pie Donas Pētniecības pret mēra institūts" (Ņ.V. Pavlovičs, N.L. Pičurina, Ņ.V. Aronova, N.N. Onoprienko, M.V. Cimbalistova, A.S. Vodopjanovs); Rospotrebnadzor federālā valsts veselības aprūpes iestāde "Pretmēra centrs" (V.E. Bezsmertnijs, S.M. Ivanova); Rospotrebnadzoras federālā budžeta veselības aprūpes iestāde "Federālais higiēnas un epidemioloģijas centrs" (V.G. Seņņikova, M.V. Zaročencevs, V.V. Mordvinova); Rospotrebnadzoras federālā valsts zinātnes institūcija "Valsts lietišķās mikrobioloģijas un biotehnoloģijas zinātniskais centrs" (I.A. Djatlovs, A.N. Mokrievičs, S.F. Biketovs, M.V. Hramovs, Ņ.I. Luņeva); Veselības un sociālās attīstības ministrijas federālā valsts budžeta iestāde "GISK L.A. Taraseviča vārdā" (I.V. Borisevičs, L.V. Sajapina).

3. Apstiprināts ar Federālā patērētāju tiesību aizsardzības un cilvēku labklājības uzraudzības dienesta vadītāja, Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta G.G.Oņiščenko 2011.gada 14.jūliju.

1 izmantošanas joma

1 izmantošanas joma

1.1. Šīs vadlīnijas nosaka tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtību teritoriālā, reģionālā un federālā līmeņa laboratorijām, to mijiedarbības formas un metodes, pētījuma nomenklatūru un apjomu, prasības laboratorijām, speciālistiem un personālam, kas iesaistīts laboratorijā. studiju veikšanu, pētījumu loģistiku, darba bioloģisko drošību.

1.2. Šīs vadlīnijas ir paredzētas institūciju, kas veic tularēmijas valsts sanitāro un epidemioloģisko uzraudzību Krievijas Federācijā, ārstniecības-profilaktisko un pretmēra iestāžu bakterioloģisko laboratoriju speciālistiem.

2. Normatīvās atsauces

2.1. Federālais likums 03/3/1999 N 52-FZ "Par iedzīvotāju sanitāro un epidemioloģisko labklājību" .
______________
1999. gada 30. marta federālais likums N 52-FZ "Par iedzīvotāju sanitāro un epidemioloģisko labklājību" . - Datu bāzes ražotāja piezīme.

2.2. Krievijas Federācijas valdības 2007. gada 29. oktobra dekrēts N 720 * "Par grozījumiem noteikumos par licencēšanas darbībām, kas saistītas ar infekcijas slimību izraisītāju lietošanu" 5. punktā, kas apstiprināts ar Krievijas Federācijas valdības janvāra dekrētu 22, 2007 N 31 *.
________________
* Dokuments zaudēja spēku, pamatojoties uz Krievijas Federācijas valdības 2012. gada 16. aprīļa dekrētu N 317

2.3. Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta dekrēts, datēts ar 2009. gada 24. februāri N 11 "Par ārkārtas ziņojumu iesniegšanu par ārkārtas situācijām sanitārā un epidemioloģiskā rakstura sabiedrības veselības jomā" (reģistrēts LR Tieslietu ministrijā). Krievijas Federācijas 2009. gada 10. aprīlī N 13745).

2.4. Krievijas Federācijas Veselības un sociālās attīstības ministrijas 2009. gada 7. jūlija rīkojums N 415n "Par kvalifikācijas prasību apstiprināšanu speciālistiem ar augstāko un pēcdiploma medicīnisko un farmaceitisko izglītību veselības aprūpes jomā" (reģistrēts Tieslietu ministrijā Krievijas Federācija 2009. gada 9. jūlijā N 14292).

2.6. SP 1.2.036-95 "I-IV patogenitātes grupas mikroorganismu uzskaites, uzglabāšanas, pārvietošanas un transportēšanas kārtība" (apstiprināts ar Krievijas Federācijas Valsts sanitārās un epidemioloģiskās uzraudzības komitejas 1995. gada 28. augusta Rezolūciju N 14 ).

2.7. SP 3.1.7.2642-10 "Tularēmijas profilakse" (apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta 2010. gada 31. maija dekrētu N 61 "Par SP 3.1.7.2642-10 apstiprināšanu"). Reģistrēts ministrijā Krievijas Federācijas tiesnesis 2010. gada 7. jūlijā N 7745).

2.8. SP 1.3.1285-03 "Drošība darbā ar I-II patogenitātes (bīstamības) grupas mikroorganismiem" (apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta 2003. gada 15. aprīļa dekrētu N 42 "Par Sanitārie un epidemioloģiskie noteikumi SP 1.3.1285- 03" . Reģistrēts Krievijas Federācijas Tieslietu ministrijā 2003. gada 10. maijā N 4545).

2.9. SP 1.3.1318-03* "Kārtība, kādā izsniedz sanitāri epidemioloģisku slēdzienu par iespēju strādāt ar I-IV patogenitātes (bīstamības) grupas cilvēku infekcijas slimību patogēniem, ģenētiski modificētiem mikroorganismiem, bioloģiskas izcelsmes indēm un helmintiem" ( apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta 2003. gada 30. aprīļa lēmumu N 85 "Par sanitāro un epidemioloģisko noteikumu SP 1.2.1318-03 pieņemšanu". Reģistrēts Krievijas Federācijas Tieslietu ministrijā 2003. gada maijā 19, 2003, N 4558).
______________
*Iespējams, sākotnējā kļūda. Jālasa: SP 1.2.1318-03. - Datu bāzes ražotāja piezīme.

2.12. SP 3.4.2318-08 "Krievijas Federācijas teritorijas sanitārā aizsardzība" (apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta 2008. gada 22. janvāra dekrētu N 3 "Par sanitāro un epidemioloģisko noteikumu SP 3.4 apstiprināšanu" .2318-08" . Reģistrēts Krievijas Federācijas Tieslietu ministrijā 3.04 .2008 N 11459).

2.13. SanPiN 2.1.7.2790-10 "Sanitārās un epidemioloģiskās prasības medicīnisko atkritumu apstrādei" (apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta 2010. gada 9. decembra dekrētu N 163. Reģistrēts Krievijas Tieslietu ministrijā Federācija 2011. gada 17. februārī N 19871).

2.14. SanPiN 2.1.3.2630-10 "Sanitārās un epidemioloģiskās prasības organizācijām, kas nodarbojas ar medicīnisko darbību" (apstiprināts ar Krievijas Federācijas galvenā valsts sanitārā ārsta 2010. gada 18. maija dekrētu N 58. Reģistrēts Krievijas Tieslietu ministrijā Federācija 2010. gada 9. augustā N 18094).

2.15. Sanitārie noteikumi eksperimentālo bioloģisko klīniku (vivāriju) iekārtošanai, aprīkojumam un uzturēšanai (apstiprināti ar PSRS galvenā valsts sanitārā ārsta 1973. gada 6. aprīli N 1045-73).

2.16. MU 3.1.2007-05 "Tularēmijas epidemioloģiskā uzraudzība".

2.17. MU 3.3.2.2124-06 "Diagnostisko uzturvielu barotņu kontrole mēra, holēras, Sibīrijas mēra, tularēmijas patogēnu bioloģiskajiem indikatoriem".

2.18. MUK 4.2.2316-08 "Bakterioloģisko barotņu monitoringa metodes".

2.19. MU 1.3.2569-09 "Laboratoriju darba organizēšana, izmantojot nukleīnskābju amplifikācijas metodes, strādājot ar materiālu, kas satur I-IV patogenitātes grupas mikroorganismus".

2.20. MU 4.2.2495-09 "Bīstamu bakteriālu infekciju (mēra, Sibīrijas mēra, holēras, tularēmijas, brucelozes, ienkas un melioidozes) patogēnu jutības noteikšana pret antibakteriāliem līdzekļiem."

3. Saīsinājumu saraksts

LPS - lipopolisaharīds

MPU - ārstniecības un profilakses iestāde

OOI – īpaši bīstamas infekcijas

SP - sanitārie un epidemioloģiskie noteikumi

SanPiN - sanitārie un epidemioloģiskie noteikumi un noteikumi

MU - vadlīnijas

PBA - patogēns bioloģiskais aģents

MFA - fluorescējošu antivielu metode

ELISA - enzīmu imūntests

PCR - polimerāzes ķēdes reakcija

RA - aglutinācijas reakcija

RNGA - netiešās hemaglutinācijas reakcija

RTNGA - netiešās hemaglutinācijas inhibīcijas reakcijas

RNAt - antivielu neitralizācijas reakcija

MIS - magnoimmunosorbenti

RLA - lateksa aglutinācijas reakcija

IC - imūnhromatogrāfija

IC tests - imūnhromatogrāfiskais tests

4. Vispārīgie noteikumi

Slimības raksturojums un tularēmijas izraisītājs

Tularēmija ir zoonotiska sistēmiska dabiska fokāla bakteriāla infekcijas slimība, kurai raksturīgi vispārējas intoksikācijas simptomi, drudzis, iekaisuma izmaiņas infekcijas vārtu zonā, reģionālais limfadenīts un tendence uz ilgstošu gaitu.

Galvenie tularēmijas izraisītāja rezervuāri un avoti dabiskos apstākļos ir savvaļas dzīvnieki (ap 50 sugas), galvenokārt dažāda veida grauzēji un zaķi. Dabisko tularēmijas perēkļu teritorijā var inficēties aitas, cūkas un liellopi. Patogēna rezervuārs un nesēji ir arī asinssūcēji posmkāji: iksodīdu un gamasīdu ērces, odi, zirgu mušas, blusas. Slims cilvēks nerada epidemioloģiskas briesmas.

Tāpat kā visas zoonozes, tularēmiju raksturo daudzi mehānismi (aspirācija, kontakts, fekāli-orāls, transmisīvs), kā arī pārnešanas ceļi un faktori. Saskaņā ar Starptautisko statistisko slimību un saistīto veselības problēmu klasifikāciju (Desmitā redakcija. Ženēva, 2003, (ICD-10)) un pēc galvenā patoloģiskā procesa lokalizācijas izšķir šādas tularēmijas formas:

A21.0 - ulceroglandular (čūla-buboniska);

A21.1 - okulo-dziedzera (okulo-buboniska);

A21.2 - plaušu;

A21.3 - kuņģa-zarnu trakta (vēdera);

A21.7 - vispārināts;

A21.8 - citas tularēmijas formas (anginozā-buboniskā);

5.1.1. Prasības medicīnas iestāžu laboratorijām, kas veic tularēmijas izpēti

Medicīnas iestādēm, kuru laboratorijās veic diagnostiskos izmeklējumus tularēmijas noteikšanai, jābūt licencei tādu darbību veikšanai, kas saistītas ar III-IV patogenitātes (bīstamības) grupas patogēnu izmantošanu.

Veselības aprūpes iestāžu laboratorijām jābūt sanitāri epidemioloģiskam slēdzienam par iespēju strādāt ar III-IV patogenitātes (bīstamības) grupas mikroorganismiem saskaņā ar spēkā esošo SP par sanitāri epidemioloģiskā slēdziena izsniegšanas kārtību par iespēju strādāt ar patogēniem. I-IV patogenitātes (bīstamības) grupas cilvēku infekcijas slimībām), ģenētiski modificētiem mikroorganismiem, bioloģiskas izcelsmes indēm un helmintiem.

Izolētu holēras vibrio (aizdomīgo) kultūru uzskaite, uzglabāšana, pārvietošana un transportēšana jāveic saskaņā ar spēkā esošajiem normatīvajiem dokumentiem par I-IV patogenitātes grupas mikroorganismu uzskaites, uzglabāšanas, pārvietošanas un transportēšanas kārtību.



Veicot pētījumus visos posmos - paraugu ņemšana, uzglabāšana, piegāde laboratorijai, reģistrācija, izpētes procedūra, rezultātu izsniegšana, mijiedarbība ar Rospotrebnadzor iestādēm - jāatbilst spēkā esošo normatīvo un administratīvo dokumentu prasībām.



Tularēmijas testus var veikt speciālisti, kas nav jaunāki par 18 gadiem ar augstāko un vidējo medicīnisko, bioloģisko izglītību, kuri ir pabeiguši apmācības kursus specialitātē "Bakterioloģija" ar metožu izstrādi drošam darbam ar III infekcijas slimību patogēniem. -IV patogenitātes (bīstamības) grupas, kurām ir atļauja strādāt ar PBA III-IV patogenitātes grupu, pamatojoties uz iestādes vadītāja rīkojumu. Speciālistiem, kas veic tularēmijas diagnostiskos izmeklējumus, jābūt nepieciešamajām profesionālajām iemaņām saskaņā ar veikto izmeklējumu nomenklatūru (8.pielikums).

Speciālistiem, kas veic darbības, kas saistītas ar infekcijas slimību patogēnu lietošanu, vismaz reizi piecos gados jāpaaugstina kvalifikācija un jābūt speciālista sertifikātam.









Tularēmijas diagnostikas pētījumu kvalitātes kontrole veselības iestāžu laboratorijās ietver:












Dokumentācijas noteikumi





Lai iegūtu materiālu un veiktu tularēmijas diagnostiskos testus bakterioloģiskajās laboratorijās, veselības aprūpes iestādēs jābūt:





Personāls ir jānodrošina ar kombinezonu un individuālajiem aizsardzības līdzekļiem (klīniskā materiāla paraugu ņemšanai un imūnseroloģisko reakciju veikšanai).

5.1.2. Nomenklatūra un pētījumu apjoms

Klīniskās iestādes atlasa klīniskos materiālus no personām, kurām ir aizdomas par tularēmiju, pacientiem ar dažādām tularēmijas formām un vakcinētiem, kā arī sekciju materiālus no mirušām personām.

Veselības aprūpes iestāžu bakterioloģiskajās laboratorijās ar imunoseroloģiskām un alergoloģiskām metodēm tiek pārbaudīti asins serumi no tularēmijas pacientiem, kuri ir vakcinēti pret tularēmiju:

1) antivielu noteikšana sapārotos serumos;

2) leikocītu līzes reakcijas veikšana.

Veselības iestādes infektologs novērtē pacientu alergoloģisko stāvokli, inscenējot alerģisko testu ar tularīnu.

5.1.3. Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas kārtība medicīnas iestāžu laboratorijās

Klīniskā materiāla paraugu ņemšana un transportēšana

Materiālu no pacientiem ņem ārstniecības iestādes medicīnas darbinieki pēc pacienta uzņemšanas, pirms tiek uzsākta ārstēšana ar antibakteriāliem līdzekļiem. Paraugu ņemšanu veic divi medicīnas darbinieki, no kuriem viens ir infektologs vai ģimenes ārsts (ķirurgs), kas ir apmācīts īpaši bīstamu infekciju diagnostikā un bioloģiskās drošības prasību ievērošanā, strādājot ar klīnisko materiālu, kas satur aizdomas par infekcijas slimību patogēnu saturu. I-II patogenitātes grupas. Materiālu no vakcinētajām personām ņem veselības iestāžu medicīnas personāls

Sekcijas materiālu ņem patoloģisko un anatomisko nodaļu (vai BSME) medicīnas darbinieki īpaši bīstamu infekciju speciālista klātbūtnē, vadoties pēc pašreizējām metodiskajām vadlīnijām primāro pretepidēmijas pasākumu organizēšanai un īstenošanai atklāšanas gadījumos. pacientam (līķim), kuram ir aizdomas par infekcijas slimībām, kas izraisa ārkārtas situācijas iedzīvotāju sanitārās un epidemioloģiskās labklājības zonās, ievērojot reglamentētās bioloģiskās drošības prasības, strādājot ar I-II grupas patogēniem bioloģiskajiem aģentiem.

Lai nosūtītu uz Rospotrebnadzor iestāžu bakterioloģiskajām laboratorijām, viņi ņem:

no slimiem cilvēkiem atkarībā no slimības klīniskās formas: bubo saturs, materiāls no rīkles, no acs konjunktīvas, čūlas izdalījumi, krēpas, asinis;

no mirušiem cilvēkiem: palielināti limfmezgli, izmainītas plaušu un liesas zonas, traheja;

no vakcinētiem cilvēkiem: asinis.

Visu veidu materiālu paraugu ņemšana tiek veikta sterilos stikla vai plastmasas traukos, kas atbilst paraugu tilpumam.

Punktzīme no buboņem līdz 14-20 slimības dienām ar šļirci, kuras tilpums ir vismaz 5 ml. Āda punkcijai paredzētajā vietā tiek apstrādāta ar 70% spirtu, pēc tam ieeļļota ar 5% joda šķīdumu un vēlreiz noslaukta ar 70% spirtu. Adata tiek ievietota tā, lai tās gals sasniegtu bubo centrālo daļu, pēc tam, pavelkot virzuli līdz atteicei, adata tiek lēnām noņemta. Saturu pārnes sterilā mēģenē ar skrūvējamu vāciņu. Pirms materiāla ņemšanas var ievadīt bubo 0,3-0,5 ml sterila 0,9% nātrija hlorīda šķīduma un pēc tam atlasīt saturu. Kad bubo tiek atvērts, materiāls tiek ņemts atsevišķi no perifērās blīvās daļas un noņemamās fistulas.

Pirms ņemšanas noņemama čūla, papulas, pūslīši vai noslīpēta sēne ar pirmsinjekcijas dezinfekcijas salveti rūpīgi notīriet ādu ap skarto zonu, ja nepieciešams, noņemiet nekrotiskās masas un strutas ar sterilu marles salveti. Ritinot tamponu pa brūces virsmu no centra uz perifēriju, materiāls uzsūcas uz tampona 5-10 s. Tamponu ar materiālu ievieto mēģenē vai transportēšanas vidē. Lietojot šļirci, adata tiek ievietota pūslīša (pustulas) malā un pēc tam virzīta uz vidu. Čūlās tiek caurdurta blīva mala.

Flegma savākti īpašos traukos ar platu muti ar aizskrūvējamu vāku.

Noņemama rīkles gļotāda lietot tukšā dūšā vai 3-4 stundas pēc ēšanas. Viegli piespiežot mēli ar lāpstiņu, ievietojiet tamponu starp mandeļu velvēm un mēli (nepieskarieties ar tamponu lūpām, vaigiem, mēlei) un savāciet materiālu no rīkles aizmugures virsmas, mandeles un iekaisuma vai čūlas vietām. no gļotādas. Tamponu ar materiālu ievieto sterilā mēģenē vai mēģenē ar transportēšanas vai uzturvielu barotni.

Asinis pētījumiem tie tiek ņemti, ievērojot aseptikas noteikumus un individuālās aizsardzības pasākumus. Asinis no kubitālās vēnas ņem 10-20 ml apjomā ar vienreizējās lietošanas šļirci un pārnes mēģenē inokulācijai uz barības vielu barotnēm un biotesta dzīvnieku inficēšanai, mēģenē ar antikoagulantu (4% nātrija citrāta šķīdums attiecība 1:10 pret asins tilpumu vai 6% EDTA šķīdums attiecībā 1:20 pret asins tilpumu) PCR analīzei, mēģenē, lai iegūtu serumu imūnseroloģiskām reakcijām.

Lai izveidotu asins pilienu aglutinācijas reakciju un leikocitolīzes reakciju, asinis ņem no pirksta.

Acs konjunktīvas izdalīšanās jālieto līdz 17. slimības dienai, izmantojot sterilu tamponu, kas iepriekš samitrināts ar 0,9% nātrija hlorīda šķīdumu. Paraugus no katras acs savāc ar atsevišķiem tamponiem ar divām vai trim apļveida kustībām pa acs gļotādu. Tamponu ar materiālu ievieto sterilā mēģenē vai transportēšanas vidē. Ja ir bagātīgi strutaini izdalījumi ar sterilu sausu vates tamponu, no apakšējā plakstiņa iekšējās virsmas tiek izņemtas strutas, virzoties uz plaukstas plaisas iekšējo stūri. Jānodrošina, lai skropstas nepieskartos tamponam (ar roku turiet plakstiņu). Materiāla piegāde laboratorijā 1 stundas laikā, ja tiek izmantoti speciāli transportēšanas līdzekļi - dienas laikā.

Konteineri ar paraugiem ir marķēti, no ārpuses apstrādāti ar dezinfekcijas šķīdumu, iepakoti plastmasas maisiņā ar rāvējslēdzēju un ievietoti konteinerā bioloģiskā materiāla transportēšanai izpētei. Konteiners ar iepakotu materiālu tiek aizzīmogots un nosūtīts uz laboratoriju ar kurjeru ar speciāli tam paredzētu transportu. Galda virsmu pēc paraugu iepakošanas apstrādā ar dezinfekcijas šķīdumu.

Par paraugiem, kas nogādāti laboratorijā, aizpilda norādi (1.pielikums), kurā norāda: iestādes adresi, uz kuru nosūtīts paraugs (paraugi); pacienta (mirušā) uzvārds, vārds, uzvārds; dzimums, vecums, dzīvesvieta, slimības datums, medicīniskās palīdzības meklēšanas datums, hospitalizācijas datums, provizoriskā diagnoze; epidemioloģiskās vēstures iezīmes; vai pacientam tika veikta antibakteriālā terapija pirms materiāla uzņemšanas (kad, kādas zāles lietotas, kādā devā); bakterioloģiskai izmeklēšanai ņemtā materiāla veids; pētījuma mērķis; materiāla savākšanas datums un stunda; adrese, uz kuru jāpaziņo bakterioloģiskās izmeklēšanas rezultāti; iestādes nosaukums, amats, paraugu (paraugus) sūtītāja uzvārds un iniciāļi, paraksts; parauga piegādes laiks; paraugu ņēmējas amats, uzvārds un iniciāļi.

Materiāls tiek transportēts uz laboratoriju aukstuma maisā. Ja nav apstākļu materiāla uzglabāšanai aukstumā, laiks no materiāla ņemšanas brīža līdz pētījuma sākumam nedrīkst pārsniegt 5-6 stundas.



Imunoseroloģisko reakciju iestatīšana un reģistrēšana tiek veikta veselības iestādes bakterioloģiskajā laboratorijā saskaņā ar diagnostikas preparātu lietošanas instrukcijām. Slimības dinamikā pāru serumus pārbauda ar 7-10 dienu intervālu. Diagnostiski ticams ir antivielu titra pieaugums 4 reizes vai vairāk.

Paaugstināto jutību slimiem un vakcinētiem indivīdiem nosaka in vitro

Alerģijas testa ar tularīnu (tularēmijas šķidrais alergēns, suspensija ādas skarifikācijas uzklāšanai) rezultātu formulēšanu un reģistrēšanu personām, kuras ir inficētas vai ir aizdomas par inficēšanos ar tularēmiju, veic infektologs veselības aprūpes iestādē saskaņā ar Regulas Nr. norādījumi par zāļu lietošanu.

Jāatceras, ka alerģiskais tests paliek pozitīvs cilvēkiem, kuriem ir bijusi tularēmija.

5.1.4. Pētījumu rezultātu reģistrācija

Serumu seroloģiskās un alerģiskās pārbaudes rezultātu uzskaite tularēmijas noteikšanai veselības aprūpes iestāžu bakterioloģiskajās laboratorijās tiek veikta saskaņā ar iestādē noteiktajām uzskaites veidlapām. Atbilžu izsniegšana slimības vēsturēm - pēc vienotām veidlapām.

5.1.5. Procedūra medicīnas iestāžu mijiedarbībai ar Rospotrebnadzor organizācijām

5.2. Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiālēm pašvaldībā (pilsēta un subjekta administratīvie rajoni, kas apvienoti teritoriāli) Krievijas Federācijas pakļautībā.

5.2.1. Prasības FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijām Krievijas Federācijas veidojošās vienības pašvaldībā, kas veic tularēmijas izpēti

Atļauju un normatīvo dokumentu pieejamība

FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centrs" Krievijas Federācijas veidojošā vienībā, uz kuras filiālēm darbojas bakterioloģiskās laboratorijas, ir jābūt licencei, lai veiktu darbības, kas saistītas ar II-IV (vai III-IV) patogēnu izmantošanu. ) patogenitātes (bīstamības) grupas.

FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijām Krievijas Federācijas veidojošās vienības pašvaldībā, kas veic tularēmijas izpēti, jābūt sanitāri epidemioloģiskam slēdzienam par iespēju strādāt ar III-IV grupas mikroorganismiem. patogenitāte (bīstamība) saskaņā ar spēkā esošo SP par sanitāri epidemioloģiskā slēdziena izsniegšanas kārtību par iespēju strādāt ar I-IV patogenitātes (bīstamības) grupas cilvēku infekcijas slimību patogēniem, ģenētiski modificētiem mikroorganismiem, bioloģiskas izcelsmes indēm un helmintiem. .

FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijām Krievijas Federācijas veidojošās vienības pašvaldībā jābūt akreditētām tehniskajai kompetencei noteiktajā kārtībā saskaņā ar pašreizējo Krievijas Federācijas tiesisko regulējumu.

Klīniskā materiāla paraugu uzskaite, uzglabāšana, nodošana un transportēšana jāveic saskaņā ar spēkā esošo SP par I-IV patogenitātes grupas mikroorganismu uzskaites, uzglabāšanas, pārvietošanas un transportēšanas kārtību.

Atkritumu apglabāšana jāveic saskaņā ar spēkā esošajām sanitārajām un epidemioloģiskajām prasībām medicīnisko atkritumu apstrādē.



Prasības speciālistiem un personālam, kas iesaistīts tularēmijas pētījumu veikšanā

Tularēmijas testus var veikt speciālisti, kas nav jaunāki par 18 gadiem ar augstāko un vidējo medicīnisko, bioloģisko izglītību, kuri ir pabeiguši apmācības kursus specialitātē "Bakterioloģija" ar metožu izstrādi drošam darbam ar III infekcijas slimību patogēniem. -IV patogenitātes (bīstamības) grupas, kurām ir atļauja darbam ar PBA III-IV grupām, pamatojoties uz iestādes vadītāja rīkojumu. Speciālistiem, kas veic tularēmijas diagnostiskos izmeklējumus, jābūt nepieciešamajām profesionālajām iemaņām saskaņā ar veikto izmeklējumu nomenklatūru (8.pielikums).

Speciālistiem, kas veic darbības, kas saistītas ar infekcijas slimību patogēnu izmantošanu, jābūt speciālista sertifikātam un jāpaaugstina kvalifikācija ne retāk kā reizi piecos gados.

Prasības personāla drošības nodrošināšanai

Katrā laboratorijā, kas veic tularēmijas izmeklējumus, jābūt dokumentu paketei, kas nosaka drošu darba režīmu darbiniekiem, ņemot vērā darba raksturu, tehnoloģiju īpatnības, mikroorganismu īpašības. Dokumenti jāsaskaņo ar bioloģiskās drošības prasību ievērošanas uzraudzības komisiju, darba aizsardzības speciālistiem, ugunsdrošības pasākumiem un jāsaskaņo ar iestādes vadītāju. Personāla drošības noteikumu zināšanu pārbaudes rezultāti darba laikā tiek ierakstīti īpašā žurnālā.

Visiem darbiniekiem ir jāievēro drošības nodrošināšanas prasības darbā ar materiālu, kas ir aizdomīgs vai inficēts ar III-IV patogenitātes (bīstamības) grupas infekcijas slimību patogēniem, saskaņā ar spēkā esošajiem normatīvajiem dokumentiem.

Enzootiskās teritorijas epizootiskajā izmeklēšanā iesaistītās iestādes darbiniekiem jāveic vakcinācija pret tularēmiju, kam seko imunitātes līmeņa kontrole un rezultātu fiksēšana speciālā žurnālā.

Laboratorisko izmeklējumu iekšējās kvalitātes kontroles organizēšanas kārtība

Tularēmijas diagnostikas testu kvalitātes kontrole laboratorijās ietver:

diagnostikas preparātu un testēšanas sistēmu, destilēta ūdens, ķīmisko reaģentu un dezinfekcijas līdzekļu kvalitātes kontrole;

savlaicīga mērīšanas līdzekļu verifikācija, pārbaudes iekārtu sertifikācija;

laboratorijas stikla trauku sterilizācijas kvalitātes kontrole;

tvaika un sausā gaisa sterilizatoru darbības kontrole;

baktericīdo lampu darbības kontrole;

ledusskapju temperatūras kontrole;

termostatu temperatūras kontrole;

rūpniecisko telpu un boksu gaisa stāvokļa, temperatūras, mitruma pārbaude;

telpu sanitārā stāvokļa pārbaude, tai skaitā tīrīšanas, dezinfekcijas, noskalošanas no virsmām un aprīkojuma kontrole.

Kontroles rezultāti tiek ierakstīti īpašos žurnālos.

Dokumentācijas noteikumi

Laboratorijas dokumentācijas, tajā skaitā uzskaites un darba žurnālu, uzturēšana tiek veikta saskaņā ar spēkā esošo normatīvo un metodisko dokumentu prasībām.

Prasības materiālajiem resursiem, kas nepieciešami tularēmijas diagnostisko izmeklējumu veikšanai

Lai veiktu tularēmijas diagnostiskos izmeklējumus Higiēnas un epidemioloģijas centra filiāļu bakterioloģiskajās laboratorijās, jābūt pieejamam:

noteiktajā kārtībā reģistrēti diagnostikas preparāti, testu sistēmas (3.pielikums);

ķīmiskie reaģenti (4. pielikums);

ierīces, iekārtas, palīgmateriāli (5., 6. pielikums).

Ieteicams līdzi ņemt medicīnisko komplektu materiāla paņemšanai (universāls iepakojums materiāla paņemšanai no cilvēkiem un no vides objektiem īpaši bīstamu infekcijas slimību pārbaudei).

Personāls ir jānodrošina ar kombinezonu un individuālajiem aizsardzības līdzekļiem.

5.2.2. Nomenklatūra un pētījumu apjoms

FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijas Krievijas Federācijas veidojošās vienības pašvaldībās, veicot epidemioloģisko uzraudzību, uzrauga prettularēmijas imunitātes stāvokli vakcinētiem cilvēkiem.

Pētījumi tiek veikti šādā apjomā:

1) antivielu noteikšana;

2) leikocītu līzes reakcijas inscenēšana.

Ja veselības aprūpes iestādes laboratorija neveic seroloģiskos izmeklējumus tularēmijas noteikšanai, pacientiem vai tiem, kam ir aizdomas par šo slimību, serumu izmeklē FBUZ filiālē "Higiēnas un epidemioloģijas centrs" Krievijas Federācijas priekšmetā (līdz plkst. vienošanās).

5.2.3. Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas procedūra FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijās Krievijas Federācijas veidojošās vienības pašvaldībā

Vakcinēto cilvēku imunitātes stāvoklis tiek pārbaudīts 5 gadus pēc vakcinācijas un pēc tam - 1 reizi 2 gados.

Antitularēmijas imunitātes stāvokļa kontrole tiek veikta, izmantojot alergoloģisko (leikocitolīzes reakciju) vai kādu no seroloģiskās izpētes metodēm (RA, volumetriskās aglomerācijas reakcija, RNHA, ELISA). Šajā gadījumā vēlams izmantot seroloģiskās izpētes metodes. Pētījuma materiāls ir vakcinētā asinis un asins serums. Ja nepieciešams, varat izmantot asins pilienu reakciju, kas ļauj sniegt atbildi 5 minūšu laikā un var tikt piegādāta ar sausu asins pilienu.

No pacientiem vai personām, kurām ir aizdomas par tularēmiju slimības dinamikā, pāru serumus pārbauda ar 7-10 dienu intervālu. Diagnostiski ticams ir antivielu titra pieaugums 4 reizes vai vairāk.

Paaugstinātu jutību vakcinētiem un slimiem indivīdiem nosaka in vitro leikocitolīzes reakcijā saskaņā ar pašreizējām tularēmijas epidemioloģiskās uzraudzības vadlīnijām.

5.2.4. Pētījumu rezultātu reģistrācija

Pētījumu rezultātu reģistrēšana FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijās Krievijas Federācijas veidojošā vienībā tiek veikta saskaņā ar iestādē noteiktajām uzskaites veidlapām. Atbilžu izsniegšana - pēc vienotām veidlapām.

5.2.5. FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu mijiedarbības kārtība Krievijas Federācijas veidojošās vienības pašvaldībā ar citām Rospotrebnadzor organizācijām

Informācija par tularēmijas laboratoriskās diagnostikas rezultātiem FBUZ Higiēnas un epidemioloģijas centra filiāles laboratorijā Krievijas Federācijas sastāvā tiek nosūtīta saskaņā ar spēkā esošajiem normatīvajiem dokumentiem.

5.3. Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centram" Krievijas Federācijas sastāvā.

5.3.1. Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centrs" Krievijas Federācijas pakļautībā, kura struktūrā nav īpaši bīstamu infekciju departamentu un laboratoriju.

Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" laboratorijām Krievijas Federācijas veidojošajās vienībās, kuru struktūrā nav īpaši bīstamu infekciju departamentu vai laboratoriju, atbilst Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" filiāļu laboratorijām Krievijas Federācijas sastāvā (5.2. sadaļa).

5.3.2. Tularēmijas laboratoriskās diagnostikas organizēšanas un veikšanas kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" īpaši bīstamu infekciju laboratorijām Krievijas Federācijas priekšmetā

5.3.2.1. Prasības īpaši bīstamu infekciju laboratorijām FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centrs" Krievijas Federācijas priekšmetā, veicot pētījumus par tularēmiju.

Atļauju un normatīvo dokumentu pieejamība

FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centrs" Krievijas Federācijas priekšmetā, uz kura pamata darbojas īpaši bīstamu infekciju laboratorijas, kas veic tularēmijas izpēti, ir jābūt licencei, lai veiktu darbības, kas saistītas ar II-slimību patogēnu izmantošanu. IV patogenitātes (bīstamības) grupas.

OOI FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centrs" laboratorijām Krievijas Federācijas veidojošā vienībā, kas veic tularēmijas izpēti, ir jābūt sanitāri epidemioloģiskam slēdzienam par iespēju strādāt ar II-IV patogenitātes (bīstamības) grupas mikroorganismiem. saskaņā ar spēkā esošo SP par sanitāro un epidemioloģisko slēdzienu izsniegšanas kārtību par iespējām strādāt ar I-IV patogenitātes (bīstamības) grupas cilvēku infekcijas slimību ierosinātājiem, ģenētiski modificētiem mikroorganismiem, bioloģiskas izcelsmes indēm un helmintiem.

FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" laboratorijām Krievijas Federācijas veidojošā vienībā jābūt akreditētām tehniskajai kompetencei noteiktajā kārtībā saskaņā ar pašreizējo Krievijas Federācijas tiesisko regulējumu.

Izolētu tularēmijas izraisītāja aizdomīgu kultūru un/vai klīniskā materiāla paraugu uzskaite, uzglabāšana, pārvietošana un transportēšana jāveic saskaņā ar spēkā esošo SP par patogēnu grupu mikroorganismu reģistrēšanas, uzglabāšanas, pārvietošanas un transportēšanas kārtību. I-IV.

Atkritumu apglabāšana jāveic saskaņā ar reglamentētajām sanitārajām un epidemioloģiskajām prasībām medicīnisko atkritumu apstrādei.

Veicot pētījumus visos posmos: paraugu ņemšana, uzglabāšana, piegāde laboratorijai, reģistrācija, izpētes procedūra, rezultātu izsniegšana, mijiedarbība ar Rospotrebnadzor organizācijām ir jāatbilst spēkā esošo normatīvo dokumentu prasībām.

Prasības speciālistiem un personālam, kas iesaistīts tularēmijas pētījumu veikšanā

Tularēmijas pētījumus var veikt speciālisti ne jaunāki par 18 gadiem ar augstāko un vidējo medicīnisko, bioloģisko izglītību, kuri ir apguvuši apmācības kursus specialitātē "Bakterioloģija" ar droša darba ar I grupas patogēniem bioloģiskajiem aģentiem (PBA) pamatiem. -II, kuriem ir atļauja strādāt ar PBA II - IV grupām, pamatojoties uz iestādes vadītāja rīkojumu. Speciālistiem, kas veic tularēmijas izpēti, jābūt nepieciešamajām profesionālajām iemaņām (8.pielikums).

Speciālistiem, kas veic darbības, kas saistītas ar infekcijas slimību patogēnu izmantošanu, jābūt sertifikātiem un jāpilnveido prasmes ne retāk kā reizi piecos gados.

Prasības personāla drošības nodrošināšanai

Katrā laboratorijā, kas veic tularēmijas pētījumus, jābūt dokumentu paketei, kas nosaka drošu darba režīmu darbiniekiem, ņemot vērā darba raksturu, tehnoloģiju īpatnības, mikroorganismu īpašības. Dokumenti jāsaskaņo ar bioloģiskās drošības prasību ievērošanas uzraudzības komisiju, darba aizsardzības speciālistiem, ugunsdrošības pasākumiem un jāsaskaņo ar iestādes vadītāju. Personāla drošības noteikumu zināšanu pārbaudes rezultāti darba laikā tiek ierakstīti īpašā žurnālā.

Speciālistiem, kuri veic tularēmijas enzootiskās teritorijas epizootoloģisko izmeklēšanu un tās laboratorisko atbalstu, jāvakcinē pret tularēmiju, kam seko imunitātes līmeņa kontrole un rezultātu ierakstīšana speciālā žurnālā.

Visiem darbiniekiem ir jāievēro drošības nodrošināšanas prasības darbā ar materiālu, kas ir aizdomīgs vai inficēts ar I-II patogenitātes (bīstamības) grupas infekcijas slimību patogēniem, saskaņā ar spēkā esošajiem normatīvajiem dokumentiem.

Laboratorisko izmeklējumu iekšējās kvalitātes kontroles organizēšanas kārtība

Tularēmijas diagnostikas pētījumu kvalitātes kontrole OOI FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" laboratorijās ietver:

uzturvielu barotņu, diagnostikas preparātu un testēšanas sistēmu, disku ar antibakteriāliem preparātiem, destilēta ūdens, ķīmisko reaģentu un dezinfekcijas līdzekļu kvalitātes kontrole;

savlaicīga mērīšanas līdzekļu verifikācija, pārbaudes iekārtu sertifikācija;

laboratorijas stikla trauku sterilizācijas kvalitātes kontrole;

tvaika un sausā gaisa sterilizatoru darbības kontrole;

baktericīdo lampu darbības kontrole;

ledusskapju temperatūras kontrole;

termostatu temperatūras kontrole;

rūpniecisko telpu un boksu gaisa stāvokļa, temperatūras, mitruma pārbaude;

telpu sanitārā stāvokļa pārbaude, tai skaitā tīrīšanas, dezinfekcijas, noskalošanas no virsmām un aprīkojuma kontrole.

Kontroles rezultāti tiek ierakstīti īpašos žurnālos.

Dokumentācijas noteikumi

Laboratorijas dokumentācijas, tajā skaitā uzskaites un darba žurnālu, uzturēšana tiek veikta katru dienu atbilstoši aktuālo metodisko dokumentu prasībām.

Prasības materiālajiem resursiem, kas nepieciešami tularēmijas diagnostisko izmeklējumu veikšanai

Lai veiktu tularēmijas diagnostikas testus, laboratorijām jābūt:

noteiktajā kārtībā reģistrētas uzturvielu barotnes (2.pielikums);

noteiktajā kārtībā reģistrēti diagnostikas preparāti, testu sistēmas, antibakteriālie preparāti (3., 7. pielikums);

ķīmiskie reaģenti (4. pielikums);

instrumenti, iekārtas, palīgmateriāli (5., 6. pielikums);

medicīnas komplekts (universāls iepakojums materiālu paņemšanai no cilvēkiem un vides objektiem īpaši bīstamu infekcijas slimību izpētei).

Uzturvielu barotnes ir pakļautas obligātai kontrolei saskaņā ar spēkā esošajām vadlīnijām diagnostisko barotņu kontrolei bioloģiskajiem rādītājiem (tularēmijas izraisītājam).

5.3.2.2. Nomenklatūra un pētījumu apjoms.

OOI FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" laboratorijas Krievijas Federācijas veidojošajās vienībās veic:

materiālu izpēte no pacientiem un mirušiem ar aizdomām par tularēmiju;

materiālu izpēte no personām, kuras pakļautas tularēmijas pārbaudei atbilstoši epidemioloģiskās uzraudzības prasībām (pēc vienošanās);

teritorijas epizootoloģiskās izpētes laikā savākto paraugu izpēte;

vides objektu paraugu izpēte;

tularēmijas izraisītāja izolētu kultūru identificēšana saskaņā ar saīsinātu shēmu;

uzturvielu barotnes kvalitātes kontrole un inhibējošās īpašības.

Materiāla diagnostikas pētījumi tiek veikti šādā apjomā:

a) patogēna noteikšana native materiālā ar ekspress un paātrinātas diagnostikas metodēm (MFA, PCR, ELISA, RA, RNHA, RNAb, selektīva koncentrācija uz MIS, kam seko ELISA);

b) bioloģiskā parauga izveidošana;

c) sēšana uz barotnes, lai izolētu patogēna tīrkultūru;

d) antivielu noteikšana pret tularēmijas izraisītāju;

e) atlasītās kultūras identifikācija saskaņā ar samazināto shēmu.

5.3.2.3. Tularēmijas diagnostikas pētījumu kārtība FBUZ "Higiēnas un epidemioloģijas centra" īpaši bīstamo infekciju laboratorijās Krievijas Federācijas priekšmetā.

Klīniskā materiāla izpētes procedūra

Materiāla atlasi veic saskaņā ar 5.1.

Lai identificētu tularēmijas izraisītāju, tiek izmantoti diagnostikas preparāti un kompleksās agara vai dzeltenuma barotnes, pievienojot cisteīnu, audu ekstraktus, defibrinētas asinis, glikozi, kas reģistrēti noteiktajā kārtībā. Katrai agara partijai ir jāpārbauda jutība pret tularēmijas mikrobu augšanu saskaņā ar spēkā esošajiem normatīvajiem un metodiskajiem dokumentiem. Lai nomāktu svešas mikrofloras augšanu, penicilīns (100 vienības/ml), ampicilīns (100 vienības/ml), polimiksīns B (50-100 µg/ml), kefzols (vai cefaleksīns), amfotericīns B (vai amfoglukamīns), ristomicīna sulfāts. tiek lietotas.un dažas citas antibakteriālas zāles.

Objektus ar kultūraugiem inkubē 37 °C temperatūrā. Sējumus apskata pēc 24-48 stundām (turpmāk - katru dienu 10 dienas no sēšanas brīža).

Paraugu sagatavošana PCR tiek veikta saskaņā ar vadlīniju prasībām laboratoriju darba organizēšanai, izmantojot nukleīnskābju amplifikācijas metodes, strādājot ar materiālu, kas satur I-IV patogenitātes grupas mikroorganismus.

Materiāla pārbaude no slima cilvēka (līķa)

I posms:

uztriepes sagatavošana, fiksēto uztriepes krāsošana pēc Grama, Romanovska-Giemsa, fluorescējošiem tularēmijas imūnglobulīniem;

PCR iestatīšana;

imūnseroloģisko reakciju noteikšana, lai noteiktu antigēnus un antivielas pret tularēmijas izraisītāju (RA, MFA, RNGA, RNAt, ELISA utt.);

Leikocitolīzes (pacienta asiņu) reakcijas noteikšana;

bioloģisko testu dzīvnieku infekcija (jūrascūciņas intraperitoneāli; baltās peles intraperitoneāli vai subkutāni (asinis, bubo punctate), subkutāni (krēpas, rīkles uztriepe, atvērts bubo, čūlas izdalījumi, konjunktīva);

sēšana uz blīvām barības vielu barotnēm (asinis, bubo punctate);

sēšana uz cietām barotnēm ar svešas floras inhibitoriem (krēpas, rīkles tampons, substrāts no atvērta bubo, izdalījumi no čūlas, konjunktīvas).

II posms(2-6 stundas no pētījuma sākuma):

MFA, ELISA, PCR rezultātu uzskaite;

RA, RPGA un RNAt rezultātu uzskaite pēc 18-24 stundām;

izdošanu provizoriska pozitīva atbilde pamatojoties uz nelielu kokosveida nūjiņu klātbūtni uztriepes ar gramnegatīvu vai ceriņu krāsu, krāsojot pēc Romanovska-Giemsa, to specifisko luminiscenci, krāsojot ar fluorescējošiem tularēmijas imūnglobulīniem, pozitīvu PCR rezultātu, pozitīvas imūnseroloģiskās reakcijas ar negatīvām kontrolēm.

III posms(48-72 stundas no pētījuma sākuma):

vietējā materiāla kultūru apskate agara plāksnēs;

aizdomīgu koloniju uztriepes bakterioskopija (Grama traips);

IC testa izveide tularēmijas mikroba ekspresai identificēšanai ar materiālu no aizdomīgām kolonijām;

aizdomīgu tularēmijas mikrobu koloniju skrīnings uz uzturvielu agara, lai izolētu tīrkultūru;

izdošanu provizoriskas pozitīvas atbildes apstiprinājums pamatojoties uz raksturīgu augšanu uz blīvām barotnēm, nelielu gramnegatīvu kokosu nūjiņu klātbūtni koloniju uztriepēs, pozitīvu IC testu tularēmijas mikroba ātrai identificēšanai.

IV posms(3-5 dienas no pētījuma sākuma):

pēc tīrkultūras uzkrāšanās, nosakot testus tās identificēšanai. Izolētās kultūras identifikāciju veic saskaņā ar šādiem testiem:

šūnu morfoloģija, Grama traipa raksturs un fluorescējošie tularēmijas imūnglobulīni;

augšanas raksturs FT-arape barotnē vai McCoy's salocītā dzeltenuma barotnē;

augšanas trūkums uz vienkāršām uzturvielu barotnēm (gaļas peptona agars un/vai buljons);

kultūru aglutinācija ar specifisku tularēmijas serumu vai RLA ar izolētu kultūru;

izteikt tularēmijas mikroba identifikāciju, izmantojot IC testu;

sugai raksturīgo DNS mērķu noteikšana ar PCR;

mirušo biotesta dzīvnieku autopsija, orgānu un asiņu inokulācija uz cietām barotnēm, orgānu uztriepes-nospiedumu sagatavošana un izmeklēšana, PCR ar orgānu suspensijām.

V posms(5-15 dienas no pētījuma sākuma):

kultūraugu identifikācijas rezultātu uzskaite;

materiāla no mirušiem biotesta dzīvniekiem apskate;

nokauto biotesta dzīvnieku autopsija un ekspertīze;

izdošanu galīgā pozitīva atbilde tiek veikta, pamatojoties uz tularēmijas mikroba tīrkultūras izolēšanu no vietējā materiāla kultūraugiem, tās identificēšanu pēc morfoloģiskām, kultūras īpašībām, pozitīviem imūnseroloģisko reakciju rezultātiem, patogēna DNS klātbūtni, kā arī pamatojoties uz izolāciju. identisku kultūru no beigtiem vai nokautiem laboratorijas dzīvniekiem.

Otrā grupa. Ļoti uzņēmīgi, bet nejutīgi zīdītāji (tie inficējas, kad organismā nonāk atsevišķas tularēmijas izraisītāja mikrobu šūnas, smagi saslimst, bet ātri atbrīvojas no mikroba, iegūstot stabilu imunitāti). Šajā grupā ietilpst lauka peles, visa veida žurkas un zemes vāveres, vāveres, burunduki, bebri, eži, desmans, ūdens cirtiens, ķirbis un dažas citas zīdītāju sugas.

Trešā grupa. Ļaunprātīgi un praktiski nejutīgi zīdītāji. Tie ietver lielāko daļu plēsīgo zīdītāju un lauksaimniecības dzīvnieku.

Lauku materiāla izpētes shēma

Lauka materiāla laboratoriskā izpēte sākas uzreiz pēc tā saņemšanas. Tā īslaicīga uzglabāšana (ne vairāk kā 20 stundas) ir atļauta 4 līdz 6 °C temperatūrā. Kad dzīvniekiem tiek veikta autopsija savākšanas vietā, orgānus var uzglabāt un nogādāt laboratorijā konservantā. Par konservantiem var kalpot vazelīna-parafīna maisījums (1 daļu parafīna un 10 daļas vazelīna eļļas sajauc un 45 minūtes sterilizē, karsējot verdoša ūdens vannā), 5% nātrija hlorīda šķīdums, papildus dziļa sasaldēšana šķidrā slāpeklī, tiek izmantots u.c.. Konservantos un zemā temperatūrā dzīvnieku orgānus var saglabāt vienu mēnesi.

Pētījums tiek veikts ar bioloģisko, bakterioskopisko (gaismas un luminiscējošā mikroskopija), bakterioloģisko (inokulācija uz barības vielu barotnēm, tīrkultūru izolēšana un to identifikācija), molekulāri ģenētiski (PCR analīze) un imūnseroloģiski (RA, RLA, RNHA, RNAt, RNAg , ELISA) metodes. Materiāla izpētes shēma ir atkarīga no dzīvnieku jutīguma grupas un materiāla piegādes formas.

mazie zīdītāji, kas ņemti dabā ar zvejas rīkiem vai dzīvi, tiek izmeklēti ar grupu metodi, vienā paraugā apvienojot vairāku vienas sugas dzīvnieku (5-10) orgānus un noķertus vienuviet.

Pētījumiem tiek ņemti liesas, aknu, limfmezglu gabali, asinis vai "izskalojumi" no krūšu dobuma. Materiāls tiek izmeklēts ar bioloģiskām, molekulāri ģenētiskām un imūnseroloģiskām metodēm.

Orgānu suspensiju izmanto, lai inficētu bioloģiskās pārbaudes dzīvniekus un noteiktu tularēmijas izraisītāja antigēnus un DNS. Asins serums vai "mazgāšana" no krūškurvja dobuma tiek pārbaudīta, vai nav antivielu klātbūtnes pret tularēmijas izraisītāju.

Dzīvnieku līķi kas miruši dabā, miruši laboratorijā vai dzīvnieki, kuriem autopsija atklāja tularēmijai raksturīgas patoloģiskas un anatomiskas izmaiņas, tiek pakļauti individuālai izpētei. Liesas, aknu, nieru, limfmezglu, kaulu smadzeņu gabalus izmeklē ar bioloģiskām, bakterioloģiskām, molekulāri ģenētiskām un imūnseroloģiskām metodēm.

Noteiktas epizootijas apstākļos, pētot pirmās grupas dzīvniekus, var aprobežoties ar orgānu sēšanu uz barības barotnēm un orgānu uztriepes bakterioskopiju, daļu no tiem turot aukstumā līdz pētījumu rezultātu iegūšanai. Apšaubāmos gadījumos izmantojiet bioloģisko metodi. Otrās un trešās grupas dzīvnieki bez kļūmēm tiek pārbaudīti ar bioloģisko metodi.

Varbūtība atklāt tularēmijas izraisītāju pirmās grupas dzīvnieku orgānos mikroskopiskās izmeklēšanas laikā (labāk ir izmantot fluorescējošu mikroskopiju) ir daudz lielāka nekā otrās grupas dzīvnieku līķu orgānu uztriepes bakterioskopijas laikā. .

Mājdzīvnieki(liellopi, cūkas, aitas, ziemeļbrieži) ir sugas, kas ir nejutīgas pret tularēmiju (trešā grupa). Viņu pētījumā galvenokārt tiek izmantotas imūnseroloģiskās metodes (RA, RNGA, ELISA), retāk - intradermāls tests ar tularīnu. Bakterioloģiskās un bioloģiskās metodes izmanto tikai, izmeklējot beigtus, nokautus vai slimus dzīvniekus. Vispirms pārbaudiet limfmezglus un liesu. Seroloģiskajā pētījumā jāņem vērā iespēja atklāt krusteniskas reakcijas ar Brucella un dzīvnieku zarnu mikrobu floru. Mājdzīvnieku serumus vēlams pārbaudīt vismaz divos seroloģiskajos testos. Pozitīvas reakcijas RNGA jāuzrauga RTGA.

Plēsīgo putnu granulas un plēsīgo zīdītāju mēsli ieteicams mācīties individuāli. Tularēmijas mikroba nāve granulās un izkārnījumos notiek ātri (pirmajā dienā; pie negatīvas temperatūras, iespējams, lēnāk), tāpēc šī materiāla bioloģiskie un bakterioloģiskie pētījumi nav piemēroti. Granulu un pakaišu paraugi tiek izmantoti tularēmijas izraisītāja antigēna meklēšanai ar imūnseroloģiskām metodēm un DNS ar PCR.

Asinssūcēji kukaiņi un citi bezmugurkaulnieki tiek pārbaudīti ar grupu metodi, vienas sugas (ģints) kukaiņus vai bezmugurkaulniekus, kas ņemti no vienas vietas, apvieno vienā paraugā.

Pieaugušas iksodīdu ērces apvieno līdz 50 indivīdiem.

Kāpuri ir apvienoti 100-200 eksemplāros, nimfas - 50-100 eksemplāros atkarībā no to treknuma pakāpes. Iksodīdu ērču kāpuru un nimfu mazgāšana spirtā netiek veikta, jo. tas var sabojāt analīzi.

Blusas, gamasīdu ērces, utis šķiro pēc sugām (ģints), kā arī pēc dzīvnieku sugām, no kurām tās savāktas, ievieto sterilās mēģenēs un pēc tam pakļauj apstrādei tādā pašā veidā kā iksodīdu ērču kāpurus un nimfas. .

Asinssūcēju divspārņu kukaiņi tiek eitanizēti ar ētera tvaikiem, lai ierobežotu mobilitāti. Zirgmušiņām tiek provizoriski nogrieztas ekstremitātes un spārni, odi un punduri tiek pārbaudīti kopumā. Vienā analīzē ir iekļautas līdz 25-50 zirgu mušu vai līdz 100 odu vai līdz 250 punduriem.

Hidrobionti - kaddisflijas, amfipodi, dafnijas, ciklopi un citi pirms pētījuma tos mazgā vairākās porcijās ūdens un 1-2 porcijās sterila destilēta ūdens. Dzīvniekiem ar vākiem vai čaumalām pēdējos, ja iespējams, noņem. Dzīvnieki tiek apvienoti grupās pa 5-10-50 īpatņiem atkarībā no atsevišķu sugu lieluma.

Tularēmijas mikroba vai tā DNS noteikšana bezmugurkaulniekiem ir visefektīvākā, izmantojot bioloģisko metodi un PCR. Ir iespējams arī noteikt tularēmijas LPS specifisko antigēnu, izmantojot IC testu.

Ūdens paraugi(100-200 ml) tiek ņemti no dažādām ūdenskrātuvēm: upēm, strautiem, dīķiem, ezeriem, purviem, akām utt. Visefektīvākais ūdens pētījums tularēmijas purva perēkļu nosaukumos ziemā. Paraugus ņem ēnainā vietā, 10-20 cm dziļumā no stāvoša vai vāji plūstoša ūdens virsmas. No katra punkta jāņem 2 paraugi. Paraugus ņem dzīvnieku dzīvotnēs (pie barošanas galdiem, urām, bebru vai ondatras būdām). Patogēna koncentrēšanai izmanto filtrēšanu, centrifugēšanu, magnētiskos sorbentus un citas metodes. Pētījumam tiek izmantota bioloģiskā metode (baltai pelei subkutāni injicē līdz 1 ml, bet jūrascūciņai - līdz 5 ml ūdens), molekulāri ģenētiskās un imunoseroloģiskās metodes, kuru mērķis ir noteikt slimības izraisītāja DNS un antigēnus. tularēmija.

Radās kļūda

Maksājums netika pabeigts tehniskas kļūdas dēļ, līdzekļi no jūsu konta
netika norakstīti. Mēģiniet pagaidīt dažas minūtes un atkārtojiet maksājumu vēlreiz.